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公开(公告)号：CN114854789A
公开(公告)日：2022-08-05
申请号：CN202210486953.8
申请日：2022-05-06
Applicant: 苏州大学
IPC: C12N15/866 , C12N15/38 , C12N5/10 , A61K39/245 , A61K47/69 , A61P31/20
Abstract: 本发明公开了一种纳米晶体包裹CyHv‑2核酸亚单位疫苗的制备方法，重组病毒基因转染家蚕培养细胞，再培养至细胞发病，然后收集细胞培养上清，获重组病毒，再将重组病毒接种家蚕幼虫或家蚕培养细胞，通过收集感染家蚕的血淋巴或家蚕培养细胞，离心处理即可获得纳米晶体包裹的疫苗，为纳米晶体包裹CyHv‑2核酸亚单位疫苗；所述重组病毒基因含有CyHv‑2核酸序列以及部分多角体基因序列。现有技术公开的多角体CyHv‑2疫苗都为微米尺寸，本发明采用新的方法，得到纳米晶体包裹CyHv‑2核酸亚单位疫苗。
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公开(公告)号：CN114685687A
公开(公告)日：2022-07-01
申请号：CN202210481243.6
申请日：2022-05-05
Applicant: 苏州大学
IPC: C07K19/00 , C12N15/866 , C12N15/62 , C12N7/01 , A01K67/033
Abstract: 本发明公开了含金丝织网蜘蛛大壶状腺丝蛋白复合丝的制备方法，将重组病毒接种5龄家蚕幼虫，桑叶添食后收集蚕丝，得到含金丝织网蜘蛛大壶状腺丝蛋白复合丝；所述重组病毒含有表达金丝织网蜘蛛大壶状腺丝蛋白的序列；重组病毒AcNPV‑FibH‑MaSp‑g接种5龄家蚕幼虫，用浸渍或喷洒过抗生素药液的凉干后的新鲜桑叶饲养，后用新鲜桑叶饲养至熟蚕；用浸渍或喷洒过蜕皮激素药液的新鲜桑叶饲喂熟蚕；或直接用蜕皮激素药液体喷熟蚕，将熟蚕移至簇具，营茧，采茧，经过缫丝获含金丝织网蜘蛛大壶状腺丝蛋白的复合丝。利用本发明可获取含有金丝织网蜘蛛大壶状腺丝蛋白的蚕丝，以满足制备各种生物材料对丝蛋白的多样性的需求。
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公开(公告)号：CN114317572A
公开(公告)日：2022-04-12
申请号：CN202111657441.5
申请日：2021-12-31
Applicant: 苏州大学
Abstract: 本发明涉及一种抗传染性脾肾坏死病毒的circRNA疫苗及其构建方法与应用。合成5’端依次为体外T7（或S6）转录启动子、脑心肌炎病毒的内部核糖体进入位点IRES、N6‑甲基腺嘌呤m6A位点、传染性脾肾坏死病毒ISKNV主要衣壳蛋白MCP开放读码框的融合序列P‑IRES‑m6A‑MCP，以P‑IRES‑m6A‑MCP为模板，用T7（或S6）转录酶体外转录RNA，用DNaseI去除DNA模板后，用T4 RNA连接酶连接环化，用RNase R酶去除线性RNA后获环状RNA，即circRNA‑MCP。该circRNA‑MCP免疫注射后可减少传染性脾肾坏死病的发生。
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公开(公告)号：CN108743933A
公开(公告)日：2018-11-06
申请号：CN201810534460.0
申请日：2018-05-29
Applicant: 苏州大学
CPC classification number: A61K39/12 , A61K47/42 , A61K2039/70 , A61P7/04 , A61P31/14 , A61P31/22 , C12N15/815 , C12N2710/16034 , C12N2720/12034
Abstract: 本发明涉及一种基于酵母表达载体的蛋白微晶包埋鲤疱疹病毒II型‑草鱼出血病毒亚单位疫苗的构建方法，用AOX1启动子控制家蚕质型多角体病毒蛋白基因；用TEF1启动子控制来自于草鱼出血病毒的VP6、VP7和鲤疱疹病毒II型ORF72、ORF66、ORF81、ORF82以及质型多角体病毒VP3的经密码子优化后抗原表位融合序列VP6‑VP7‑ORF72‑ORF66‑ORF81‑ORF82‑VP3，构建酵母表达载体pPICZA‑BmCPVpolh‑GCRV6/7‑CyHV72/66/81/82‑BmCPVVP3。该载体转化酵母菌，用甲醇诱导表达，表达的多抗原表位融合蛋白在家蚕质型多角体病毒VP3引导下包埋进重组家蚕质型多角体蛋白内，形成包埋鲤疱疹病毒II型‑草鱼出血病毒亚单位疫苗的蛋白微晶，该蛋白微晶经碳酸钠－碳酸氢钠溶液裂解，然后用盐酸溶液调pH至7.12，离心后的上清即为鲤疱疹病毒II型‑草鱼出血病毒联合亚单位疫苗抗原。
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公开(公告)号：CN116904509A
公开(公告)日：2023-10-20
申请号：CN202310563109.5
申请日：2023-05-18
Applicant: 苏州大学
IPC: C12N15/85 , C12N15/866 , C12N15/67 , C12N9/02 , C07K14/435 , C07K14/005
Abstract: 本发明涉及基因工程领域，具体涉及封闭形成circRNA的断裂位点提高外源基因表达水平的方法，外源基因比如为萤火虫荧光素酶基因。通过查寻鉴定获得萤火虫荧光素酶基因luc形成circRNA的断裂位点，合成形成circRNA的断裂位点封闭的luc基因的DNA序列，进一步在家蚕细胞中表达circRNA的断裂位点突变的luc基因，通过减少luc circRNA的形成，增加luc mRNA的丰度，从而提高外源基因表达水平。从而实现提高luc基因的表达水平。本发明所公开的技术方案为提高外源基因表达水平提供了一种全新的方法。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN107653315B
公开(公告)日：2020-06-05
申请号：CN201710960636.4
申请日：2017-10-16
Applicant: 苏州大学附属第一医院
IPC: C12Q1/6883 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了lncRNAs作为活动性肺结核病特异性标志物的应用。lncRNAs有组织特异性与时空特异性，不同组织之间的lncRNAs表达量不同，同一组织或器官在不同生长阶段，其中的lncRNAs表达量也会变化，本发明首次公开了两个lncRNAs作为活动性肺结核病特异性标志物，利用临床上比较容易直接获得的全血标本，结合设计的引物对进行RT‑qPCR验证lncRNAs的差异表达，具有快速、简单、省时、检测灵敏度高，样品消耗少的优点，是非常适合的利用差异表达的lncRNAs诊断活动性肺结核病的方法，对研究控制肺结核病的传播，降低其发生率具有重要的意义。
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公开(公告)号：CN114317572B
公开(公告)日：2024-07-26
申请号：CN202111657441.5
申请日：2021-12-31
Applicant: 苏州大学
Abstract: 本发明涉及一种抗传染性脾肾坏死病毒的circRNA疫苗及其构建方法与应用。合成5’端依次为体外T7（或S6）转录启动子、脑心肌炎病毒的内部核糖体进入位点IRES、N6‑甲基腺嘌呤m6A位点、传染性脾肾坏死病毒ISKNV主要衣壳蛋白MCP开放读码框的融合序列P‑IRES‑m6A‑MCP，以P‑IRES‑m6A‑MCP为模板，用T7（或S6）转录酶体外转录RNA，用DNaseI去除DNA模板后，用T4 RNA连接酶连接环化，用RNase R酶去除线性RNA后获环状RNA，即circRNA‑MCP。该circRNA‑MCP免疫注射后可减少传染性脾肾坏死病的发生。
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公开(公告)号：CN114181969B
公开(公告)日：2024-05-28
申请号：CN202111499178.1
申请日：2021-12-09
Applicant: 苏州大学
Abstract: 本发明涉及固定化蛋白领域，具体涉及一种制备包裹外源蛋白的多角体的方法。通过基因工程方法利用杆状病毒表达系统在家蚕培养细胞或家蚕中共表达家蚕质型多角体蛋白、带有家蚕质型多角体病毒结构蛋白VP5标签以及蛋白酶特异性断裂位点的融合外源蛋白，从而形成包裹外源蛋白质的多角体。形成的多角体可以通过简单的差速离心实现纯化；多角体对其包裹的外源蛋白有保护和缓释作用。纯化的多角体在碱性条件下裂解后，用盐酸溶液调pH至多角体蛋白等电点，可以通过离心使多角体蛋白沉淀，而融合外源蛋白留存在上清中，从而可以快速、方便地获得融合外源蛋白；融合外源蛋白通过相应的蛋白酶酶切移除VP5标签可以方便地获得更接近天然的外源蛋白。
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公开(公告)号：CN114432435B
公开(公告)日：2024-05-17
申请号：CN202210090324.3
申请日：2022-01-25
Applicant: 苏州大学
IPC: A61K39/215 , A61P31/14 , C12N15/50 , C12N15/866
Abstract: 本发明公开了一种基于多角体纳米结构的SARS‑Cov‑2疫苗及其构建方法和应用，利用多角体纳米结构包裹SARS‑Cov‑2刺突蛋白受体结合域（RBD），实现SARS‑Cov‑2疫苗免疫原的制备。通过构建体外重组杆状病毒载体表达多角体和RBD的融合蛋白，利用多角体蛋白前110氨基酸残基能够形成纳米晶体结构的特点，实现多角体和RBD的融合表达，且RBD蛋白能够被多角体蛋白晶体包裹；此蛋白晶体在实验室只需简单离心就可分离纯化，直接用于免疫实验，应用此法制备的疫苗，过程简单、纯度较高、常温保存和运输。
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公开(公告)号：CN114432435A
公开(公告)日：2022-05-06
申请号：CN202210090324.3
申请日：2022-01-25
Applicant: 苏州大学
IPC: A61K39/215 , A61P31/14 , C12N15/50 , C12N15/866
Abstract: 本发明公开了一种基于多角体纳米结构的SARS‑Cov‑2疫苗及其构建方法和应用，利用多角体纳米结构包裹SARS‑Cov‑2刺突蛋白受体结合域（RBD），实现SARS‑Cov‑2疫苗免疫原的制备。通过构建体外重组杆状病毒载体表达多角体和RBD的融合蛋白，利用多角体蛋白前110氨基酸残基能够形成纳米晶体结构的特点，实现多角体和RBD的融合表达，且RBD蛋白能够被多角体蛋白晶体包裹；此蛋白晶体在实验室只需简单离心就可分离纯化，直接用于免疫实验，应用此法制备的疫苗，过程简单、纯度较高、常温保存和运输。
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