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公开(公告)号：CN113684166A
公开(公告)日：2021-11-23
申请号：CN202110926226.4
申请日：2021-08-12
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种高效合成软骨素及其寡聚糖的重组谷氨酸棒杆菌，属于生物工程技术领域。本发明构建的重组谷氨酸棒杆菌生产的软骨素寡聚糖的产量达到20g L‑1。通过构建软骨素合成途径并异源表达软骨素裂解酶，可以直接一步法发酵获得软骨素寡聚糖。本发明为微生物高效合成高纯度软骨素奠定了坚实的基础，构建的重组谷氨酸棒杆菌适合于工业化生产应用。
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公开(公告)号：CN111621533B
公开(公告)日：2021-09-28
申请号：CN202010596134.X
申请日：2020-06-28
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种人工酶法高效生产硫酸软骨素A的方法，属于生物工程技术领域。本方法经过微生物异源表达了一个双功能蛋白软骨素4‑O‑磺基转移酶C4ST和芳基磺基转移酶AST IV，用于催化软骨素合成硫酸软骨素A，结合酶的定点突变和反应体系组分的优化，加速硫酸软骨素的合成效率。
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公开(公告)号：CN109097386B
公开(公告)日：2021-07-27
申请号：CN201811044297.6
申请日：2018-09-07
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种基于sRNA介导的枯草芽孢杆菌转录后调控系统，属于生物工程技术领域。本发明在基因组上对基因的表达进行精确的调控，例如改变细胞形态达到所希望的生物形态，例如对代谢途径进行精确的动态调控提高生物合成目标产物产量，达到良好效果。与其他调控方法相比，具有较低的诱导浓度和很高的稳定性，具有精确的动态调控的优势，操作简便，应用广泛。
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公开(公告)号：CN112708571A
公开(公告)日：2021-04-27
申请号：CN202110069401.2
申请日：2021-01-19
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了发酵生产可控分子量硫酸软骨素的重组酵母及其应用，属于生物工程技术领域。本发明利用合成生物学技术和基因工程手段，以毕赤酵母GS115为出发菌株，在细胞内异源表达了硫酸软骨素合成途径相关蛋白：来自大肠杆菌K4的KfoC，KfoA，来自小鼠的软骨素硫酸转移酶C4ST或C6ST，来自枯草芽孢杆菌的UDP‑葡萄糖脱氢酶TuaD，来自普通变形杆菌的硫酸软骨素裂解酶ABCI，得到合成硫酸软骨素A(CSA)和硫酸软骨素C(CSC)的生产菌株，通过控制诱导剂甲醇的浓度和诱导的时间可以得到特定分子量的硫酸软骨素A和C。本发明首次实现了利用微生物发酵碳源合成分子量可控的特定构型的硫酸软骨素。
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公开(公告)号：CN111471669A
公开(公告)日：2020-07-31
申请号：CN201910747051.3
申请日：2019-08-14
Applicant: 江南大学 , 美药星(南京)制药有限公司 , 南京汉欣医药科技有限公司
Abstract: 本发明公开了一种肝素裂解酶突变体及其重组表达的方法，属于生物工程技术领域。本发明提供的肝素裂解酶III有更高的催化效率和热稳定性，突变体S264F/Y490K/D321N的催化效率比原始菌株提高了1.68倍，更有利于低分子量肝素的制备。本发明还对来自变形拟杆菌来源的肝素裂解酶III进行了异源重组表达，胞内酶活可以达到4000U/L以上。
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Patent Agency Ranking
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公开(公告)号：CN105950597B
公开(公告)日：2019-12-24
申请号：CN201610512679.1
申请日：2016-07-01
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种提高酸性脲酶热稳定性的方法，属于生物工程技术领域。本发明通过融合酸性脲酶结构基因，获得了最适温度降低,由70℃降解到60℃,而热稳定性提高的脲酶突变体。在70℃加热30min,脲酶残留活力由80％提高到96％。本发明首次提出，通过融合酸性脲酶结构基因UreA、UreB、UreC的方法来提高酸性脲酶热稳定性的策略，并且获得了热稳定性提高的酸性脲酶，更有利于酸性脲酶的工业化应用。
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公开(公告)号：CN110358719A
公开(公告)日：2019-10-22
申请号：CN201910664772.8
申请日：2019-07-23
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种发酵合成麦角硫因的工程菌株及其构建方法，属于生物工程技术领域。本发明以大肠杆菌和枯草芽孢杆菌为宿主，以枯草芽孢杆菌、大肠杆菌与酿酒酵母的三穿梭质粒pEBS为表达载体，在大肠杆菌和枯草芽孢杆菌引入不同来源egtABCDE基因簇进行异源表达。实现生物合成麦角硫因。然后对egtABCDE基因簇进行优化表达，包括密码子优化、启动子优化和不同组合表达，同时优化培养基及添加的甲硫氨酸、组氨酸甜菜碱、组氨酸、半胱氨酸，经过优化表达和优化培养条件，实现了高效生物合成麦角硫因。本发明为微生物系统高效发酵制备麦角硫因奠定了基础，适合于工业化生产应用。
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公开(公告)号：CN110016458A
公开(公告)日：2019-07-16
申请号：CN201910333500.X
申请日：2019-04-24
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种发酵合成α-红没药醇的工程菌株及其构建方法，属于生物工程技术领域。本发明以大肠杆菌和枯草芽孢杆菌为宿主，以枯草芽孢杆菌、大肠杆菌与酿酒酵母的三穿梭质粒pEBS为表达载体，在大肠杆菌和枯草芽孢杆菌引入将不同来源的BBS基因和不同来源的ispA基因进行不同组合的优化表达，再进行密码子优化、RBS优化、启动子优化等策略，实现了高效生物合成α-红没药醇。本发明为微生物系统高效发酵制备(﹣)-α-红没药醇奠定了基础，适合于工业化生产应用。
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公开(公告)号：CN106148292B
公开(公告)日：2019-05-17
申请号：CN201610527445.4
申请日：2016-07-06
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种肌醇加氧酶突变体及其应用，属于生物工程技术领域。本发明通过定点突变获得酶活提升的肌醇加氧酶突变体，并将其与醛酸脱氢酶(udh)在酵母中共表达，强化了葡萄糖二酸合成途径。经比较，重组毕赤酵母Pichia pastoris GS115‑udh‑mioxK59V/R171S产量最高，摇瓶发酵培养时，在YPD‑MI培养基中，生产葡萄糖二酸1.20g/L。本发明采用代谢工程策略，改造微生物菌株来合成目的产物葡萄糖二酸，为生物法高效生产葡萄糖二酸奠定了一定基础。
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