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公开(公告)号：CN101148679A
公开(公告)日：2008-03-26
申请号：CN200710092678.7
申请日：2007-09-10
Applicant: 重庆大学
Abstract: 本发明公开了一种同时受外源IPTG和O2浓度调控的表达载体及其构建方法，利用乳糖操纵子调节基因LacIq和操纵基因Lac0，与类球红细菌puc操纵子的启动子构建成一个同时受外源IPTG和O2调控的强杂合启动子，同时在结构基因pucB后插入Xa因子、限制性内切酶位点和10个组氨酸编码序列，便于接入外源基因构建成pucB融合蛋白，该表达载体可以在类球红细菌LH2缺失突变株中大量诱导表达，并可经组氨酸亲和层析法分离纯化外源蛋白。该发明可用于利用类球红细菌研究光合细菌中各种光合系统基因的表达以及在类球红细菌表达系统中人为调控外源蛋白的表达和纯化提供了有效的工具。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102180973A
公开(公告)日：2011-09-14
申请号：CN201110066294.4
申请日：2011-03-18
Applicant: 重庆大学
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，涉及一种氨基酸序列如SEQIDNO.1所示的靶向多功能防栓融合蛋白，还涉及编码该融合蛋白的基因、含有该基因的重组表达载体、含有该重组表达载体的转化体以及制备该融合蛋白的方法；本发明的融合蛋白将人源抗菌肽LL-37、水蛭肽Hirudin-12、AAP肽、RGD肽和人凝血因子Xa识别位点进行合理拼接，使靶向成分、抗菌成分、抗凝血酶成分和抗血小板聚集成分之间作用互补且协同增效，可以很好地在血栓部位发挥靶向抗炎和抗凝活性，还能同时修复血管内皮细胞，可从多个途径共同抑制血栓的形成及发展，可用于制备预防和治疗血栓性疾病的药物。
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公开(公告)号：CN101333540A
公开(公告)日：2008-12-31
申请号：CN200810070091.0
申请日：2008-08-06
Applicant: 重庆大学
Abstract: 本发明涉及一种能快速检测外源蛋白表达的光合细菌表达体系及其应用，该能检测外源蛋白表达的表达体系包含表达载体和目的蛋白的诱导表达及分离纯化两部分，其中表达载体含puc操纵子序列。本发明通过将目的蛋白连接在pucA或pucB基因后构建成融合蛋白，就可根据光合细菌在800nm和850nm处是否有特征吸收峰出现来判断目的蛋白是否表达，并根据其峰值和面积推测目的蛋白的表达量，从而大大简化了检测外源目的蛋白是否在表达体系内表达的操作程序并节省了实验时间。
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公开(公告)号：CN102180973B
公开(公告)日：2012-08-29
申请号：CN201110066294.4
申请日：2011-03-18
Applicant: 重庆大学
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，涉及一种氨基酸序列如SEQIDNO.1所示的靶向多功能防栓融合蛋白，还涉及编码该融合蛋白的基因、含有该基因的重组表达载体、含有该重组表达载体的转化体以及制备该融合蛋白的方法；本发明的融合蛋白将人源抗菌肽LL-37、水蛭肽Hirudin-12、AAP肽、RGD肽和人凝血因子Xa识别位点进行合理拼接，使靶向成分、抗菌成分、抗凝血酶成分和抗血小板聚集成分之间作用互补且协同增效，可以很好地在血栓部位发挥靶向抗炎和抗凝活性，还能同时修复血管内皮细胞，可从多个途径共同抑制血栓的形成及发展，可用于制备预防和治疗血栓性疾病的药物。
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公开(公告)号：CN101148679B
公开(公告)日：2011-06-15
申请号：CN200710092678.7
申请日：2007-09-10
Applicant: 重庆大学
Abstract: 本发明公开了一种同时受外源IPTG和O2浓度调控的表达载体及其构建方法，利用乳糖操纵子调节基因LacIq和操纵基因Lac0，与类球红细菌puc操纵子的启动子构建成一个同时受外源IPTG和O2调控的强杂合启动子，同时在结构基因pucB后插入Xa因子、限制性内切酶位点和10个组氨酸编码序列，便于接入外源基因构建成pucB融合蛋白，该表达载体可以在类球红细菌LH2缺失突变株中大量诱导表达，并可经组氨酸亲和层析法分离纯化外源蛋白。该发明可用于利用类球红细菌研究光合细菌中各种光合系统基因的表达以及在类球红细菌表达系统中人为调控外源蛋白的表达和纯化提供了有效的工具。
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公开(公告)号：CN101285076A
公开(公告)日：2008-10-15
申请号：CN200810069805.6
申请日：2008-06-05
Applicant: 重庆大学
Abstract: 本发明公开了一种番茄红素的制备方法，利用PCR技术扩增出Erwinia herbicola的crtI基因并连接到含强启动子Puc的表达载体pRKR5上，构建表达质粒pRKR5－crtI，通过接合转移的方式将其导入光合细菌Rhodobacter sphaeroides突变株TC72中，由于启动子Puc在厌氧条件下高效表达，调控氧浓度可诱导工程菌累积红色色素，经HPLC和吸收光谱分析，工程菌中合成的色素为番茄红素，工程菌的生物量(干重)为2.36gDCW/L，番茄红素含量可达1.52mg/gDCW，该发明为实现工业化生产番茄红素奠定了初步的基础，在生产实践中具有潜在的应用价值。
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