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公开(公告)号:CN104833801B
公开(公告)日:2016-08-17
申请号:CN201510113989.1
申请日:2015-03-16
Applicant: 扬州大学
IPC: G01N33/569
Abstract: 一种检测小鹅瘟抗原的双抗体夹心ELISA试剂盒及其应用,本发明属于生物技术检测领域,本发明包括包被抗小鹅瘟病毒(GPV)单克隆抗体的酶标板、GPV标准阳性抗原和针对GPV不同表位的酶标记抗GPV单克隆抗体。本发明的技术原理:酶联免疫吸附试验(ELISA)即将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面,使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行的技术。本发明可用于检测大分子抗原或特异性抗体等,具有快速、灵敏、简便、易于标准化等优点。
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公开(公告)号:CN105037503A
公开(公告)日:2015-11-11
申请号:CN201510357985.8
申请日:2015-06-25
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明公开了一种AGV2型环形病毒VP3可溶性蛋白及其制备方法。是利用pGEX-6p-1线性化载体以及AGV2病毒VP3基因片段的引物,利用重组酶ExnaseTM II不经酶切连接反应,直接在体外快速重组克隆VP3,转化大肠杆菌,经IPTG诱导表达、实现AGV2的VP3蛋白与GST的融合可溶性表达,并获得纯化的VP3可溶性蛋白。本发明获得的AGV2病毒VP3可溶性表达及纯化的蛋白,可直接提供VP3可容性蛋白作为AGV2诊断抗原;作为免疫原获得抗VP3多克隆抗体;为开展AGV2血清学流行病学调查及VP3功能研究提供有效免疫学试剂,填补国内外空白;并为进一步探究VP3生物学功能具有重要意义。
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公开(公告)号:CN102875682A
公开(公告)日:2013-01-16
申请号:CN201210386353.0
申请日:2012-10-12
Applicant: 扬州大学
IPC: C07K16/42 , C12N5/20 , G01N33/577 , C12R1/91
Abstract: 本发明涉及一种以抗鹌鹑IgG单克隆抗体以及由其制备的试剂盒及检测方法。所述抗鹌鹑IgG单克隆抗体由杂交瘤细胞株CGMCC No.6655分泌。所述试剂盒包括:包被了不同抗原的酶标板,辣根过氧化物酶(HRP)标记抗鹌鹑IgG单克隆抗体,洗涤液,显色试剂。通过将待检血清样品与包被于酶标板上的抗原发生反应,用特异性的辣根过氧化物酶标记的抗鹌鹑IgG单克隆抗体作为二抗进行反应,最后加入底物进行显色反应,从而检出血清中是否产生针对不同包被抗原的抗体,进而判断检测鹌鹑群体是否感染过某些疾病以及对疫苗免疫效果进行评估。此方法简便,快速,可以检测鹌鹑血清中多种抗体,成本低廉,适合广泛推广应用。
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公开(公告)号:CN102504020A
公开(公告)日:2012-06-20
申请号:CN201110440566.2
申请日:2011-12-26
Applicant: 扬州大学
IPC: C07K14/465 , C07K16/18
Abstract: 本发明涉及一种能诱导抗鸡β2-微球蛋白抗体的多肽,该多肽序列为TPSSGSTYACKVEHETLKEPQVYKWDPEF;用该多肽免疫动物如Balb/c小鼠等,制取的抗体不仅能够与转染chβ2M的293T细胞特异性结合,而且能够与禽类巨噬细胞系HD11和CEF细胞中天然的chβ2M特异性反应;该抗体可以用于胸腺,脾脏和法氏囊等组织中的chβ2M分析,也可以用于以流式细胞仪分析不同细胞中的chβ2M。该发明经济快速,方便,适用于相关研究中快速制备抗体工具。
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公开(公告)号:CN101591713B
公开(公告)日:2011-11-02
申请号:CN200910027228.9
申请日:2009-05-25
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明涉及一种用环介导等温扩增(LAMP)技术快速检测小鹅瘟病毒的试剂盒及检测方法。本发明含有10X等温反应缓冲液、Bst DNA聚合酶8M/μL、10mM dNTP、100mM硫酸镁、10μM内引物1、10μM内引物2、10μM外引物1、10μM外引物2和4M甜菜碱的反应液A、反应液B(50mM MgCl2)和反应液C(100X的荧光染料SYBR Green I)。通过对组织样品中DNA、鹅泄殖腔棉拭子样品中DNA提取、小鹅瘟病毒的环介导等温扩增、扩增产物的显色检测,从而检测出小鹅瘟病毒。解决了现有技术时间长、工作量大、交叉污染、操作复杂等缺陷。本发明具有特异性强、灵敏度高、快速且成本低、操作方法更简单,适于现场快速检测。
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公开(公告)号:CN101899534A
公开(公告)日:2010-12-01
申请号:CN201010173082.1
申请日:2010-05-14
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明涉及一种用二重PCR技术对感染番鸭群中小鹅瘟病毒(Goose Parvovirus,GPV)和番鸭细小病毒(Muscovy Duck Parvovirus,MDPV)进行快速鉴别诊断的试剂盒及检测方法。本发明含有Taq DNA聚合酶(5U/μL)、10×PCR buffer、Mg2+(10mmol/L)、dNTP(10mmol/L)、2对特异性引物。通过对组织样品中DNA提取、PCR,从而鉴别出感染番鸭群的病毒类型。解决了现有技术无法快速鉴别两种病毒的缺陷。本发明具有特异性强、灵敏度高、快速等特点,适于临床快速鉴别诊断。
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公开(公告)号:CN101591713A
公开(公告)日:2009-12-02
申请号:CN200910027228.9
申请日:2009-05-25
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明涉及一种用环介导等温扩增(LAMP)技术快速检测小鹅瘟病毒的试剂盒及检测方法。本发明含有10X等温反应缓冲液、Bst DNA聚合酶8M/μL、10mM dNTP、100mM硫酸镁、10μM内引物1、10μM内引物2、10μM外引物1、10μM外引物2和4M甜菜碱的反应液A、反应液B(50mM MgCl2)和反应液C(100X的荧光染料SYBR Green I)。通过对组织样品中DNA、鹅泄殖腔棉拭子样品中DNA提取、小鹅瘟病毒的环介导等温扩增、扩增产物的显色检测,从而检测出小鹅瘟病毒。解决了现有技术时间长、工作量大、交叉污染、操作复杂等缺陷。本发明具有特异性强、灵敏度高、快速且成本低、操作方法更简单,适于现场快速检测。
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公开(公告)号:CN101100670A
公开(公告)日:2008-01-09
申请号:CN200710024386.X
申请日:2007-06-18
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N15/33
Abstract: 一种淋巴组织特异性基因表达调控序列及其构建方法,本发明涉及基因表达调控和基因工程领域,提供了用于淋巴细胞中特异性高表达的基因调控DNA序列。具有马立克氏病病毒编码的vIL8基因淋巴组织特异性基因表达正调控的启动子-470-+10的DNA序列。人们可用该基因序列构建相应的表达载体,驱动目的基因在靶器官组织中的特异性表达,用这些调控DNA序列在特定组织,调控一些抑制肿瘤的基因,包括有调理作用或诱导凋亡、抑制细胞生长信号传导,从而达到抑制、消灭肿瘤的目的,用这些调控DNA序列进行免疫增强和调节的药物研究与开发。
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公开(公告)号:CN1231598C
公开(公告)日:2005-12-14
申请号:CN03131899.1
申请日:2003-06-13
Applicant: 扬州大学
IPC: C12Q1/68 , C12N15/861 , C12N7/01
Abstract: 本发明属于生物技术制药工业中的基因工程生产疫苗药物的技术领域。以中国分离的I群禽腺病毒为材料,通过PCR方法将该病毒基因组的两个末端L片段和r片段、ITR片段扩增出来,克隆进pHC粘粒载体中,并以增强型绿色荧光蛋白(eGFP)基因为报告基因,插入设计好的r片段和ITR片段之间,构建转移质粒载体pFAV-eGFP,然后转染已被野生病毒感染了的鸡胚肾细胞,进行同源重组,筛选重组病毒,获得表达增强型绿色荧光蛋白的重组禽腺病毒。从而确定位于基因组右末端r片段和ITR片段之间的位点为病毒复制非必需区,并以此为载体开发研制相关基因工程产品。
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公开(公告)号:CN1181887C
公开(公告)日:2004-12-29
申请号:CN02138397.9
申请日:2002-10-08
Applicant: 扬州大学
IPC: A61K38/21 , C12N15/81 , C07K14/555 , A61P15/14
Abstract: 本发明属于生物技术制药工业中的基因工程生产多肽药物的技术领域。应用一步法逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术对奶牛γ-干扰素(BovIFN-γ)基因的cDNA序列进行扩增,从奶牛脾淋巴细胞的总RNA中扩增出特异性片段。将BovIFN-γ基因克隆到大肠杆菌表达载体PGEX-6P-1谷光甘肽-S-转移酶的下游,经IPTG诱导后,表达融合蛋白;或将BovIFN-γ基因克隆到酵母高效表达载体,通过转化酵母细胞,获得阳性克隆,并大量表达基因产物;通过亲和层析纯化,大量制备表达产物,通过细胞病变抑制试验证实,表达产物有极好的抑制VSV病毒的活性。或将BovIFN-γ基因插入到pcDNA3,通过大量制备质粒DNA,以质粒DNA直接注射奶牛乳腔,使其BovIFN-γ基因在乳腺中大量表达,从而达到预防或治疗奶牛隐性乳房炎的目的。
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