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公开(公告)号:CN110346494A
公开(公告)日:2019-10-18
申请号:CN201910478273.X
申请日:2019-06-03
Applicant: 云南农业大学
IPC: G01N30/88
Abstract: 本发明公开了一种同时测定灯盏花中4种有效成分含量的方法,所述4种有效成分为灯盏乙素、灯盏甲素、野黄芩素和芹菜素,所述的方法采用如下色谱条件:色谱柱:C18液相色谱柱;流速:0.8~1.2ml/min;柱温:25℃~35℃;检测波长:335nm;进样量:2μl;流动相A:水;流动相B:乙腈;流动相C:0.3%磷酸水溶液;采用梯度洗脱。本发明的优点是:测定方法准确可靠,科学合理。
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公开(公告)号:CN110346494B
公开(公告)日:2021-09-28
申请号:CN201910478273.X
申请日:2019-06-03
Applicant: 云南农业大学
IPC: G01N30/88
Abstract: 本发明公开了一种同时测定灯盏花中4种有效成分含量的方法,所述4种有效成分为灯盏乙素、灯盏甲素、野黄芩素和芹菜素,所述的方法采用如下色谱条件:色谱柱:C18液相色谱柱;流速:0.8~1.2ml/min;柱温:25℃~35℃;检测波长:335nm;进样量:2μl;流动相A:水;流动相B:乙腈;流动相C:0.3%磷酸水溶液;采用梯度洗脱。本发明的优点是:测定方法准确可靠,科学合理。
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公开(公告)号:CN115161208A
公开(公告)日:2022-10-11
申请号:CN202210045159.X
申请日:2022-01-15
Applicant: 云南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种编码短链脱氢酶的基因能催化葫芦二烯醇生成葫芦素中间体cucurbita‑5‑24‑dien‑3‑one,该酶在葫芦二烯醇的C3位进行脱氢反应形成酮基,形成多数葫芦素的骨架,这极大地推动了对葫芦素生物合成分子机理的认知,也将为葫芦素的全合成奠定基础。目前来源于雪胆、南瓜、西瓜、甜瓜、西葫芦、笋瓜等16种葫芦科植物的短链脱氢酶已经被成功克隆验证功能,并使用来源于雪胆的HcSDR1基因,采用酵母同源重组组装构建酿酒酵母底盘细胞生产目标化合物cucurbita‑5‑24‑dien‑3‑one。
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公开(公告)号:CN111518817B
公开(公告)日:2022-08-23
申请号:CN202010408950.3
申请日:2020-05-14
Applicant: 云南农业大学
Abstract: 本发明公开了雪胆三萜合成酶HcOSC6基因及其工程菌和在制备葫芦二烯醇中的应用。该雪胆三萜合成酶HcOSC6基因具有如SEQ ID No.1所示的核苷酸序列,该工程菌能够表达该雪胆三萜合成酶HcOSC6。在以D‑葡萄糖和D‑半乳糖为碳源的培养基中,本发明的转基因工程菌能够在细胞内表达雪胆三萜合成酶HcOSC6,在雪胆三萜合成酶HcOSC6的催化下,酵母内源的底物2,3‑氧化鲨烯会发生环化反应,生成葫芦二烯醇,葫芦二烯醇产量约为5.5mg/L,不仅提供了生产葫芦二烯醇的重要途径,而且为雪胆素等葫芦素的生物合成提供了丰富原材料。
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公开(公告)号:CN111411099A
公开(公告)日:2020-07-14
申请号:CN202010408966.4
申请日:2020-05-14
Applicant: 云南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种雪胆乙酰基转移酶及其编码基因和在制备雪胆甲素中的应用,该雪胆乙酰基转移酶具有如SEQ ID No.1所示的氨基酸序列。本发明首次在雪胆中鉴定获得了雪胆甲素合成途径中的关键酶,即,雪胆乙酰基转移酶;该雪胆乙酰基转移酶能够雪胆乙素C-25位的羟基转化为乙酰基,从而获得雪胆甲素;基于此,本发明构建了含有雪胆乙酰基转移酶编码基因的重组载体,并进一步构建了基因工程菌,利用转基因工程菌在体外表达雪胆乙酰基转移酶,经进一步对底物雪胆乙素进行催化,直接获得雪胆甲素,无需再通过种植雪胆属植物后提取雪胆甲素;为大量、快速地制备雪胆甲素提供了重要途径。
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公开(公告)号:CN115161208B
公开(公告)日:2024-03-12
申请号:CN202210045159.X
申请日:2022-01-15
Applicant: 云南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种编码短链脱氢酶的基因能催化葫芦二烯醇生成葫芦素中间体cucurbita‑5‑24‑dien‑3‑one,该酶在葫芦二烯醇的C3位进行脱氢反应形成酮基,形成多数葫芦素的骨架,这极大地推动了对葫芦素生物合成分子机理的认知,也将为葫芦素的全合成奠定基础。目前来源于雪胆、南瓜、西瓜、甜瓜、西葫芦、笋瓜等16种葫芦科植物的短链脱氢酶已经被成功克隆验证功能,并使用来源于雪胆的HcSDR1基因,采用酵母同源重组组装构建酿酒酵母底盘细胞生产目标化合物cucurbita‑5‑24‑dien‑3‑one。
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公开(公告)号:CN115192663A
公开(公告)日:2022-10-18
申请号:CN202211063212.5
申请日:2022-08-31
Applicant: 云南农业大学 , 香格里拉市天泉川贝科技有限公司
IPC: A61K36/8966 , A61K125/00
Abstract: 本发明属于中药材加工技术领域,具体涉及一种暗紫贝母的加工方法。所述加工方法包括暗紫贝母的清洁、干燥,所述加工方法的具体步骤如下所示:清洁步骤为采挖新鲜三年生暗紫贝母,将其放入面粉中用面粉轻搓,去除其表面的土壤及其他杂质;将清洁干净的暗紫贝母平铺于牛皮纸上恒温干燥。采用本发明加工方法获得的暗紫贝母药材成品乳白色,无褐变,颜色均匀,整体外观好,且产品质量较高。
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公开(公告)号:CN111518817A
公开(公告)日:2020-08-11
申请号:CN202010408950.3
申请日:2020-05-14
Applicant: 云南农业大学
Abstract: 本发明公开了雪胆三萜合成酶HcOSC6基因及其工程菌和在制备葫芦二烯醇中的应用。该雪胆三萜合成酶HcOSC6基因具有如SEQ ID No.1所示的核苷酸序列,该工程菌能够表达该雪胆三萜合成酶HcOSC6。在以D‑葡萄糖和D‑半乳糖为碳源的培养基中,本发明的转基因工程菌能够在细胞内表达雪胆三萜合成酶HcOSC6,在雪胆三萜合成酶HcOSC6的催化下,酵母内源的底物2,3‑氧化鲨烯会发生环化反应,生成葫芦二烯醇,葫芦二烯醇产量约为5.5mg/L,不仅提供了生产葫芦二烯醇的重要途径,而且为雪胆素等葫芦素的生物合成提供了丰富原材料。
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公开(公告)号:CN112063647B
公开(公告)日:2023-05-02
申请号:CN202010982096.1
申请日:2020-09-17
Applicant: 云南农业大学
Abstract: 本发明公开了酿酒酵母重组菌Cuol01的构建方法、酿酒酵母重组菌Cuol02及应用,本发明通过同源重组的手段,将生产葫芦二烯醇合成途径的下游模块6个基因:tHMG1、HcCPR1、ERG1、ERG20、ERG9和HcOSC6基因均导入酿酒酵母中得到初始重组菌Cuol01,发现其可产生葫芦二烯醇;再导入甲羟戊酸途径的上游模块7个基因:ERG12、ERG13、ERG19、ERG8、IDI、tHMG1和ERG10基因的表达,得到最终重组菌Cuol02,其葫芦二烯醇产量明显提高;为人工合成达玛二烯和原人参二醇奠定了基础。
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公开(公告)号:CN111411099B
公开(公告)日:2022-09-27
申请号:CN202010408966.4
申请日:2020-05-14
Applicant: 云南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种雪胆乙酰基转移酶及其编码基因和在制备雪胆甲素中的应用,该雪胆乙酰基转移酶具有如SEQ ID No.1所示的氨基酸序列。本发明首次在雪胆中鉴定获得了雪胆甲素合成途径中的关键酶,即,雪胆乙酰基转移酶;该雪胆乙酰基转移酶能够雪胆乙素C‑25位的羟基转化为乙酰基,从而获得雪胆甲素;基于此,本发明构建了含有雪胆乙酰基转移酶编码基因的重组载体,并进一步构建了基因工程菌,利用转基因工程菌在体外表达雪胆乙酰基转移酶,经进一步对底物雪胆乙素进行催化,直接获得雪胆甲素,无需再通过种植雪胆属植物后提取雪胆甲素;为大量、快速地制备雪胆甲素提供了重要途径。
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