公开(公告)号：CN119286993A

公开(公告)日：2025-01-10

申请号：CN202411221632.0

申请日：2022-01-07

Applicant: 武汉大学

Inventor： 殷昊 ,  芦舒涵 ,  张楹 ,  佟晓晗 ,  张坤 ,  周溪 ,  张定宇

IPC: C12Q1/6844 ,  C12N9/22

Abstract: 提供了用于简单、无仪器且灵敏的方法的组合物和方法，该方法能够对目的核酸分子进行快速、即时检测。这基于一个令人惊讶的发现，即扩增及基于CRISPR的切割和检测的相对效率可以调整为利于扩增，直到生成足够的扩增产物实现检测。示例方法包括设计向导RNA和引物以靶向非最优PAM序列，或序列工程化Cas核酸酶以降低其在与该向导RNA形成核糖核蛋白或者结合或切割底物核酸方面的活性。

公开(公告)号：CN118043457A

公开(公告)日：2024-05-14

申请号：CN202280050552.6

申请日：2022-05-17

Applicant: 武汉大学

Inventor： 殷昊 ,  王金琳 ,  张楹 ,  王国权 ,  何周 ,  张瑞文

IPC: C12N15/10 ,  C12N15/62 ,  C12N9/22

Abstract: 提供了用于将较大核酸片段插入靶基因组序列的组合物和方法。所公开的编辑系统采用一对pegRNA，其由于靶向附近的基因组位点并具有彼此互补的序列而共同形成了用于将大外源序列插入靶基因组基因座的模板。

公开(公告)号：CN117813387A

公开(公告)日：2024-04-02

申请号：CN202280051250.0

申请日：2022-07-19

Applicant: 武汉大学

Inventor： 张楹 ,  殷昊 ,  张川平 ,  安静

IPC: C12N15/85 ,  C12N13/00

Abstract: 本披露提供了一种通过电转将多聚核苷酸有效递送至细胞核的成分与方法。同时，本披露提供了一种有助于递送、显著降低细胞毒性的新缓冲液系统。缓冲液包括琥珀酸盐、甘露醇、一种糖、谷氨酰胺或类似物以及抗氧化剂。此外，还提供了一种特别适用于电转递送DNA、RNA或蛋白质至胞内的方法，这种方法需在渗透压大于310mOsmol/kg的溶液条件下进行。

公开(公告)号：CN117737208A

公开(公告)日：2024-03-22

申请号：CN202311783425.X

申请日：2023-12-22

Applicant: 武汉大学

Inventor： 殷昊 ,  佟晓晗 ,  张楹 ,  张坤 ,  李天乐

IPC: C12Q1/6844 ,  C12Q1/70 ,  C12N15/11 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明公开了一种用于室温检测RNA的组合物及试剂盒，该组合物包括：目标RNA的反转录引物和反转录酶，用于合成目标RNA的反向互补序列，反转录引物的长度为10～20个核苷酸；RPA反向引物、RPA正向引物、重组酶、DNA聚合酶、T7RNA聚合酶，用于扩增目标RNA的双链DNA扩增子，并以双链DNA扩增子为底物合成包含目标RNA的反向互补序列的长链RNA；双链DNA扩增子由目标RNA及其反向互补序列碱基互补配对形成，RPA反向引物的5’端包含T7RNA聚合酶启动子序列；Cas13a蛋白及其crRNA，crRNA用于靶向识别目标RNA的反向互补序列，Cas13a蛋白用于切割目标RNA的反向互补序列；TaqMan荧光探针，其能在目标RNA的反向互补序列被切割时被Cas13a蛋白非特异切割，释放荧光基团。该组合物能在20℃、30min内检测到0.5cp/μL的目标RNA。

公开(公告)号：CN116286734A

公开(公告)日：2023-06-23

申请号：CN202211514174.0

申请日：2022-11-29

Applicant: 武汉大学

Inventor： 张楹 ,  张红霞 ,  殷昊

IPC: C12N9/22 ,  C07K19/00 ,  C12N15/62 ,  C12Q1/6858

Abstract: 本申请公开了一种野生型LbCas12a蛋白的突变体及其SNP检测用途，野生型LbCas12a蛋白的氨基酸序列如Seq_1所示，该突变体至少在Seq_1所示的氨基酸序列的第174位存在突变。该突变体与野生型LbCas12a蛋白相比，具有SNP识别能力，基于该突变体设计的CRISPR‑Cas系统，可以在30分钟内识别基因组中的SNP，该系统的样品制备过程非常简单，既可以避免交叉污染，又可以降低操作难度和检测成本。