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公开(公告)号：CN103160528B
公开(公告)日：2014-06-11
申请号：CN201310073405.3
申请日：2013-03-07
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明公开了增强型单体细菌荧光素酶基因luxAB，其核苷酸序列如SEQ？ID？NO：1所示。以及所述的增强型单体细菌荧光素酶基因luxAB作为生物发光报告基因的应用。本专利将luxA和luxB基因融合表达后形成的单体蛋白经过易错PCR突变和化学随机突变，克隆到pBluescriptII载体中，筛选得到9个荧光强度增强的突变体，然后经过shuffling技术，得到一个增强型单体细菌荧光素酶基因luxAB。从实验结果我们看出该增强型单体细菌荧光素酶不仅可以在革兰氏阴性菌种表达出有活性的荧光蛋白而且还可以应用到革兰氏阳性菌中，是很有前景的生物发光报告基因。
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公开(公告)号：CN103616502A
公开(公告)日：2014-03-05
申请号：CN201310413981.8
申请日：2013-09-12
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: G01N33/53
CPC classification number: C12Q1/6818 , C12Q2565/101 , C12Q2565/601
Abstract: 本发明公开了一种基于细菌荧光素酶BRET技术检测蛋白质相互作用的方法，构建荧光供体克隆pBluescript-pLac::luxAB-MCS；受体蛋白选择绿色荧光蛋白GFP等；在MCS处选择合适酶切位点分别将三种荧光蛋白克隆到MCS处；产生BRET信号的模式体；检测三个BRET模式体的荧光素酶的荧光强度；选择三个荧光强度值都较强的模式体作为BRET信号产生的荧光供体；通过生物荧光显微镜(Leica)检测荧光蛋白的表达情况，选择合适的荧光受体；通过荧光分光光度计检测BRET模式体的信号。本发明通过细菌荧光素酶luxAB作为检测两蛋白互作的荧光供体与eYFP作为荧光受体产生BRET信号，构建BRET模型，该系统可以在体内检测两个蛋白的动态互作，提高了检测蛋白质相互作用的准确性，作为检测原核细胞内蛋白质互作的较理想系统。
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公开(公告)号：CN117625430B
公开(公告)日：2025-02-28
申请号：CN202310681790.3
申请日：2023-06-09
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明公开了一种激活放线菌沉默次生代谢产物合成基因簇(BGC)表达的方法，涉及微生物次生代谢产物技术领域，其技术要点为：该方法采用微生物群体感应信号分子刺激放线菌沉默基因簇，使放线菌沉默BGCs被激活；所使用的群体感应信号分子包括但不限于Farnesol、Tyrosol、3‑oxo‑C12‑HSL和Tryptophol。本发明的方法为一种新型激活放线菌沉默基因簇表达的方法，即为一种快速、高效激活不同放线菌中沉默BGCs的策略，本发明的方法将为激活自然界中大量存在的沉默BGCs宝库，深入发掘新型放线菌天然产物提供有效途径，从而为医药、农业等多领域的研发贡献更多更好的新型先导化合物。
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公开(公告)号：CN118207236A
公开(公告)日：2024-06-18
申请号：CN202410197028.2
申请日：2024-02-22
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明公开了一种激活真菌沉默基因簇表达的方法，涉及微生物次级代谢产物技术领域，该方法为：采用代表性微生物群体感应信号分子刺激代表性真菌的沉默基因簇，使其部分代表性BGCs以及部分沉默BGCs被激活；其中，代表性真菌包括但不限于球孢白僵菌；所述群体感应信号分子包括但不限于Farnesol、Tyrosol、3‑oxo‑C12‑HSL、γ‑Butyrolactone、Oxylipin和Tryptophol。本发明通过常见的代表性群体感应信号分子对球孢白僵菌ACCC30006沉默BGCs激活的作用，开发了一种新型信号分子激活真菌沉默基因簇的表达的方法，本发明的方法将为充分发掘新型真菌天然产物提供有效途径，将为农业绿色杀虫剂研制、临床药物研发等领域贡献更多更好的新型先导化合物。
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公开(公告)号：CN114703166B
公开(公告)日：2023-07-28
申请号：CN202210474152.X
申请日：2022-04-29
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N9/42 , C12N15/56 , A61K38/47 , A61P31/10 , A01N63/50 , A01P3/00 , A23L3/3571 , A23B7/155 , C12N15/70
Abstract: 本发明公开了一种假结核耶尔森氏菌抗真菌蛋白、应用及分离纯化方法，所述蛋白的氨基酸序列由SEQ ID NO:1所示，或在SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列中经取代、缺失或插入一个或多个氨基酸序列获得具有同等活性的蛋白。本发明还提供了所述抗真菌效应蛋白的编码基因、表达载体或工程菌，本发明还提供了假结核耶尔森氏菌抗真菌蛋白的分离纯化方法。所述蛋白在抗真菌药剂中的应用以及所属蛋白的编码基因在转化植物中的应用。本发明涉及的YPK_D305抗真菌基因属于一个几丁质酶，该基因具有更高的抗真菌活性，靶向作用真菌范围也更广泛，为病原真菌防治提供策略和途径，具有较大的学术价值和潜在的应用前景。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN114634887B
公开(公告)日：2023-07-04
申请号：CN202210180459.9
申请日：2022-02-25
Applicant: 浙江隆木环保科技有限公司 , 庆阳陇沣海绵城市建设管理运营有限责任公司 , 西北农林科技大学
Abstract: 本发明公开了一株耐低温耐盐碱解磷菌及培养方法及其应用，该菌分离自甘肃省庆阳市小崆峒沟盐碱土壤中，经鉴定为醋酸钙不动杆菌(Acinetobacter calcoaceticus)，命名为醋酸钙不动杆菌QY‑3，该菌保藏单位为：中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，地址：中国武汉武汉大学，保藏日：2021.1.14，保藏编号：CCTCC NO:M 2021067。本发明提供的耐低温耐盐碱解磷菌在15℃的摇床培养条件下最大可耐受pH值8、50g/LNaCl和pH值9、30g/LNaCl以及pH 10、10g/LNaCl的盐碱环境，并能有效将不溶性Ca3(P04)2转化为可溶磷。本发明提供的耐低温耐盐碱解磷菌抗逆能力强，在低温盐碱条件下具有较强解磷能力，进而减少盐碱地磷肥使用，为我国盐碱地治理提供解决办法。
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公开(公告)号：CN115322923B
公开(公告)日：2023-06-13
申请号：CN202210777205.5
申请日：2022-06-30
Applicant: 浙江隆木环保科技有限公司 , 庆阳陇沣海绵城市建设管理运营有限责任公司 , 西北农林科技大学
Abstract: 本发明公开了一株解磷菌在盐碱地中的应用。该菌分离自甘肃省庆阳市小崆峒沟盐碱土壤中，经鉴定为Mixta theicola，命名为米克斯塔菌N1，该菌保藏单位为：中国典型培养物保藏中心（CCTCC），地址：中国武汉武汉大学，保藏日：2021.11.1，保藏登记号为：CCTCC M 20211350。该菌株能够在低温和较高盐碱环境中生存，并且在低温盐碱环境中具有较强的解磷能力，该菌株在低温盐碱条件下的解磷特性，可以有效为盐碱土壤中植物生长提供有效的磷，并且适合应用于我国寒冷地区广泛分布的盐碱地，为提高我国寒冷地区盐碱土壤的磷供给及盐碱地的开发利用提供了解决办法。
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公开(公告)号：CN114921438A
公开(公告)日：2022-08-19
申请号：CN202210518228.4
申请日：2022-05-12
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明公开了假结核耶尔森氏菌效应蛋白及其应用，属于生物化学、分子生物学和基因工程等技术领域，包括：Tce1，其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示或某一个位点氨基酸的突变；和/或Tce2，其氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示或某一个位点氨基酸的突变。所示的氨基酸序列中通过替换、缺失或插入一个或几个氨基酸所获得的具有同等活性的蛋白质。本发明还提供了所述效应蛋白的编码基因、表达载体、工程菌，类假结核耶尔森氏菌效应蛋白的分离纯化方法，所述蛋白在辅助治疗肠道耐药致病细菌感染药物制备过程中的应用。本发明涉及的Tce1、Tce2效应蛋白具有更安全、更广谱的杀菌活性。
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公开(公告)号：CN111569047A
公开(公告)日：2020-08-25
申请号：CN202010412287.4
申请日：2020-05-15
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明公开了一种蛋白型锰离子螯合剂、免疫抑制剂及应用，属于基因工程领域，包括假结核耶尔森氏菌转锰效应蛋白，所述蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示；在所述的蛋白上螯合Mn2+。转锰效应蛋白可特异并高效与锰离子结合，且在增强细菌的致病能力方面发挥了重要作用，具体体现在该效应蛋白编码基因缺失突变体菌株降低了假结核耶尔森氏菌对小鼠的致病能力，并且该效应蛋白编码基因缺失突变体菌株更能激活宿主细胞的天然免疫应答；本发明公开的转锰效应蛋白在制备特异性锰离子螯合剂以及免疫抑制剂方面均具有潜在应用前景，同时为增强细菌抗环境胁迫能力提供了新的途径。
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公开(公告)号：CN108586587B
公开(公告)日：2020-05-05
申请号：CN201810451847.X
申请日：2018-05-12
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C07K14/24 , C12N15/31 , A01N47/44 , A01P7/04 , C12P21/02 , C07K1/36 , C07K1/34 , C07K1/22 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种假结核耶尔森氏菌杀虫蛋白及其编码基因和应用，属于基因工程和生物农药技术领域，所述杀虫蛋白为由SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列组成的蛋白质，或在SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列中经取代、缺失或插入一个或几个氨基酸序列所获得的具有同等活性的蛋白质。本发明还提供了所述杀虫蛋白的编码基因、表达载体、工程菌、本发明还提供了类假结核耶尔森菌杀虫蛋白分离纯化方法。所述蛋白在杀虫药剂中的应用以及所述蛋白的编码基因在转化植物中的应用。本发明提供了一种杀虫蛋白的编码基因；本发明的杀虫蛋白可以用于杀死大蜡螟、棉铃虫、甜菜夜蛾和亚洲玉米螟等鳞翅目害虫，提高转基因作物的杀虫能力。
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