公开(公告)号：CN117844830A

公开(公告)日：2024-04-09

申请号：CN202410119212.5

申请日：2024-01-29

Applicant: 云南农业大学 ,  云南云科特色植物提取实验室有限公司

Inventor： 张广辉 ,  黄春丽 ,  杨生超 ,  郝冰 ,  陈庚 ,  舒彦宇 ,  李志远 ,  冯孝林 ,  和四梅 ,  卢迎春 ,  马骁 ,  马飞飞 ,  郭振宇 ,  马迪娜 ,  张建丽 ,  贺雪颖 ,  刘勤勤

IPC: C12N15/53 ,  C12N15/81 ,  C12N1/19 ,  C12P33/06 ,  C12P33/00 ,  C12R1/865

Abstract: 本发明提供了一种雪胆细胞色素氧化酶HcCYP87D19基因，所述基因的序列如SEQNO：1所示。本发明构建了共转染雪胆细胞色素氧化酶HcCYP87D19和HcCYP81Q58的转基因酵母工程菌，该菌能够高产多种葫芦素中间体，包括11‑Carbonyl‑cucurbita‑5,23‑diene‑3β,16a,20,25‑tetrol(6)、11‑Carbonyl‑cucurbita‑5,23‑diene‑3β,16α,20,25‑tetrol(6b)、11‑Carbonyl‑cucurbita‑5,23‑diene‑16α,20,25‑triol‑3‑one(6a)、11‑Carbonyl‑cucurbita‑5,24‑diene‑16α,20,23‑triol‑3‑one(6c)，为葫芦素生产提供了来源。

公开(公告)号：CN117821490A

公开(公告)日：2024-04-05

申请号：CN202311746115.0

申请日：2023-12-19

Applicant: 云南农业大学

Inventor： 张广辉 ,  冯孝林 ,  杨生超 ,  郝冰 ,  陈庚 ,  舒彦宇 ,  李志远 ,  马迪娜 ,  和四梅 ,  卢迎春 ,  贺雪颖 ,  张建丽 ,  黄春丽

IPC: C12N15/81 ,  C12N9/04 ,  C12N9/02 ,  C12N9/10 ,  C12N15/53 ,  C12N15/54 ,  C12N15/61 ,  C12P33/02 ,  C12N9/90 ,  C12R1/865

Abstract: 本发明公开了一种编码细胞色素P450酶的多功能基因CYP87D20构建基因工程菌DNHc87‑03的方法，该基因工程菌能催化葫芦二烯醇的C11氧化和C20位羟化生成葫芦素中间体11‑carbonyl‑Cuol和11‑carbonyl‑20β‑hydroxy‑Cuol；一种短链脱氢酶synHcSDR3构建的基因工程菌DNHc87‑S‑01能在11‑carbonyl‑Cuol和11‑carbonyl‑20β‑hydroxy‑Cuol的C3位进行脱氢反应形成酮基分别生成为11‑Carbonyl‑Cucurbita‑5,24‑dien‑3‑one和11‑Carbonyl‑20β‑hydroxy‑Cucurbita‑5,24‑dien‑3‑one，它们是合成葫芦素C/B/D/E/I等的重要中间体，采用酵母同源重组组装构建酿酒酵母底盘细胞生产目标化合物，极大地推动了对葫芦素生物合成分子机理的认知，也将为雪胆甲素和葫芦素的全合成奠定基础。

公开(公告)号：CN117417949A

公开(公告)日：2024-01-19

申请号：CN202311356007.2

申请日：2023-10-19

Applicant: 云南农业大学 ,  云南云科特色植物提取实验室有限公司

Inventor： 张广辉 ,  李志远 ,  杨生超 ,  郝冰 ,  陈庚 ,  舒彦宇 ,  冯孝林 ,  马迪娜 ,  和四梅 ,  卢迎春 ,  马骁 ,  马飞飞 ,  郭振宇 ,  黄春丽 ,  贺雪颖 ,  张建丽

IPC: C12N15/53 ,  C12N15/81 ,  C12N1/19 ,  C12P33/06 ,  C12P33/02 ,  C12R1/865

Abstract: 本发明提供了一种雪胆细胞色素氧化酶HcCYP81Q58基因，所述基因的序列如SEQ NO：1所示。本发明构建了雪胆细胞色素氧化酶HcCYP81Q58转基因酵母工程菌，该菌能够高产多种葫芦素中间体，包括11‑Carbonyl‑cucurbita‑5,23‑diene‑3β,20,25‑triol、11‑Carbonyl‑cucurbita‑5,24‑diene‑3β,20,23‑triol、11‑Carbonyl‑cucurbita‑5,23‑diene‑20,25‑diol‑3β‑one和11‑Carbonyl‑cucurbita‑5,24‑diene‑20,23‑diol‑3β‑one，为葫芦素生产提供了来源。

公开(公告)号：CN111235124B

公开(公告)日：2023-04-07

申请号：CN202010059380.1

申请日：2020-01-19

Applicant: 云南农业大学

Inventor： 杨生超 ,  唐军荣 ,  张广辉 ,  卢迎春 ,  唐卿雁 ,  陈庚 ,  林源 ,  李莹

IPC: C12N9/10 ,  C12N15/54 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P19/56 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种珠子参糖基转移酶UGTPjm2及其在制备竹节参皂苷IVa上的应用。该珠子参糖基转移酶UGTPjm2具有如SEQ ID No.1所示的氨基酸序列。本发明的珠子参糖基转移酶UGTPjm2能够在植物体外催化齐墩果酸‑3‑O‑β‑葡萄糖醛酸苷的C‑28位的羧基糖基化，进而生成竹节参皂苷IVa。为竹节参皂苷IVa的人工生产提供了重要的途径。

公开(公告)号：CN110346494B

公开(公告)日：2021-09-28

申请号：CN201910478273.X

申请日：2019-06-03

Applicant: 云南农业大学

Inventor： 张广辉 ,  陈庚 ,  杨生超 ,  刘冠泽 ,  赵艳 ,  段绍凤 ,  李莹 ,  闫静 ,  龚建溪 ,  郭兆宽

IPC: G01N30/88

Abstract: 本发明公开了一种同时测定灯盏花中4种有效成分含量的方法，所述4种有效成分为灯盏乙素、灯盏甲素、野黄芩素和芹菜素，所述的方法采用如下色谱条件：色谱柱：C18液相色谱柱；流速：0.8～1.2ml/min；柱温：25℃～35℃；检测波长：335nm；进样量：2μl；流动相A：水；流动相B：乙腈；流动相C：0.3％磷酸水溶液；采用梯度洗脱。本发明的优点是：测定方法准确可靠，科学合理。

公开(公告)号：CN119842762A

公开(公告)日：2025-04-18

申请号：CN202510103491.0

申请日：2025-01-22

Applicant: 云南农业大学

Inventor： 杨生超 ,  叶喆 ,  张广辉 ,  和四梅 ,  郝冰 ,  冯孝林 ,  陈庚 ,  舒彦宇 ,  李志远 ,  马迪娜 ,  刘勤勤 ,  卢迎春 ,  马骁 ,  王飞飞 ,  郭振宇

IPC: C12N15/61 ,  C12N9/90 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P33/00 ,  C12N15/10 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明涉及生物工程领域，具体的，本发明提供了一种差向异构酶Epi20基因，所述基因的序列如SEQ NO：1所示，该酶可有效利用葫芦素6a合成葫芦素6d，为葫芦素生产提供了来源。

公开(公告)号：CN119842642A

公开(公告)日：2025-04-18

申请号：CN202510069816.8

申请日：2025-01-16

Applicant: 云南农业大学

Inventor： 杨生超 ,  刘勤勤 ,  张广辉 ,  郝冰 ,  冯孝林 ,  陈庚 ,  舒彦宇 ,  李志远 ,  马迪娜 ,  叶喆 ,  和四梅 ,  卢迎春 ,  马骁 ,  王飞飞 ,  郭振宇 ,  尹正豪 ,  朱竞奇 ,  孟林飞

IPC: C12N9/02 ,  C12N15/53 ,  C12N1/19 ,  C12N15/81 ,  C12P33/06 ,  C12P33/00 ,  C12R1/865

Abstract: 本发明涉及一种雪胆细胞色素氧化酶HcCYP81Q59基因及其应用，属于生物技术领域。本发明雪胆细胞色素氧化酶HcCYP81Q59基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明利用雪胆细胞色素氧化酶HcCYP81Q59基因通过生物工程方法合成22‑Deoxucucurbitacin D，进一步为雪胆素生物合成调控研究奠定基础，同时为未来葫芦素生物工厂化生产提供前期基础。

公开(公告)号：CN117417949B

公开(公告)日：2024-12-20

申请号：CN202311356007.2

申请日：2023-10-19

Applicant: 云南农业大学 ,  云南云科特色植物提取实验室有限公司

Inventor： 张广辉 ,  李志远 ,  杨生超 ,  郝冰 ,  陈庚 ,  舒彦宇 ,  冯孝林 ,  马迪娜 ,  和四梅 ,  卢迎春 ,  马骁 ,  马飞飞 ,  郭振宇 ,  黄春丽 ,  贺雪颖 ,  张建丽

IPC: C12N15/53 ,  C12N15/81 ,  C12N1/19 ,  C12P33/06 ,  C12P33/02 ,  C12R1/865

Abstract: 本发明提供了一种雪胆细胞色素氧化酶HcCYP81Q58基因，所述基因的序列如SEQ NO：1所示。本发明构建了雪胆细胞色素氧化酶HcCYP81Q58转基因酵母工程菌，该菌能够高产多种葫芦素中间体，包括11‑Carbonyl‑cucurbita‑5,23‑diene‑3β,20,25‑triol、11‑Carbonyl‑cucurbita‑5,24‑diene‑3β,20,23‑triol、11‑Carbonyl‑cucurbita‑5,23‑diene‑20,25‑diol‑3β‑one和11‑Carbonyl‑cucurbita‑5,24‑diene‑20,23‑diol‑3β‑one，为葫芦素生产提供了来源。

公开(公告)号：CN116891871A

公开(公告)日：2023-10-17

申请号：CN202211627504.7

申请日：2023-09-08

Applicant: 云南农业大学

Inventor： 郭兆宽 ,  杨生超 ,  张广辉 ,  王益娜 ,  舒彦宇 ,  陈庚 ,  李志远 ,  赵玉成 ,  冯晓林

IPC: C12N15/84 ,  C12N15/61 ,  C12N15/29 ,  C12N15/10 ,  A01H5/00 ,  A01H6/82

Abstract: 本发明公开了一种采用葫芦二烯醇合酶合成葫芦二烯醇的方法，将葫芦二烯醇合酶基因HcOSC6和糙伏毛燕麦的tHMGR基因同时转入烟草中获得合成葫芦二烯醇的转基因烟草。本发明的优点在于：获得的转基因植株能够合成葫芦二烯醇，使得葫芦素关键中间体的获取更加高效便捷。本发明方法简单，易操作，适于规模化生产和市场推广应用，为获取葫芦素关键中间体提供了新途径。

公开(公告)号：CN112063647B

公开(公告)日：2023-05-02

申请号：CN202010982096.1

申请日：2020-09-17

Applicant: 云南农业大学

Inventor： 陈庚 ,  张广辉 ,  杨生超 ,  郭兆宽 ,  王益娜 ,  和四梅 ,  段绍凤 ,  赵艳 ,  林源

IPC: C12N15/81 ,  C12N1/19 ,  C12P33/06 ,  C12N15/53 ,  C12N15/61 ,  C12N15/54 ,  C12N15/60 ,  C12R1/865

Abstract: 本发明公开了酿酒酵母重组菌Cuol01的构建方法、酿酒酵母重组菌Cuol02及应用，本发明通过同源重组的手段，将生产葫芦二烯醇合成途径的下游模块6个基因：tHMG1、HcCPR1、ERG1、ERG20、ERG9和HcOSC6基因均导入酿酒酵母中得到初始重组菌Cuol01，发现其可产生葫芦二烯醇；再导入甲羟戊酸途径的上游模块7个基因：ERG12、ERG13、ERG19、ERG8、IDI、tHMG1和ERG10基因的表达，得到最终重组菌Cuol02，其葫芦二烯醇产量明显提高；为人工合成达玛二烯和原人参二醇奠定了基础。