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公开(公告)号：CN106148265A
公开(公告)日：2016-11-23
申请号：CN201610561891.7
申请日：2016-07-15
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种产硫酸软骨素裂解酶的重组枯草芽孢杆菌及其应用，属于生物工程技术领域。本发明将普通变形杆菌来源的硫酸软骨素裂解酶在枯草芽孢杆菌中进行异源表达，选取信号肽amyX，采用3种强组成型启动子和pP43NMK载体本身的强RBS，并加入组氨酸标签以利于后续纯化，实现了硫酸软骨素裂解酶在枯草芽孢杆菌中表达酶活的提高。本发明为食品级微生物高效生产制备硫酸软骨素裂解酶奠定了一定的基础，适合于工业化生产应用。
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公开(公告)号：CN102120961A
公开(公告)日：2011-07-13
申请号：CN201010582055.X
申请日：2010-12-10
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种提高米根霉(Rhizopus oryzae)产酸能力的方法，属于发酵工程领域。本发明通过降低R.oryzae深层发酵时微生物生长环境中的微量金属离子浓度，改变R.oryzae的菌落形态，进而提高菌体产酸能力。正常生长条件下(Zn2+、Mg2+及K+的浓度不为0)时，菌落形态成丝状或团状，发酵结束后，富马酸产量达到39.93g/L。当种子培养基中Zn2+、Mg2+及K+的浓度均为0时，R.oryzae的菌落形态成颗粒状，发酵结束后，富马酸产量达到46.87g/L，产酸率提高了17.4％，具有很好的应用前景。
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公开(公告)号：CN106497845A
公开(公告)日：2017-03-15
申请号：CN201611149169.9
申请日：2016-12-14
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12P19/26 , C12N9/0006 , C12N9/104 , C12N9/1241 , C12N9/90 , C12P19/04 , C12Y207/07009 , C12Y504/02002 , C12Y504/0201
Abstract: 本发明公开了一种高产软骨素的重组枯草芽孢杆菌及其应用，属于生物工程技术领域。本发明通过在产软骨素的枯草芽孢杆菌中进行合成途径优化，即共表达UDP-GlcUA途径和UDP-GlcNAc途径中的关键酶基因，提高了软骨素的产量。本发明提供的重组枯草芽孢杆菌可满足医疗卫生和食品安全的要求，无内毒素和病原感染的风险；并可以使软骨素的积累达到最高，为6.06g/L，分子量为78.64kD。本研究为高产软骨素提供了新策略，一方面可应用于其它糖胺聚糖，另一方面为工业化大规模生产软骨素奠定了基础。
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公开(公告)号：CN103013843A
公开(公告)日：2013-04-03
申请号：CN201210552727.1
申请日：2012-12-19
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种高产延胡索酸米根霉及其应用，属于遗传工程领域。本发明采用代谢工程手段，将来源于酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)中编码丙酮酸羧化酶的基因ScPYC1过量表达于发酵法生产延胡索酸的菌株Rhizopus delemar NRRL1526中，获得了一株丙酮酸羧化酶活性提高的重组菌R.delemar-pRS303H-PC，其丙酮酸羧化酶活性提高了5.4倍(达到4.59U/mg protein)；以葡萄糖为唯一碳源，发酵72h后，延胡索酸产量达到55.92g/L，是出发菌株的1.19倍，具有广阔的应用前景。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN111304186B
公开(公告)日：2021-08-24
申请号：CN202010127050.1
申请日：2020-02-28
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种肝素C5异构酶高催化活性菌株的构建方法，属于生物工程技术领域。本方法首先选用大肠杆菌作为宿主菌，然后利用N端融合促溶标签的方法对C5异构酶进行表达优化，将优化后的C5蛋白序列进一步通过分子对接进行蛋白质工程改造，得到高活性的生产菌株。本发明首次采用微生物细胞表达106位氨基酸由缬氨酸突变为精氨酸后的C5，得到的酶催化活性为5.81U/mL，相比未突变前提高了141％，比酶活为145.14U/mg，相比未突变前提高了128％。
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公开(公告)号：CN106148265B
公开(公告)日：2019-08-20
申请号：CN201610561891.7
申请日：2016-07-15
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种产硫酸软骨素裂解酶的重组枯草芽孢杆菌及其应用，属于生物工程技术领域。本发明将普通变形杆菌来源的硫酸软骨素裂解酶在枯草芽孢杆菌中进行异源表达，选取信号肽amyX，采用3种强组成型启动子和pP43NMK载体本身的强RBS，并加入组氨酸标签以利于后续纯化，实现了硫酸软骨素裂解酶在枯草芽孢杆菌中表达酶活的提高。本发明为食品级微生物高效生产制备硫酸软骨素裂解酶奠定了一定的基础，适合于工业化生产应用。
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公开(公告)号：CN106244566A
公开(公告)日：2016-12-21
申请号：CN201610652888.6
申请日：2016-08-10
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种软骨素合酶突变体及其应用，属于生物工程技术领域。本发明将大肠杆菌K4来源的软骨素合酶在枯草芽孢杆菌中进行保守区域中非保守氨基酸的组合突变，获得了软骨素产量提高、分子量减小的突变体。同时，通过3L发酵罐放大发酵，实现了枯草芽孢杆菌高产低分子量的软骨素，3L罐上产物产量为7.25g/L，产物平均分子量为41.62kDa。本发明为食品级微生物高效生产制备软骨素奠定了一定的基础，适合于工业化生产应用。
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公开(公告)号：CN111304186A
公开(公告)日：2020-06-19
申请号：CN202010127050.1
申请日：2020-02-28
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种肝素C5异构酶高催化活性菌株的构建方法，属于生物工程技术领域。本方法首先选用大肠杆菌作为宿主菌，然后利用N端融合促溶标签的方法对C5异构酶进行表达优化，将优化后的C5蛋白序列进一步通过分子对接进行蛋白质工程改造，得到高活性的生产菌株。本发明首次采用微生物细胞表达106位氨基酸由缬氨酸突变为精氨酸后的C5，得到的酶催化活性为5.81U/mL，相比未突变前提高了141％，比酶活为145.14U/mg，相比未突变前提高了128％。
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公开(公告)号：CN106244566B
公开(公告)日：2019-08-20
申请号：CN201610652888.6
申请日：2016-08-10
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种软骨素合酶突变体及其应用，属于生物工程技术领域。本发明将大肠杆菌K4来源的软骨素合酶在枯草芽孢杆菌中进行保守区域中非保守氨基酸的组合突变，获得了软骨素产量提高、分子量减小的突变体。同时，通过3L发酵罐放大发酵，实现了枯草芽孢杆菌高产低分子量的软骨素，3L罐上产物产量为7.25g/L，产物平均分子量为41.62kDa。本发明为食品级微生物高效生产制备软骨素奠定了一定的基础，适合于工业化生产应用。
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