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公开(公告)号:CN116396876A
公开(公告)日:2023-07-07
申请号:CN202310174396.0
申请日:2023-02-28
Applicant: 云南农业大学
Abstract: 本发明涉及一种生产人参皂苷Rd的酿酒酵母工程菌及其构建方法,属于分子生物学和生物工程技术领域。所述的生产人参皂苷Rd的酿酒酵母工程菌是在产原人参二醇的起始菌株ZW04BY酿酒酵母中敲除β‑葡萄糖苷酶EGH1,过表达葡萄糖磷酸变位酶1、葡萄糖磷酸变位酶2和UDP‑葡萄糖焦磷酸化酶,糖基转移酶Pn1‑31、糖基转移酶PnUGT53、糖基转移酶PnUGT50和原人参二醇合成酶PPDS。本发明获得的酿酒酵母工程菌能够利用葡萄糖发酵生产人参皂苷Rd,产量为56.68±16.21mg/L;酵母生长繁殖较快,仅需发酵罐就可以生产,为人工细胞高效合成人参皂苷Rd奠定了基础。
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公开(公告)号:CN116103315A
公开(公告)日:2023-05-12
申请号:CN202310070555.2
申请日:2023-02-07
Applicant: 云南农业大学
Abstract: 本发明属于分子生物学以及基因工程技术领域,公开了一种三七病程蛋白基因PnPR4及其应用,三七病程蛋白基因PnPR4的核苷酸序列为SEQ ID NO:1。三七病程蛋白基因PnPR4在提高三七对真菌抗性中的应用。应用验证方法包括:分离三七的一个病程相关蛋白基因的蛋白质编码区段,利用大肠杆菌对目的基因进行原核表达,并验证所述基因进行重组表达后的蛋白是否能抑制病原菌生长,为三七抗病育种中基因的选择应用提供了相应的参考。
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公开(公告)号:CN112063647B
公开(公告)日:2023-05-02
申请号:CN202010982096.1
申请日:2020-09-17
Applicant: 云南农业大学
Abstract: 本发明公开了酿酒酵母重组菌Cuol01的构建方法、酿酒酵母重组菌Cuol02及应用,本发明通过同源重组的手段,将生产葫芦二烯醇合成途径的下游模块6个基因:tHMG1、HcCPR1、ERG1、ERG20、ERG9和HcOSC6基因均导入酿酒酵母中得到初始重组菌Cuol01,发现其可产生葫芦二烯醇;再导入甲羟戊酸途径的上游模块7个基因:ERG12、ERG13、ERG19、ERG8、IDI、tHMG1和ERG10基因的表达,得到最终重组菌Cuol02,其葫芦二烯醇产量明显提高;为人工合成达玛二烯和原人参二醇奠定了基础。
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公开(公告)号:CN115968672A
公开(公告)日:2023-04-18
申请号:CN202310071803.5
申请日:2023-02-07
Applicant: 云南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种丛枝菌根和β‑氨基丁酸协同诱导烟草提高抗黑胫病的方法,包括以下步骤:步骤1,烟草育苗,两叶一心时进行移栽;步骤2,移栽时丛枝菌根接种,5天后喷施β‑氨基丁酸;步骤3,移栽30天后将疫霉菌接种到疫霉受体植株的茎部;步骤4,植株表现出明显的黑胫病后,对植株的气体交换参数进行测定以及取样;步骤5,测定植株N、P、K的含量、植株干重、丛枝菌根定殖率、病害指数、防治效果、过氧化氢、丙二醛、根系活力、超氧化物歧化酶、过氧化物酶、过氧化氢酶、抗坏血酸酶、还原性谷胱甘肽含量、脯氨酸含量、总酚含量和黄酮类化合物含量。本发明丛枝菌根和β‑氨基丁酸协同使用对于诱导烟草提高抗黑胫病具有较好的作用效果。
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公开(公告)号:CN113667655B
公开(公告)日:2023-03-14
申请号:CN202110969942.0
申请日:2021-08-24
Applicant: 云南农业大学
Abstract: 本发明公开一种仙茅糖基转移酶Co84A‑471基因及在制备苔黑酚葡萄糖苷中的应用。仙茅糖基转移酶Co84A‑471基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。以苔黑酚和糖基供体UDP‑葡萄糖为原料,在由仙茅糖基转移酶Co84A‑471基因编码得到的仙茅糖基转移酶的催化下,在苔黑酚的C3或C5位上的羟基上进行一次糖基化,生成苔黑酚葡萄糖苷。本发明通过体外合成苔黑酚葡萄糖苷,可控性强,可以减少对原料种植的需求,节约农业用地,生产产物单一,便于后期苔黑酚葡萄糖苷的分离和纯化。所述仙茅糖基转移酶Co84A‑471基因作为苔黑酚葡萄糖苷生物合成的关键基因,还可用于仙茅等植物育种研究。
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公开(公告)号:CN115336532A
公开(公告)日:2022-11-15
申请号:CN202210827180.5
申请日:2022-07-13
Applicant: 云南农业大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明涉及一种可抑制雪胆块茎愈伤组织褐变的诱导方法,属于组织培养领域,本发明包括配制培养基:按照MS培养基2.37g/L、琼脂3.5g/L、蔗糖15g/L、6‑BA 0.2‑1.8mg/L、NAA 0.1‑1.5mg/L配制,调PH至5.6‑6,灭菌、超净工作台倒平板后标记备用;将洗净、消毒后的雪胆块茎在无菌条件下接种于培养基上,然后置于20℃的组培室内培养。本发明通过在培养基内添加6‑BA和NAA,可在有效诱导愈伤组织分化的同时抑制愈伤组织的褐化。
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公开(公告)号:CN111411099B
公开(公告)日:2022-09-27
申请号:CN202010408966.4
申请日:2020-05-14
Applicant: 云南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种雪胆乙酰基转移酶及其编码基因和在制备雪胆甲素中的应用,该雪胆乙酰基转移酶具有如SEQ ID No.1所示的氨基酸序列。本发明首次在雪胆中鉴定获得了雪胆甲素合成途径中的关键酶,即,雪胆乙酰基转移酶;该雪胆乙酰基转移酶能够雪胆乙素C‑25位的羟基转化为乙酰基,从而获得雪胆甲素;基于此,本发明构建了含有雪胆乙酰基转移酶编码基因的重组载体,并进一步构建了基因工程菌,利用转基因工程菌在体外表达雪胆乙酰基转移酶,经进一步对底物雪胆乙素进行催化,直接获得雪胆甲素,无需再通过种植雪胆属植物后提取雪胆甲素;为大量、快速地制备雪胆甲素提供了重要途径。
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公开(公告)号:CN110343678B
公开(公告)日:2022-09-27
申请号:CN201910508188.3
申请日:2019-06-12
Applicant: 云南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种珠子参糖基转移酶UGTPjm1基因及在制备人参皂苷Ro上的应用,珠子参糖基转移酶UGTPjm1基因的核苷酸序列为SEQ ID NO:1所示。以竹节参皂苷IVa和糖基供体UDP‑葡萄糖为原料,在由珠子参糖基转移酶UGTPjm1基因编码得到的珠子参糖基转移酶的催化下,在竹节参皂苷IVa的C3位上的葡萄糖醛酸基团上再一次糖基化,生成人参皂苷Ro。本发明中人参皂苷Ro的生物合成调控基因UGTPjm1,是首次鉴定并成功验证。通过体外合成人参皂苷Ro,管理更加方便,可控性强,可以减少对原料种植的需求,节约农业用地,生产产物单一,便于后期人参皂苷Ro的分离和纯化。珠子参糖基转移酶UGTPjm1基因作为人参皂苷Ro生物合成的关键基因,还可用于珠子参等植物育种研究。
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公开(公告)号:CN114717248A
公开(公告)日:2022-07-08
申请号:CN202210420041.0
申请日:2022-04-21
Applicant: 云南农业大学
Abstract: 本发明公开一种仙茅苔黑酚合酶基因CoORS1及在制备苔黑酚中的应用,所述仙茅苔黑酚合酶基因CoORS1的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示,以乙酰辅酶A和丙二酰辅酶A为原料,在仙茅苔黑酚合酶基因CoORS1的催化下,生成苔黑酚,对于仙茅苔黑酚葡萄糖苷的生物合成调控研究具有重要意义。
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公开(公告)号:CN109266626B
公开(公告)日:2021-11-09
申请号:CN201811094986.8
申请日:2018-09-19
Applicant: 云南农业大学
Abstract: 本发明涉及齐墩果酸葡糖醛酸转移酶及其编码基因和应用,属于植物基因工程和生物技术领域。本发明齐墩果酸葡糖醛酸转移酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3或SEQ ID NO.4所示。核苷酸序列如SEQ ID NO.5、SEQ ID NO.6、SEQ ID NO.7或SEQ ID NO.8所示。本发明齐墩果酸葡糖醛酸转移酶能够特异性地以尿苷二磷酸葡糖醛酸为糖基供体,催化齐墩果酸C‑3位的糖基化反应,从而生成齐墩果酸3‑O‑β‑葡糖醛酸。该转移酶是在齐墩果烷型皂苷合成过程中上游步骤的酶,这对于解析齐墩果烷型皂苷的合成途径,具有重要意义。
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