一种发酵小分子透明质酸的重组兽疫链球菌

    公开(公告)号:CN107227284B

    公开(公告)日:2020-06-09

    申请号:CN201710390552.1

    申请日:2017-05-27

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种发酵小分子透明质酸的重组兽疫链球菌,属于生物工程技术领域。本发明将水蛭来源的透明质酸酶在兽疫链球菌中进行异源表达,选取9种信号肽与透明质酸酶N端融合,并采用Pspac诱导型启动子和链球菌RBS,通过比较酶活,筛选合适的信号肽,实现了透明质酸酶在兽疫链球菌中的高效分泌表达,同时通过降解兽疫链球菌自身所产大分子透明质酸,获得了活性小分子透明质酸,并有一定的产量提升。本发明为微生物系统高效发酵制备小分子透明质酸奠定了基础,适合于工业化生产应用。

    一种基于sRNA介导的枯草芽孢杆菌转录后调控系统

    公开(公告)号:CN109097386A

    公开(公告)日:2018-12-28

    申请号:CN201811044297.6

    申请日:2018-09-07

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种基于sRNA介导的枯草芽孢杆菌转录后调控系统,属于生物工程技术领域。本发明在基因组上对基因的表达进行精确的调控,例如改变细胞形态达到所希望的生物形态,例如对代谢途径进行精确的动态调控提高生物合成目标产物产量,达到良好效果。与其他调控方法相比,具有较低的诱导浓度和很高的稳定性,具有精确的动态调控的优势,操作简便,应用广泛。

    一种高产透明质酸寡糖的重组枯草芽孢杆菌的构建方法

    公开(公告)号:CN110055201B

    公开(公告)日:2021-05-28

    申请号:CN201910164544.4

    申请日:2019-03-05

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种高产透明质酸寡糖的重组枯草芽孢杆菌的构建方法,属于生物工程技术领域。本发明选择yoyJ‑yoyA、lytH、lytD、lytG、lytC作为整合位点,将途径基因glmM、glmS、glmU、tuaD和水蛭来源的透明质酸水解酶基因H6LHyal整合到枯草芽孢杆菌基因组中,不仅提高了透明质酸寡糖的产量,还提高了生物量、有利于后期进行透明质酸寡糖的分离纯化。在3L发酵罐发酵40h时透明质酸寡糖的产量达36.04g/L。其3L发酵罐水平的透明质酸平均分子量HA Mw约为3.3×104Da。本发明为微生物系统高效发酵制备透明质酸寡糖奠定了基础,适合于工业化生产应用。

    一种高产透明质酸寡糖的重组枯草芽孢杆菌的构建方法

    公开(公告)号:CN110055201A

    公开(公告)日:2019-07-26

    申请号:CN201910164544.4

    申请日:2019-03-05

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种高产透明质酸寡糖的重组枯草芽孢杆菌的构建方法,属于生物工程技术领域。本发明选择yoyJ-yoyA、lytH、lytD、lytG、lytC作为整合位点,将途径基因glmM、glmS、glmU、tuaD和水蛭来源的透明质酸水解酶基因H6LHyal整合到枯草芽孢杆菌基因组中,不仅提高了透明质酸寡糖的产量,还提高了生物量、有利于后期进行透明质酸寡糖的分离纯化。在3L发酵罐发酵40h时透明质酸寡糖的产量达36.04g/L。其3L发酵罐水平的透明质酸平均分子量HA Mw约为3.3×104Da。本发明为微生物系统高效发酵制备透明质酸寡糖奠定了基础,适合于工业化生产应用。

    一种发酵合成α-红没药醇的工程菌株及其构建方法

    公开(公告)号:CN110016458B

    公开(公告)日:2022-08-23

    申请号:CN201910333500.X

    申请日:2019-04-24

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种发酵合成α‑红没药醇的工程菌株及其构建方法,属于生物工程技术领域。本发明以大肠杆菌和枯草芽孢杆菌为宿主,以枯草芽孢杆菌、大肠杆菌与酿酒酵母的三穿梭质粒pEBS为表达载体,在大肠杆菌和枯草芽孢杆菌引入将不同来源的BBS基因和不同来源的ispA基因进行不同组合的优化表达,再进行密码子优化、RBS优化、启动子优化等策略,实现了高效生物合成α‑红没药醇。本发明为微生物系统高效发酵制备(﹣)‑α‑红没药醇奠定了基础,适合于工业化生产应用。

    一种基于sRNA介导的枯草芽孢杆菌转录后调控系统

    公开(公告)号:CN109097386B

    公开(公告)日:2021-07-27

    申请号:CN201811044297.6

    申请日:2018-09-07

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种基于sRNA介导的枯草芽孢杆菌转录后调控系统,属于生物工程技术领域。本发明在基因组上对基因的表达进行精确的调控,例如改变细胞形态达到所希望的生物形态,例如对代谢途径进行精确的动态调控提高生物合成目标产物产量,达到良好效果。与其他调控方法相比,具有较低的诱导浓度和很高的稳定性,具有精确的动态调控的优势,操作简便,应用广泛。

    一种发酵合成麦角硫因的工程菌株及其构建方法

    公开(公告)号:CN110358719A

    公开(公告)日:2019-10-22

    申请号:CN201910664772.8

    申请日:2019-07-23

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种发酵合成麦角硫因的工程菌株及其构建方法,属于生物工程技术领域。本发明以大肠杆菌和枯草芽孢杆菌为宿主,以枯草芽孢杆菌、大肠杆菌与酿酒酵母的三穿梭质粒pEBS为表达载体,在大肠杆菌和枯草芽孢杆菌引入不同来源egtABCDE基因簇进行异源表达。实现生物合成麦角硫因。然后对egtABCDE基因簇进行优化表达,包括密码子优化、启动子优化和不同组合表达,同时优化培养基及添加的甲硫氨酸、组氨酸甜菜碱、组氨酸、半胱氨酸,经过优化表达和优化培养条件,实现了高效生物合成麦角硫因。本发明为微生物系统高效发酵制备麦角硫因奠定了基础,适合于工业化生产应用。

    一种发酵合成α-红没药醇的工程菌株及其构建方法

    公开(公告)号:CN110016458A

    公开(公告)日:2019-07-16

    申请号:CN201910333500.X

    申请日:2019-04-24

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种发酵合成α-红没药醇的工程菌株及其构建方法,属于生物工程技术领域。本发明以大肠杆菌和枯草芽孢杆菌为宿主,以枯草芽孢杆菌、大肠杆菌与酿酒酵母的三穿梭质粒pEBS为表达载体,在大肠杆菌和枯草芽孢杆菌引入将不同来源的BBS基因和不同来源的ispA基因进行不同组合的优化表达,再进行密码子优化、RBS优化、启动子优化等策略,实现了高效生物合成α-红没药醇。本发明为微生物系统高效发酵制备(﹣)-α-红没药醇奠定了基础,适合于工业化生产应用。

    一种发酵合成麦角硫因的工程菌株及其构建方法

    公开(公告)号:CN110358719B

    公开(公告)日:2021-05-04

    申请号:CN201910664772.8

    申请日:2019-07-23

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种发酵合成麦角硫因的工程菌株及其构建方法,属于生物工程技术领域。本发明以大肠杆菌和枯草芽孢杆菌为宿主,以枯草芽孢杆菌、大肠杆菌与酿酒酵母的三穿梭质粒pEBS为表达载体,在大肠杆菌和枯草芽孢杆菌引入不同来源egtABCDE基因簇进行异源表达。实现生物合成麦角硫因。然后对egtABCDE基因簇进行优化表达,包括密码子优化、启动子优化和不同组合表达,同时优化培养基及添加的甲硫氨酸、组氨酸甜菜碱、组氨酸、半胱氨酸,经过优化表达和优化培养条件,实现了高效生物合成麦角硫因。本发明为微生物系统高效发酵制备麦角硫因奠定了基础,适合于工业化生产应用。

    一种发酵小分子透明质酸的重组兽疫链球菌

    公开(公告)号:CN107227284A

    公开(公告)日:2017-10-03

    申请号:CN201710390552.1

    申请日:2017-05-27

    Applicant: 江南大学

    CPC classification number: C12N9/2474 C12P19/26 C12Y302/01035

    Abstract: 本发明公开了一种发酵小分子透明质酸的重组兽疫链球菌,属于生物工程技术领域。本发明将水蛭来源的透明质酸酶在兽疫链球菌中进行异源表达,选取9种信号肽与透明质酸酶N端融合,并采用Pspac诱导型启动子和链球菌RBS,通过比较酶活,筛选合适的信号肽,实现了透明质酸酶在兽疫链球菌中的高效分泌表达,同时通过降解兽疫链球菌自身所产大分子透明质酸,获得了活性小分子透明质酸,并有一定的产量提升。本发明为微生物系统高效发酵制备小分子透明质酸奠定了基础,适合于工业化生产应用。

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