公开(公告)号：CN114262708B

公开(公告)日：2024-07-02

申请号：CN202111586529.2

申请日：2021-12-21

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 王小龙 ,  周世卫 ,  陈玉林 ,  高亚伟 ,  王倩 ,  蔡蓓

IPC: C12N15/12 ,  C12N15/10 ,  C12N15/63 ,  C12N15/66 ,  C12N15/89 ,  C12N15/113 ,  C12N5/10 ,  C12Q1/6888 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了一种生产FecB基因g.A746G定点突变绵羊的试剂盒及其方法。所述的试剂盒中含有FecB‑pegRNA的体外转录模板质粒、FecB‑sgRNA的体外转录模板质粒以及PE2mRNA的体外转录模板质粒，以FecB‑pegRNA的体外转录模板质粒、FecB‑sgRNA的体外转录模板质粒为模板经PCR扩增得到的FecB‑pegRNA体外转录模板序列如SEQ ID No.4所示，FecB‑sgRNA体外转录模板序列如SEQ ID No.5所示。将体外转录获得的pegRNA、sgRNA及PE2mRNA纯化后混合，注射入绵羊受精卵细胞质中，受精卵体外培养后移植入同种雌性绵羊输卵管中，生产的后代经检测后获得FecB基因g.A746G定点突变绵羊。本发明模拟自然界中存在的FecB基因g.A746G绵羊，同时与传统CRISPR/Cas技术相比极大地避免了随机突变、bystander突变、脱靶突变及基因组损伤，因此安全性更高。本发明为绵羊的精确基因编辑提供了重要技术支撑。

公开(公告)号：CN116790402A

公开(公告)日：2023-09-22

申请号：CN202310059606.1

申请日：2023-01-14

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 陈玉林 ,  张科 ,  张恩平 ,  闫怡婷

IPC: C12N1/20 ,  A23L33/135 ,  A23K10/18 ,  A23K50/10 ,  A61K35/741 ,  A61P29/00 ,  A61P1/00 ,  A61P1/04 ,  A61P31/04 ,  A61P1/12 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明属于微生物技术领域，具体涉及一株具有抗炎特性的单形拟杆菌(Bacteroides uniformis)JCM5828、培养方法及应用。所述单形拟杆菌能够恢复DSS诱导的肠道炎症小鼠的结肠长度、提高结肠上皮屏障完整性、降低促炎基因TNF‑α、IL‑6、IL‑1β表达水平、提高抑炎基因IL‑10及紧密连接蛋白基因ZO‑1、Occludin、Claudin‑1的表达水平，具有对肠道炎症的治疗作用，能够抗炎药物、抗炎保健品或者抗炎饲料添加剂等抗炎产品。

公开(公告)号：CN116396915A

公开(公告)日：2023-07-07

申请号：CN202211443801.6

申请日：2022-11-18

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 陈玉林 ,  刘功炜 ,  杨雨鑫 ,  公涵萱 ,  崔雯元

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/31 ,  C12N15/75 ,  C12N15/66 ,  A23K10/37 ,  A23K10/12 ,  C12R1/125

Abstract: 本发明公开了一株无特定抗性基因枯草芽孢杆菌，所述无特定抗性基因枯草芽孢杆菌命名为BSC6ΔA8菌，在中国典型培养物保藏中心的保藏号为CCTCC NO:M20221478。以该无特定抗性基因枯草芽孢杆菌对克林霉素、林可霉素、链霉素和螺旋霉素的抗生素浓度响应更敏感，生物安全性更高。在与小麦秸秆混合发酵48 h后，能有效破坏小麦秸秆的表面形态结构，可降低小麦秸秆的纤维素结晶度约6%，降低小麦秸秆的中性洗涤纤维（NDF）和酸性洗涤纤维（ADF）含量分别为6.6%和12.1%，具备进一步应用于生物饲料生产及动物益生菌产品开发的潜力。

公开(公告)号：CN109679923A

公开(公告)日：2019-04-26

申请号：CN201910041468.8

申请日：2019-01-16

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 陈玉林 ,  金妙函 ,  师丙波 ,  蔡蓓 ,  王小龙

IPC: C12N5/10 ,  C12N15/12 ,  C12N15/85 ,  C12N15/90

CPC classification number: C12N15/907 ,  C07K14/515 ,  C12N15/85 ,  C12N2800/80 ,  C12N2810/10

Abstract: 本发明公开了一种利用CRISPR/Cas9系统生产VEGF164转基因细胞系的方法，步骤如下：构建针对毛囊特异启动子KAP6.1的3’UTR区的同源打靶载体PB-G-H-VEGF164-DsRed；设计并合成针对KAP6.1的3’UTR区的CRISPR/Cas9系统切割位点的sgRNA，将合成的sgRNA克隆入pGL3-U6-sgRNA-PGK-puromycin构成sgRNA转录载体；将同源打靶载体、sgRNA转录载体及Cas9表达载体混合，转染绒山羊胎儿成纤维细胞，经过筛选后获得的阳性绒山羊胎儿成纤维细胞。本发明解决了纯合个体较难获得，基因插入效率较低的问题。

公开(公告)号：CN102062760B

公开(公告)日：2013-03-20

申请号：CN201010554504.X

申请日：2010-11-23

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 陈玉林 ,  韩卫杰 ,  杨朝霞

IPC: G01N30/02 ,  G01N1/28 ,  G01N1/34

Abstract: 本发明公开了一种脂肪脂肪组织中挥发性脂肪酸测定方法，包括以下步骤：A1：脂肪组织样品的皂化；A2：分离挥发性脂肪酸，使用同时蒸馏萃取装置从步骤A1得到的皂化产物中分离挥发性脂肪酸；A3：浓缩；A4：气相色谱分析。本发明在现有技术的基础上，结合同时蒸馏萃取和气相色谱技术，并且针对挥发性脂肪酸的特点在操作步骤上做出适当改进，省去了脂肪酸的提取环节，并将分离的挥发性脂肪酸直接进行气相色谱分析，没有衍生化，建立一套简单、快捷、经济的脂肪组织中挥发性脂肪酸的测定方法，为深入研究脂肪组织中挥发性脂肪酸奠定基础。

公开(公告)号：CN119432677B

公开(公告)日：2025-05-27

申请号：CN202411876345.3

申请日：2024-12-19

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 陈玉林 ,  张科 ,  雷宇

IPC: C12N1/20 ,  A23K10/18 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明涉及微生物技术领域，尤其涉及一株能够提高反刍动物产奶量及乳脂率的布氏普氏菌B14及其应用。一株布氏普氏菌B14，拉丁文名为Prevotella bryantii；保藏编号为CCTCC NO：M 20242730。本发明提供的布氏普氏菌B14能够通过增加反刍动物瘤胃中总挥发性脂肪酸、乙酸、丙酸及戊酸的浓度，以提高反刍动物的产奶量及乳脂率。此外，还具有合成烟酸的功能，能够在反刍动物乳腺中以GPR109A依赖的方式激活mTORC1信号通路，促进脂类合成基因表达，以促进乳脂合成。布氏普氏菌B14还具有降低瘤胃中产甲烷古菌丰度的功能，故其有望通过降低反刍动物的甲烷排放从而提升能量利用效率。

公开(公告)号：CN104101524A

公开(公告)日：2014-10-15

申请号：CN201410318956.6

申请日：2014-07-07

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 王小龙 ,  陈玉林 ,  周光现 ,  牛怡源 ,  师丙波

IPC: G01N1/28 ,  G01N1/34

Abstract: 本发明公开了一种快速提取纯化检测毛样蛋白方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)样品分类，分别剪成小段；(2)0.15％壬基酚聚氧乙烯(9)醚60℃清洗20min，吸干；(3)dd水60℃清洗5min，吸干；(4)二氯甲烷和乙醇洗常温清洗20min，吸干；(5)dd水60℃清洗5min，吸干；(6)0.1M甲醇碱KOH，室温30min，吸干；(7)dd水60℃清洗5min，吸干；(8)磨碎：用水浸湿，液氮研磨；(9)提取：200μL of7M尿素，2M硫脲，50mM Tris，and50mM TCEP，pH4，室温，过夜消化；.(10)纯化步骤。

公开(公告)号：CN102181466B

公开(公告)日：2013-03-20

申请号：CN201110041480.2

申请日：2011-02-21

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 陈玉林 ,  白丁平 ,  方堃 ,  杨明明 ,  何晓琳

IPC: C12N15/66

Abstract: 本发明公开了一种能用于生产转基因羊的piggyBac转座子载体的构建方法，主要步骤包括：合成一段包含piggyBac转座子发生转座所必需的PB5’端和PB3’端碱基序列，合成时在PB5’端和PB3’端中间预留出多克隆位点，然后将该序列克隆到pBluSKm载体中构建成pBluSKm-PB载体；再将Neomycin抗性基因和绿色荧光蛋白基因克隆到pBluSKm-PB载体中最终构建成pBluSKm-PB-NEO-EGFP转座子载体。本发明所获得的转座子载体能够满足细胞筛选、倒置荧光显微镜下显微操作和生产转基因羊等要求。

公开(公告)号：CN102181466A

公开(公告)日：2011-09-14

申请号：CN201110041480.2

申请日：2011-02-21

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 陈玉林 ,  白丁平 ,  方堃 ,  杨明明 ,  何晓琳

IPC: C12N15/66 ,  C12N15/65 ,  C12N5/10

Abstract: 本发明公开了一种能用于生产转基因羊的piggyBac转座子载体的构建方法，主要步骤包括：①合成一段包含piggyBac转座子发生转座所必需的PB5′端和PB3′端碱基序列，合成时在PB5′端和PB3′端中间预留出多克隆位点，然后将该序列克隆到pBluSKm载体中构建成pBluSKm-PB载体；再将Neomycin抗性基因和绿色荧光蛋白基因克隆到pBluSKm-PB载体中最终构建成pBluSKm-PB-NEO-EGFP转座子载体。本发明所获得的转座子载体能够满足细胞筛选、倒置荧光显微镜下显微操作和生产转基因羊等要求。

公开(公告)号：CN118109479A

公开(公告)日：2024-05-31

申请号：CN202410299220.2

申请日：2024-03-15

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 王昕 ,  王妞 ,  王小龙 ,  陈玉林 ,  郭一 ,  钟震宇 ,  王鑫淼

IPC: C12N15/19 ,  C07K14/52 ,  C12Q1/6888

Abstract: 本发明属于基因工程领域，具体涉及绒山羊毛囊发育关键基因TGIF1及其应用。具体技术方案包括：一种绒山羊基因，所述基因为TGIF1基因，所述TGIF1基因的DNA序列如SEQ ID No：1所示。本发明首次发现TGIF1特异性定位于绒山羊毛囊隆突区HFSC中，并首次发现TGIF1可抑制绒山羊HFSC的增殖，促进绒山羊HFSC凋亡和分化。基于该特性，通过敲除或抑制表达、插入或过表达TGIF1基因，可以针对性调控绒山羊HFSC的增殖、凋亡和分化，选育出提高羊绒产量的绒山羊品种。