一种基于TALEN介导的Sp110巨噬细胞特异打靶载体及重组细胞

    公开(公告)号:CN104293833A

    公开(公告)日:2015-01-21

    申请号:CN201410528091.6

    申请日:2014-10-09

    Abstract: 本发明公开了一种基于TALEN介导的Sp110巨噬细胞特异打靶载体及重组细胞,对牛胎儿成纤维细胞进行基因打靶获得的M-S位点定点敲入Sp110基因的牛胎儿成纤维细胞。利用打靶载体中的MSR1启动子,使得定点敲入的Sp110在且仅在牛的外周血巨噬细胞中正常转录和表达。本发明利用电穿孔的方法将打靶载体和TALEN位点特异性核酸切割酶表达载体共转染牛胎儿成纤维细胞,通过PCR和Southern Blotting筛选和验证获得了打靶的阳性克隆细胞。以该阳性克隆细胞为核供体移入牛去核卵母细胞,获得转基因克隆胚胎。将转基因克隆胚胎移植到发情的受体牛子宫中,最终生产成活的转基因克隆牛。

    一种灵芝绵羊乳酸奶组合物及其制备方法

    公开(公告)号:CN112998074A

    公开(公告)日:2021-06-22

    申请号:CN202110399780.1

    申请日:2021-04-14

    Abstract: 本发明公开了一种灵芝绵羊乳酸奶组合物及其制备方法,属于乳制品加工技术领域,本发明的灵芝绵羊乳酸奶组合物包括80‑100重量份的绵羊乳、0.05‑0.2重量份的破壁灵芝孢子粉、2‑5重量份的微生物发酵剂和5‑10重量份的蔗糖。本发明的灵芝绵羊乳酸奶配方设计合理,营养均衡,且制备方法简便,兼具绵羊乳、灵芝的营养成分和功能特性,及益生菌保健等多重优点,具有增强免疫力、降胆固醇、促进胃肠消化、维持肠道菌群平衡、营养保健等功效作用。本发明产品的硬度、稠度高于普通酸奶,口感更为细腻且醇厚顺滑,无山羊乳酸奶的膻味,呈良好浅褐色,风味协调,酸甜适中,组织均匀,并具有良好的发酵风味,可行性高,易于推广实施。

    一种基于TALEN介导的Sp110巨噬细胞特异打靶载体及重组细胞

    公开(公告)号:CN104293833B

    公开(公告)日:2017-10-10

    申请号:CN201410528091.6

    申请日:2014-10-09

    Abstract: 本发明公开了一种基于TALEN介导的Sp110巨噬细胞特异打靶载体及重组细胞,对牛胎儿成纤维细胞进行基因打靶获得的M‑S位点定点敲入Sp110基因的牛胎儿成纤维细胞。利用打靶载体中的MSR1启动子,使得定点敲入的Sp110在且仅在牛的外周血巨噬细胞中正常转录和表达。本发明利用电穿孔的方法将打靶载体和TALEN位点特异性核酸切割酶表达载体共转染牛胎儿成纤维细胞,通过PCR和Southern Blotting筛选和验证获得了打靶的阳性克隆细胞。以该阳性克隆细胞为核供体移入牛去核卵母细胞,获得转基因克隆胚胎。将转基因克隆胚胎移植到发情的受体牛子宫中,最终生产成活的转基因克隆牛。

    一种羊肺腺瘤病毒的体外稳定培养方法

    公开(公告)号:CN105420200A

    公开(公告)日:2016-03-23

    申请号:CN201610033932.5

    申请日:2016-01-19

    CPC classification number: C12N7/00 C12N2740/12021

    Abstract: 本发明公开了一种羊肺腺瘤病毒的体外稳定培养方法,该方法包括以下步骤:分离、纯化和培养患肺腺瘤的羊肺泡Ⅱ型细胞,设计并合成核苷酸序列(上游:5’-GATCCGGCCGGTGCTTCTAGGAATATTCAAGACGTAATCCTAGGAGCACCGGCATTTTTGTCGACA-3’,下游:5’-AGCTTGTCGACAAAAATGCCGGTGCTCCTAGGATTACGTCTTGAATATTCCTAGAAGCACCGGCCG-3’),构建siRNA干扰载体,将siRNA干扰载体转染肺泡Ⅱ型细胞。本发明的有益之处在于:本发明的培养方法通过siRNA技术让exJSRV在体外培养的细胞中稳定增殖。

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