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公开(公告)号:CN110346494B
公开(公告)日:2021-09-28
申请号:CN201910478273.X
申请日:2019-06-03
Applicant: 云南农业大学
IPC: G01N30/88
Abstract: 本发明公开了一种同时测定灯盏花中4种有效成分含量的方法,所述4种有效成分为灯盏乙素、灯盏甲素、野黄芩素和芹菜素,所述的方法采用如下色谱条件:色谱柱:C18液相色谱柱;流速:0.8~1.2ml/min;柱温:25℃~35℃;检测波长:335nm;进样量:2μl;流动相A:水;流动相B:乙腈;流动相C:0.3%磷酸水溶液;采用梯度洗脱。本发明的优点是:测定方法准确可靠,科学合理。
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公开(公告)号:CN115161208B
公开(公告)日:2024-03-12
申请号:CN202210045159.X
申请日:2022-01-15
Applicant: 云南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种编码短链脱氢酶的基因能催化葫芦二烯醇生成葫芦素中间体cucurbita‑5‑24‑dien‑3‑one,该酶在葫芦二烯醇的C3位进行脱氢反应形成酮基,形成多数葫芦素的骨架,这极大地推动了对葫芦素生物合成分子机理的认知,也将为葫芦素的全合成奠定基础。目前来源于雪胆、南瓜、西瓜、甜瓜、西葫芦、笋瓜等16种葫芦科植物的短链脱氢酶已经被成功克隆验证功能,并使用来源于雪胆的HcSDR1基因,采用酵母同源重组组装构建酿酒酵母底盘细胞生产目标化合物cucurbita‑5‑24‑dien‑3‑one。
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公开(公告)号:CN111869565B
公开(公告)日:2023-04-25
申请号:CN202010687824.6
申请日:2020-07-16
Applicant: 云南农业大学
Inventor: 冯垒 , 杨生超 , 张广辉 , 马春花 , 刘冠泽 , 和四梅 , 查明思 , 谢业翠 , 张双艳 , 闫静 , 向贵生 , 郭兆宽 , 李满桥 , 张家琪 , 徐文娟 , 朱金玉 , 韩堂珍
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明公开了一种三七绿色胚性愈伤组织扩繁的培养方法,涉及愈伤组织培养技术领域,包括以下步骤:步骤A:三七愈伤组织的准备;步骤B:液体培养基制作;步骤C:纸桥培养。该三七绿色胚性愈伤组织扩繁的培养方法,通过本配方配置的液体培养基,搭配培养三七愈伤组织的纸桥,通过该种培养方法,使三七愈伤组织能够快速持续的吸收液体培养基内的培养液,使愈伤组织营养吸收稳定均衡且高效,以达到培养三七愈伤组织快速扩繁的效果,通过2,4‑D、6‑BA、NAA和IBA四种激素组成液体培养基,使三七愈伤组织生长稳定性更强,且涨势速度快,愈伤组织健康,生长态势更加优异。
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公开(公告)号:CN111518817A
公开(公告)日:2020-08-11
申请号:CN202010408950.3
申请日:2020-05-14
Applicant: 云南农业大学
Abstract: 本发明公开了雪胆三萜合成酶HcOSC6基因及其工程菌和在制备葫芦二烯醇中的应用。该雪胆三萜合成酶HcOSC6基因具有如SEQ ID No.1所示的核苷酸序列,该工程菌能够表达该雪胆三萜合成酶HcOSC6。在以D‑葡萄糖和D‑半乳糖为碳源的培养基中,本发明的转基因工程菌能够在细胞内表达雪胆三萜合成酶HcOSC6,在雪胆三萜合成酶HcOSC6的催化下,酵母内源的底物2,3‑氧化鲨烯会发生环化反应,生成葫芦二烯醇,葫芦二烯醇产量约为5.5mg/L,不仅提供了生产葫芦二烯醇的重要途径,而且为雪胆素等葫芦素的生物合成提供了丰富原材料。
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公开(公告)号:CN116891871A
公开(公告)日:2023-10-17
申请号:CN202211627504.7
申请日:2023-09-08
Applicant: 云南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种采用葫芦二烯醇合酶合成葫芦二烯醇的方法,将葫芦二烯醇合酶基因HcOSC6和糙伏毛燕麦的tHMGR基因同时转入烟草中获得合成葫芦二烯醇的转基因烟草。本发明的优点在于:获得的转基因植株能够合成葫芦二烯醇,使得葫芦素关键中间体的获取更加高效便捷。本发明方法简单,易操作,适于规模化生产和市场推广应用,为获取葫芦素关键中间体提供了新途径。
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公开(公告)号:CN112063647B
公开(公告)日:2023-05-02
申请号:CN202010982096.1
申请日:2020-09-17
Applicant: 云南农业大学
Abstract: 本发明公开了酿酒酵母重组菌Cuol01的构建方法、酿酒酵母重组菌Cuol02及应用,本发明通过同源重组的手段,将生产葫芦二烯醇合成途径的下游模块6个基因:tHMG1、HcCPR1、ERG1、ERG20、ERG9和HcOSC6基因均导入酿酒酵母中得到初始重组菌Cuol01,发现其可产生葫芦二烯醇;再导入甲羟戊酸途径的上游模块7个基因:ERG12、ERG13、ERG19、ERG8、IDI、tHMG1和ERG10基因的表达,得到最终重组菌Cuol02,其葫芦二烯醇产量明显提高;为人工合成达玛二烯和原人参二醇奠定了基础。
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公开(公告)号:CN111411099B
公开(公告)日:2022-09-27
申请号:CN202010408966.4
申请日:2020-05-14
Applicant: 云南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种雪胆乙酰基转移酶及其编码基因和在制备雪胆甲素中的应用,该雪胆乙酰基转移酶具有如SEQ ID No.1所示的氨基酸序列。本发明首次在雪胆中鉴定获得了雪胆甲素合成途径中的关键酶,即,雪胆乙酰基转移酶;该雪胆乙酰基转移酶能够雪胆乙素C‑25位的羟基转化为乙酰基,从而获得雪胆甲素;基于此,本发明构建了含有雪胆乙酰基转移酶编码基因的重组载体,并进一步构建了基因工程菌,利用转基因工程菌在体外表达雪胆乙酰基转移酶,经进一步对底物雪胆乙素进行催化,直接获得雪胆甲素,无需再通过种植雪胆属植物后提取雪胆甲素;为大量、快速地制备雪胆甲素提供了重要途径。
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公开(公告)号:CN112063647A
公开(公告)日:2020-12-11
申请号:CN202010982096.1
申请日:2020-09-17
Applicant: 云南农业大学
Abstract: 本发明公开了酿酒酵母重组菌Cuol01的构建方法、酿酒酵母重组菌Cuol02及应用,本发明通过同源重组的手段,将生产葫芦二烯醇合成途径的下游模块6个基因:tHMG1、HcCPR1、ERG1、ERG20、ERG9和HcOSC6基因均导入酿酒酵母中得到初始重组菌Cuol01,发现其可产生葫芦二烯醇;再导入甲羟戊酸途径的上游模块7个基因:ERG12、ERG13、ERG19、ERG8、IDI、tHMG1和ERG10基因的表达,得到最终重组菌Cuol02,其葫芦二烯醇产量明显提高;为人工合成达玛二烯和原人参二醇奠定了基础。
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公开(公告)号:CN115161208A
公开(公告)日:2022-10-11
申请号:CN202210045159.X
申请日:2022-01-15
Applicant: 云南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种编码短链脱氢酶的基因能催化葫芦二烯醇生成葫芦素中间体cucurbita‑5‑24‑dien‑3‑one,该酶在葫芦二烯醇的C3位进行脱氢反应形成酮基,形成多数葫芦素的骨架,这极大地推动了对葫芦素生物合成分子机理的认知,也将为葫芦素的全合成奠定基础。目前来源于雪胆、南瓜、西瓜、甜瓜、西葫芦、笋瓜等16种葫芦科植物的短链脱氢酶已经被成功克隆验证功能,并使用来源于雪胆的HcSDR1基因,采用酵母同源重组组装构建酿酒酵母底盘细胞生产目标化合物cucurbita‑5‑24‑dien‑3‑one。
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公开(公告)号:CN111518817B
公开(公告)日:2022-08-23
申请号:CN202010408950.3
申请日:2020-05-14
Applicant: 云南农业大学
Abstract: 本发明公开了雪胆三萜合成酶HcOSC6基因及其工程菌和在制备葫芦二烯醇中的应用。该雪胆三萜合成酶HcOSC6基因具有如SEQ ID No.1所示的核苷酸序列,该工程菌能够表达该雪胆三萜合成酶HcOSC6。在以D‑葡萄糖和D‑半乳糖为碳源的培养基中,本发明的转基因工程菌能够在细胞内表达雪胆三萜合成酶HcOSC6,在雪胆三萜合成酶HcOSC6的催化下,酵母内源的底物2,3‑氧化鲨烯会发生环化反应,生成葫芦二烯醇,葫芦二烯醇产量约为5.5mg/L,不仅提供了生产葫芦二烯醇的重要途径,而且为雪胆素等葫芦素的生物合成提供了丰富原材料。
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