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公开(公告)号：CN108949648B
公开(公告)日：2019-10-25
申请号：CN201810352668.0
申请日：2018-04-19
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种工程菌及其以廉价底物生产丹参素的应用，属于生物工程技术领域。本发明提供能低成本生产光学纯丹参素的重组菌；所述重组菌同时表达4种酶，分别为酪氨酸酚裂解酶、L‑氨基酸氧化酶、L‑乳酸脱氢酶、α‑羟基羧酸脱氢酶；进一步地，本发明的重组菌还敲除了酚类物质分解基因，强化表达了乳酸转运基因、邻苯二酚转运基因、辅酶合成相关基因中的任意一种或多种。本发明实现了丹参素的高效生产，且方法过程简单、杂质少，具有重要的工业应用价值。
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公开(公告)号：CN110066759A
公开(公告)日：2019-07-30
申请号：CN201910361159.9
申请日：2019-04-30
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种耐金属离子和有机溶剂的羧酸酯酶及其应用，属于酶工程领域。本发明将氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的羧酸酯酶BaCEs04在大肠杆菌中异源表达，得到的羧酸酯酶BaCEs04在Zn2+，NH4+存在下，分别提高了24.3％和23.5％的酶活，其余金属离子Na+，K+，Mg2+，Ca2+，Cu2+，Fe3+对酶活几乎没有影响甚至有略微的提高，说明该羧酸酯酶在存在金属离子的环境中较为稳定。该酶在丙酮，正己烷，异丙醇中放置1h后，酶活分别提高了22％、30％、26％，说明该酶具有较好的有机溶剂耐受性。
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公开(公告)号：CN105200020B
公开(公告)日：2019-04-02
申请号：CN201510717404.7
申请日：2015-10-29
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种底物特异性提高的短小芽胞杆菌CotA漆酶突变体，属于基因工程和酶工程领域。本发明以本实验室前期构建的单突变体L386W CotA漆酶基因为模板，进一步将单突变体的第417位Gly突变为Leu，随后以野生型CotA漆酶为对照，发现复合突变体L386W/G417L对底物2,2‑联氮‑二(3‑乙基‑苯并噻唑‑6‑磺酸)二铵盐(ABTS)具有更高的专一性，提升了短小芽胞杆菌CotA漆酶的工业应用前景。
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公开(公告)号：CN105176940B
公开(公告)日：2019-04-02
申请号：CN201510716673.1
申请日：2015-10-29
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种底物特异性提高的短小芽胞杆菌CotA漆酶突变体，属于基因工程和酶工程领域。本发明以本实验室前期构建的pColdII‑CotA重组质粒为模板，将野生型CotA漆酶氨基酸序列中的第386位Leu突变为Trp，随后以野生型CotA漆酶为对照，发现突变体L386W对底物2,2‑联氮‑二(3‑乙基‑苯并噻唑‑6‑磺酸)二铵盐(ABTS)具有更高的专一性，提升了短小芽胞杆菌CotA漆酶的工业应用前景。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN109486783A
公开(公告)日：2019-03-19
申请号：CN201811449183.X
申请日：2018-11-30
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种可催化西他沙星五元环中间体的ω-转氨酶突变体，属于基因工程和酶工程技术领域。本发明通过对ω-转氨酶晶体结构中B因子较高的氨基酸进行定点突变，即将ω-转氨酶32位置处的Y突变成W，159位置处的Y突变成F，215位置处的I突变成M，252位置处的T突变成A，得到了一种可以催化西他沙星五元环关键中间体的ω-转氨酶突变体。本发明突变体Y32W/Y159F/I215M/T252A催化效率Kcat/Km为0.49min-1·mM-1，催化(S)-5-benzyl-5-azaspiro[2.4]heptan-7-amine生成5-benzyl-5-azaspiro[2.4]heptan-7-one时，突变体的5-benzyl-5-azaspiro[2.4]heptan-7-one最大转化率为77.14％。本发明得到的突变体适用于在工业上手性合成西他沙星五元环关键中间体的应用。
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公开(公告)号：CN109468297A
公开(公告)日：2019-03-15
申请号：CN201811449434.4
申请日：2018-11-30
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12N9/1096 , C12N15/70 , C12P17/165 , C12Y206/01
Abstract: 本发明公开了一种能够催化西他沙星五元环中间体的，属于基因工程和酶工程技术领域。本发明通过对ω-转氨酶晶体结构中B因子较高的氨基酸进行定点突变，即将ω-转氨酶212位置处的L突变成M，215位置处的I突变成M，得到了一种可以催化西他沙星五元环关键中间体的ω-转氨酶突变体。本发明突变体L212M/I215M催化效率Kcat/Km为0.64min-1·mM-1，催化(S)-5-benzyl-5-azaspiro[2.4]heptan-7-amine生成5-benzyl-5-azaspiro[2.4]heptan-7-one时，突变体的5-benzyl-5-azaspiro[2.4]heptan-7-one最大转化率为77.37％。本发明得到的突变体适用于在工业上手性合成西他沙星五元环关键中间体的应用。
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公开(公告)号：CN109370967A
公开(公告)日：2019-02-22
申请号：CN201811234765.6
申请日：2018-10-23
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种工程菌及其在酪醇生产中的应用，属于生物工程技术领域。本发明的基因工程菌导入了L-α-氨基酸转氨酶、L-谷氨酸脱氢酶、α-酮酸脱羧酶、醇脱氢酶，可应用于生物合成酪醇。本发明还公开了重组大肠杆菌基因重组菌的构建方法和应用，进一步地，通过敲除或强化表达大肠杆菌基因组上的相将关基因促进底物的转运及减少产物的分解，提高了重组菌的生产效率。利用本发明的重组菌转化生产酪醇的方法，具有操作简单，成本低，产物合成效率高的特点，具有良好的产业化前景。
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