公开(公告)号：CN110713997B

公开(公告)日：2022-02-01

申请号：CN201911065858.5

申请日：2019-11-04

Applicant: 江南大学

Inventor： 廖祥儒 ,  李静 ,  杨邵岚 ,  黄琳 ,  蔡宇杰 ,  管政兵

IPC: C12N9/24 ,  C12N15/56 ,  C12P19/14 ,  C12P19/12 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种降解产物均一的琼胶酶及其应用，属于酶工程领域。本发明将类芽孢杆菌(Paenibacillus odorifer)来源的琼胶酶AgaP1(其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示)在大肠杆菌中异源表达，其中粗酶液中琼脂糖和琼脂粉为底物的酶活分别为5716.68U/L和4116.96U/L。纯化得到的琼胶酶AgaP1纯酶液能够降解琼脂糖得到单一降解产物新琼二糖，是一种具有工业应用前景的琼胶酶。

公开(公告)号：CN109486785B

公开(公告)日：2020-06-09

申请号：CN201811450486.3

申请日：2018-11-30

Applicant: 江南大学

Inventor： 廖祥儒 ,  翟李欣 ,  赖英杰 ,  杨邵岚 ,  蔡宇杰 ,  管政兵

IPC: C12N9/10 ,  C12N15/54 ,  C12P13/00 ,  C12P13/04

Abstract: 本发明公开了一种催化效率提高的ω‑转氨酶突变体及其应用，属于基因工程和酶工程技术领域。本发明通过对ω‑转氨酶晶体结构中B因子较高的氨基酸进行定点突变，即将ω‑转氨酶32位置处的Y突变成L，得到了一种催化效率得到提高的ω‑转氨酶突变体。本发明突变体Y32L催化效率Kcat/Km提高了21.84倍，催化(R)‑phenethylamine生成acetophenone时，突变体的acetophenone最大转化率比天然酶提高了7.72倍。本发明得到的突变体比天然ω‑转氨酶更适用于在工业上的应用。

公开(公告)号：CN109486780B

公开(公告)日：2020-06-09

申请号：CN201811350818.0

申请日：2018-11-14

Applicant: 江南大学

Inventor： 廖祥儒 ,  翟李欣 ,  赖英杰 ,  杨邵岚 ,  蔡宇杰 ,  管政兵

IPC: C12N9/10 ,  C12N15/54 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种催化效率提高的ω‑转氨酶突变体，属于基因工程和酶工程技术领域。本发明通过对ω‑转氨酶晶体结构中B因子较高的氨基酸进行定点突变，即将ω‑转氨酶215位置处的I突变成M，得到了一种催化效率得到提高的ω‑转氨酶突变体。本发明突变体I215M催化效率Kcat/Km提高了17.39倍，催化(R)‑phenethylamine生成acetophenone时，突变体的acetophenone最大转化率比天然酶提高了6.99倍。本发明得到的突变体比天然ω‑转氨酶更适用于在工业上的应用。

公开(公告)号：CN109486785A

公开(公告)日：2019-03-19

申请号：CN201811450486.3

申请日：2018-11-30

Applicant: 江南大学

Inventor： 廖祥儒 ,  翟李欣 ,  赖英杰 ,  杨邵岚 ,  蔡宇杰 ,  管政兵

IPC: C12N9/10 ,  C12N15/54 ,  C12P13/00 ,  C12P13/04

Abstract: 本发明公开了一种催化效率提高的ω-转氨酶突变体及其应用，属于基因工程和酶工程技术领域。本发明通过对ω-转氨酶晶体结构中B因子较高的氨基酸进行定点突变，即将ω-转氨酶32位置处的Y突变成L，得到了一种催化效率得到提高的ω-转氨酶突变体。本发明突变体Y32L催化效率Kcat/Km提高了21.84倍，催化(R)-phenethylamine生成acetophenone时，突变体的acetophenone最大转化率比天然酶提高了7.72倍。本发明得到的突变体比天然ω-转氨酶更适用于在工业上的应用。

公开(公告)号：CN109402188A

公开(公告)日：2019-03-01

申请号：CN201811219769.7

申请日：2018-10-19

Applicant: 江南大学

Inventor： 廖祥儒 ,  翟李欣 ,  赖英杰 ,  杨邵岚 ,  蔡宇杰 ,  管政兵

IPC: C12P13/00 ,  C12P13/04 ,  C12N9/10 ,  C12N15/54 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种来自短小芽孢杆菌的ω-转氨酶及在生物胺化中的应用，属于生物工程技术领域。本发明首次从Bacillus pumilus W3中分离、鉴定了ω-转氨酶基因，并选用大肠杆菌重组表达系统生产密码子优化后的ω-转氨酶能大幅提高其产量，使更易达到工业化应用要求。本发明发现该ω-转氨酶以(R)-α-phenethylamine为底物时，最适作用pH为7.0，最适作用温度为45℃；同时，该R-ω-转氨酶pH稳定性及温度稳定性都非常好，对实验组(以(R)-α-phenethylamine为底物)的催化活性优于对照组(以(S)-α-phenethylamine为底物)，表明该重组ω-转氨酶具有很好选择性合成R-手性胺的功能，具有较大应用潜力。

公开(公告)号：CN109370998A

公开(公告)日：2019-02-22

申请号：CN201811449478.7

申请日：2018-11-30

Applicant: 江南大学

Inventor： 廖祥儒 ,  翟李欣 ,  赖英杰 ,  杨邵岚 ,  蔡宇杰 ,  管政兵

IPC: C12N9/10 ,  C12N15/54 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P41/00 ,  C12P7/26

Abstract: 本发明公开了一种催化效率提高的ω-转氨酶突变体I215F，属于基因工程和酶工程技术领域。本发明通过对ω-转氨酶晶体结构中B因子较高的氨基酸进行定点突变，即将ω-转氨酶215位置处的I突变成F，得到了一种催化效率得到提高的ω-转氨酶突变体。本发明突变体I215F催化效率Kcat/Km提高了1.92倍，催化(R)-phenethylamine生成acetophenone时，突变体的acetophenone最大转化率比天然酶提高了3.79倍。本发明得到的突变体比天然ω-转氨酶更适用于在工业上的应用。