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公开(公告)号：CN103555754A
公开(公告)日：2014-02-05
申请号：CN201310521441.1
申请日：2013-10-29
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明公开了一种干酪乳杆菌菌影及其制备方法和应用，属于生物技术领域。本发明选择干酪乳杆菌作为研究对象，通过分离干酪乳杆菌的噬菌体，预测并克隆其裂解基因，将含有克隆得到的裂解基因的重组载体转化干酪乳杆菌，诱导裂解基因表达后制成菌影。本发明以干酪乳杆菌菌影作为抗原传递载体使用，做到了真正意义上的安全可靠。此外，干酪乳杆菌菌影可通过发酵大量生产，冻干后在室温下可保存较长时间，为进一步应用于生产实践降低了成本，也为进一步设计新型安全有效的药物，特别是疫苗的递送系统，从而应用于预防及治疗疾病提供了一种新的思路和方法。
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公开(公告)号：CN101508969A
公开(公告)日：2009-08-19
申请号：CN200910071260.7
申请日：2009-01-14
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明提供的是一种表达传染性胰腺坏死病毒(Infectious pancreas necrosis virus，IPNV)VP2蛋白的重组干酪乳杆菌及制法。根据传染性胰腺坏死病毒VP2蛋白的全基因序列及表达载体质粒的基因融合特点，设计一对引物，进行PCR，获得含有IPNV VP2基因主要抗原位点的1095bp目的片段，将扩增得到的IPNV VP2基因与表面表达的载体质粒pPG1进行连接，通过电转化进入宿主菌干酪乳杆菌Lactobacillus casei 393细胞内，含阳性重组质粒pPG1－IPNV VP2的干酪乳杆菌命名为pPG1－IPNV VP2/L.casei 393。将重组pPG1－IPNV VP2/L.casei 393在乳糖的诱导下进行表达。本发明中构建了传染性胰腺坏死病毒VP2蛋白干酪乳杆菌表达载体系统，表达了含有IPNV VP2蛋白主要抗原位点的约40KDa的目的蛋白，免疫印迹实验和间接免疫荧光试验均表明，所表达的外源蛋白能够与IPNV免疫血清发生反应，表明重组VP2蛋白与IPNV天然抗原一样具有相同的抗原性。
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公开(公告)号：CN118853524B
公开(公告)日：2025-02-11
申请号：CN202411328287.0
申请日：2024-09-24
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12N1/21 , C12N15/12 , C12N15/50 , C12N15/74 , A61K39/385 , A61K39/215 , A61K38/17 , A61P31/14 , C12R1/225
Abstract: 本发明公开了一种共表达猪β‑防御素2与PEDV S1蛋白的重组猪源干酪乳杆菌及其构建方法和应用，属于生物技术领域。本发明以前期构建的表达PEDV S1基因的猪源营养缺陷型副干酪乳杆菌作为口服黏膜传递载体，并通过串联提高pBD2蛋白的外源表达量，构建重组乳杆菌n×pBD2/S1‑ΔHLJ‑27。针对PEDV的肠道黏膜感染，通过该重组乳杆菌对S1蛋白的组成型表达，刺激黏膜特异性免疫应答，从而建立阻断PEDV感染的第一道防线；与此同时，为了增强口服疫苗诱导的黏膜免疫效果，利用该重组乳杆菌进行分泌表达串联的pBD2蛋白，通过外源增加pBD2表达量来增强肠道免疫应答，提高机体获得性免疫水平，进而将口服黏膜疫苗的优势发挥更佳。
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公开(公告)号：CN118852420A
公开(公告)日：2024-10-29
申请号：CN202411132881.2
申请日：2024-08-16
Applicant: 东北农业大学
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , A61K39/42 , A61P31/14 , G01N33/569 , G01N33/577
Abstract: 本发明公开了一种猪δ冠状病毒(Porcine deltacoronavirus，PDCoV)中和性单克隆抗体及其应用，涉及生物技术领域。本发明利用纯化的PDCoV免疫BALB/c小鼠，筛选得到一株猪δ冠状病毒单克隆抗体，经过体外中和试验证明，所述的单克隆抗体对猪δ冠状病毒具有中和活性，能够阻断猪δ冠状病毒感染。利用RT‑PCR的方法获得了该中和抗体的基因序列，经测序获得了其编码的氨基酸序列，所述的猪δ冠状病毒中和性单克隆抗体的重链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，轻链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明的提出为预防和治疗PDCoV感染提供了一种有效的新途径。
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公开(公告)号：CN109633173B
公开(公告)日：2022-02-22
申请号：CN201910008503.6
申请日：2019-01-04
Applicant: 东北农业大学
IPC: G01N33/68 , G01N33/531 , C12N15/66 , C12N15/81 , C07K14/08
Abstract: 本发明公开了一种用于检测IBDV抗体的免疫磁珠间接ELISA试剂盒及其应用。所述的试剂盒中含有偶联有IBDV VP3蛋白的免疫磁珠，其中，所述的IBDV VP3蛋白是通过毕赤酵母表达系统表达，纯化后获得。本发明利用毕赤酵母表达系统表达的重组VP3蛋白作为抗原，建立了一种新的检测IBDV血清抗体的免疫磁珠间接ELISA方法。与商品化IBDV血清抗体检测试剂盒相比较，操作过程比商品化IBDV血清抗体检测试剂盒节省了约1h，且显著节省了血清的用量。实验结果表明本发明以IBDV VP3重组蛋白作为抗原建立的检测鸡血清中IBDV抗体的免疫磁珠间接ELISA方法，具有良好的特异性和敏感性，重复性好，符合率高，能够缩短检测时间且操作简便。本发明的提出为抗鸡IBDV血清抗体的快速检测提供了新的技术手段。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN110607282B
公开(公告)日：2021-05-25
申请号：CN201910788857.7
申请日：2019-08-26
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12N5/20 , C07K16/08 , G01N33/569 , G01N33/577
Abstract: 本发明公开了一种牛细小病毒单克隆抗体及其在检测牛细小病毒感染中的应用。所述的单克隆抗体由保藏编号为CGMCC NO.18301的杂交瘤细胞株分泌产生。此外本发明还提出了用于检测牛细小病毒感染的间接竞争ELISA试剂盒，并建立了相应的间接竞争ELISA检测方法。实验证明，本发明建立的间接竞争ELISA方法具有良好的敏感性、特异性和重复性，比间接ELISA方法和夹心ELISA方法的检测敏感度高出一个数量级。通过对临床样品检测，与PCR结果一致，表明该方法检测结果准确可靠。因此本发明可用于牛细小病毒感染的临床检测，尤其适用于检测早期感染和隐性感染时病毒含量低的病料，同时，也为牛细小病毒流行病学调查及疫情监控提供了一种可靠的方法。
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公开(公告)号：CN106987548B
公开(公告)日：2020-12-18
申请号：CN201710229189.5
申请日：2017-04-10
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明公开了一种同时表达产气荚膜梭菌α、β2、ε、β1外毒素的重组乳酸杆菌及其构建方法和应用。本发明以从基因水平去毒性化改造的产气荚膜梭菌α、β1、β2和ε外毒素为免疫原，改造后的外毒素完全失去致病性，但仍保留其免疫原性，同时以乳酸杆菌作为传递与表达免疫抗原的安全级活菌载体，构建得到了一株能够同时表达产气荚膜梭菌α、β2、ε、β1外毒素的重组乳酸杆菌，并且创制了能够有效预防5个血清型产气荚膜梭菌感染的基因工程乳酸杆菌多价亚单位类毒素口服免疫制剂。本发明的提出为预防产气荚膜梭菌感染提供了有效的技术手段。
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公开(公告)号：CN111073859A
公开(公告)日：2020-04-28
申请号：CN201911280787.0
申请日：2019-12-09
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12N5/20 , C07K16/08 , G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/543
Abstract: 本发明公开了一种检测牛细小病毒的双抗体夹心ELISA试剂盒及其应用。本发明使用纯化后的兔抗BPV VP2蛋白多克隆抗体作为捕获抗体，使用由保藏号为:CGMCC No.18896的杂交瘤细胞株分泌产生的单克隆抗体作为检测抗体，建立了双抗体夹心ELISA方法。特异性试验结果表明该方法特异性良好，与BRV、PRV、PEDV和TGEV均不发生反应。灵敏性试验表明该方法对病毒的最低检出量为3.125×102.8TCID50/mL。重复性试验表明该方法变异系数均小于10％，确定该方法具有良好的重复性。通过对临床样品的检测发现，双抗体夹心ELISA方法与PCR方法的检测结果一致，符合率为100％。本发明的提出可用于牛细小病毒的诊断，并为牛细小病毒感染的防控提供了一种快速检测方法和监测手段。
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公开(公告)号：CN110607282A
公开(公告)日：2019-12-24
申请号：CN201910788857.7
申请日：2019-08-26
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12N5/20 , C07K16/08 , G01N33/569 , G01N33/577
Abstract: 本发明公开了一种牛细小病毒单克隆抗体及其在检测牛细小病毒感染中的应用。所述的单克隆抗体由保藏编号为CGMCC NO.18301的杂交瘤细胞株分泌产生。此外本发明还提出了用于检测牛细小病毒感染的间接竞争ELISA试剂盒，并建立了相应的间接竞争ELISA检测方法。实验证明，本发明建立的间接竞争ELISA方法具有良好的敏感性、特异性和重复性，比间接ELISA方法和夹心ELISA方法的检测敏感度高出一个数量级。通过对临床样品检测，与PCR结果一致，表明该方法检测结果准确可靠。因此本发明可用于牛细小病毒感染的临床检测，尤其适用于检测早期感染和隐性感染时病毒含量低的病料，同时，也为牛细小病毒流行病学调查及疫情监控提供了一种可靠的方法。
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公开(公告)号：CN108169492B
公开(公告)日：2019-12-17
申请号：CN201711382428.7
申请日：2017-12-15
Applicant: 东北农业大学
IPC: G01N33/68
Abstract: 本发明公开了一种用于检测牛轮状病毒的胶体金免疫层析试纸条及其制备方法和应用。所述的试纸条包括从左到右依次连接的样品垫、胶体金垫、硝酸纤维素膜以及吸水滤纸，还包括位于下方的PVC底板，其中PVC底板的作用是提供组装平台，硝酸纤维素膜上具有山羊抗鼠IgG喷涂的质控线，以及兔抗牛轮状病毒多克隆抗体喷涂的检测线，胶体金垫上涂覆有胶体金颗粒标记的鼠抗牛轮状病毒VP6蛋白的单克隆抗体，样品垫提供了待测样品加入的位置；其中，所述的鼠抗牛轮状病毒VP6蛋白的单克隆抗体是由保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会微生物中心的，菌种保藏编号为CGMCC NO.14726的杂交瘤细胞株分泌产生。本发明制备的试纸条，灵敏度好，特异性高，操作简单、快速，适用于现地检测。
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