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公开(公告)号:CN101148679B
公开(公告)日:2011-06-15
申请号:CN200710092678.7
申请日:2007-09-10
Applicant: 重庆大学
Abstract: 本发明公开了一种同时受外源IPTG和O2浓度调控的表达载体及其构建方法,利用乳糖操纵子调节基因LacIq和操纵基因Lac0,与类球红细菌puc操纵子的启动子构建成一个同时受外源IPTG和O2调控的强杂合启动子,同时在结构基因pucB后插入Xa因子、限制性内切酶位点和10个组氨酸编码序列,便于接入外源基因构建成pucB融合蛋白,该表达载体可以在类球红细菌LH2缺失突变株中大量诱导表达,并可经组氨酸亲和层析法分离纯化外源蛋白。该发明可用于利用类球红细菌研究光合细菌中各种光合系统基因的表达以及在类球红细菌表达系统中人为调控外源蛋白的表达和纯化提供了有效的工具。
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公开(公告)号:CN101591622A
公开(公告)日:2009-12-02
申请号:CN200910104221.2
申请日:2009-06-30
Applicant: 重庆大学
Abstract: 本发明公开了一种蜂毒肽基因裂殖酵母工程菌及其构建方法和应用,该工程菌是由蜂毒肽基因裂殖酵母重组表达载体转化的裂殖酵母;其构建方法包括构建蜂毒肽基因裂殖酵母重组表达载体、用蜂毒肽基因裂殖酵母重组表达载体转化裂殖酵母共2个步骤;应用该工程菌生产蜂毒肽的方法包括蜂毒肽的表达、蜂毒肽的分离纯化共2个步骤;操作简便易行,蜂毒肽表达水平高、易于分离纯化、活性强,生产周期短,成本低,弥补了现有蜂毒肽制备方法以及原核表达系统和其它酵母表达系统的不足,可以在降低蜂毒肽对宿主细胞致死性的同时保证蜂毒肽的天然构象和活性,解决蜂毒肽提取纯化困难、合成成本过高等问题,从而为蜂毒肽的基础研究和生产应用提供有力的工具。
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公开(公告)号:CN101148679A
公开(公告)日:2008-03-26
申请号:CN200710092678.7
申请日:2007-09-10
Applicant: 重庆大学
Abstract: 本发明公开了一种同时受外源IPTG和O2浓度调控的表达载体及其构建方法,利用乳糖操纵子调节基因LacIq和操纵基因Lac0,与类球红细菌puc操纵子的启动子构建成一个同时受外源IPTG和O2调控的强杂合启动子,同时在结构基因pucB后插入Xa因子、限制性内切酶位点和10个组氨酸编码序列,便于接入外源基因构建成pucB融合蛋白,该表达载体可以在类球红细菌LH2缺失突变株中大量诱导表达,并可经组氨酸亲和层析法分离纯化外源蛋白。该发明可用于利用类球红细菌研究光合细菌中各种光合系统基因的表达以及在类球红细菌表达系统中人为调控外源蛋白的表达和纯化提供了有效的工具。
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