公开(公告)号：CN118360236A

公开(公告)日：2024-07-19

申请号：CN202410259112.2

申请日：2021-10-20

Applicant: 扬州大学

Inventor： 胡增垒 ,  刘秀梵 ,  张艳焱 ,  胡娇 ,  黄雅 ,  石磊 ,  何晓政 ,  邓婧

IPC: C12N5/071 ,  C12N5/10 ,  C12N15/65 ,  C12N15/44 ,  C12N15/867 ,  G01N33/68 ,  C12R1/91

Abstract: 本发明提供了一种用于H7N9亚型禽流感血清杀伤效应测定的靶细胞及鉴定方法，其包括如下步骤：PCR扩增目标基因片段、目的基因包装到载体中、转染、慢病毒分离和检测、测定HA蛋白表达情况、测定血清杀伤活性。本发明有着如下有益效果：本发明构建的细胞株高效均一地表达HA蛋白，在普通二级实验室即可操作，为测定H7N9血清杀伤效应提供稳定、可靠的靶细胞来源；本发明提供的细胞系带有ZSgreen荧光报告基因，无需额外的标记，且能区分靶细胞与效应细胞；本发明建立的检测H7N9禽流感免疫血清Fc效应的方法，为全面认识H7N9疫苗的免疫保护机理提供有力工具；除了针对特定的病菌外，本发明还可以对其他家禽疫苗抗体Fc免疫效应的测定提供了技术参考。

公开(公告)号：CN117510622A

公开(公告)日：2024-02-06

申请号：CN202311477960.2

申请日：2023-11-08

Applicant: 扬州大学

Inventor： 胡增垒 ,  胡娇 ,  张艳焱 ,  何海蓉

IPC: C07K16/10 ,  G01N33/569 ,  G01N33/543 ,  G01N33/535 ,  G01N33/577

Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种能够识别DHAV‑3VP1蛋白的单克隆抗体、制备方法及其应用，本发明提供的双抗夹心ELISA方法可对表达产物中的DHAV‑3VP1蛋白进行定量，具有灵敏度高、线性范围广、成本低、使用方便、操作时间短等优势，可用于DHAV‑3新型蛋白亚单位疫苗的抗原定量，为DHAV‑3免疫效力的评价与疫苗的质量控制提供了一种新的方法，可保障DHAV‑3疫苗的升级换代。

公开(公告)号：CN111825763B

公开(公告)日：2022-04-19

申请号：CN202010681212.6

申请日：2020-07-15

Applicant: 扬州大学

Inventor： 胡增垒 ,  赵江艳 ,  石磊 ,  刘秀梵

IPC: C07K16/10 ,  C07K14/11 ,  C12N5/20 ,  C12N15/13 ,  G01N33/577 ,  G01N33/569

Abstract: 本发明属于生物技术领域，涉及一种识别流感病毒HA茎部的单克隆抗体、抗原表位、编码基因及其应用。本发明提供一株流感病毒HA茎部特异性单克隆抗体，包括重链可变区和轻链可变区，重链可变区的核苷酸与氨基酸序列分别如SEQ ID NO.1‑2所示；轻链可变区的核苷酸与氨基酸序列分别如SEQ ID NO.6‑7所示。该单克隆抗体特异性识别HA蛋白茎部以第431位W、433位Y、437位L为核心基序的抗原表位。该单克隆抗体由H7N9亚型禽流感病毒HA蛋白作为抗原免疫小鼠得到，亲和力高、敏感性强，与group 1和group 2的流感病毒具有良好的交叉反应性，在流感病毒的广谱免疫学检测方面具有较高的应用价值。

公开(公告)号：CN108888761B

公开(公告)日：2021-11-09

申请号：CN201810489385.0

申请日：2018-05-21

Applicant: 扬州大学

Inventor： 刘秀梵 ,  胡娇 ,  梁艳艳 ,  胡增垒 ,  李如梦 ,  王晓泉 ,  顾敏

IPC: A61K39/145 ,  A61K39/39 ,  C12N15/866 ,  C12N15/41 ,  A61P31/16

Abstract: 本发明涉及一种表达H7N9亚型禽流感病毒血凝素蛋白的重组杆状病毒疫苗及其制备方法与应用。该疫苗包括：重组杆状病毒rBac‑JX148HA，该重组杆状病毒能够表达H7N9禽流感病毒主要免疫抗原HA蛋白，其免疫佐剂为SEPPIC佐剂；其中所述的HA蛋白的核酸序列如SEQ ID NO：1所示。本发明疫苗免疫鸡后，能诱导较高的抗体滴度、提供针对H7N9亚型高致病性禽流感病毒的完全临床保护、有效抑制排毒。该疫苗安全性高，克服了传统的鸡胚生产疫苗具有鸡胚供应不稳定、外源病毒污染、废弃物产量大等缺陷，在H7N9亚型禽流感的防控上具有较好的应用前景，且符合兽用疫苗利用悬浮细胞培养技术进行大规模生产的趋势。

公开(公告)号：CN112079904A

公开(公告)日：2020-12-15

申请号：CN202011000015.X

申请日：2020-09-22

Applicant: 扬州大学

Inventor： 胡娇 ,  刘秀梵 ,  李如梦 ,  李军 ,  胡增垒 ,  王晓泉 ,  顾敏

IPC: C07K14/11 ,  C12N15/62 ,  C12N15/866 ,  A61K39/145 ,  A61P31/16

Abstract: 本发明公开了一种重组的H7N9亚型禽流感病毒样颗粒及其制备方法和应用，基于重组杆状病毒昆虫细胞培养系统，分别构建了表达H7N9高致病性禽流感病毒HA蛋白、NA蛋白、M1蛋白的重组杆状病毒。将三株重组杆状病毒共感染悬浮的昆虫细胞，可收获到在细胞内自行组装的H7N9亚型禽流感病毒样颗粒。经超滤管与不同梯度浓度蔗糖浓缩纯化后，与佐剂混和乳化制备疫苗。制备的疫苗免疫鸡可诱导机体产生特异性抗体，具有免疫原性强、安全性好、遗传稳定性高等优点。以致死剂量的H7N9亚型高致病性禽流感病毒攻击后，能够提供完全的临床保护且显著抑制鸡的排毒。本发明为预防H7N9亚型禽流感病毒感染提供了一种新的方法，也为流感病毒新型疫苗的开发奠定了基础。

公开(公告)号：CN119080913A

公开(公告)日：2024-12-06

申请号：CN202411004261.0

申请日：2024-07-25

Applicant: 扬州大学

Inventor： 胡增垒 ,  王蔼甜 ,  邓婧 ,  胡娇 ,  曹永忠

IPC: C07K14/705 ,  C12N15/113 ,  C12N7/01 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明属于生物技术领域，提供SNARE蛋白在调控溶瘤新城疫病毒复制水平中的应用，本发明证明NDV感染A549与Hela细胞可显著上调大量SANRE基因的表达；选择代表性的SANRE蛋白YKT6为研究对象，证明YKT6蛋白功能突变体过表达以及YKT6蛋白的敲降均导致NDV复制水平的下降，而过表达YKT6蛋白可显著增强病毒复制。YKT6蛋白通过促进NDV F蛋白的膜转运，增强病毒粒子的组装与病毒复制。本发明提供了YKT6蛋白在增强NDV在肿瘤细胞中复制的新作用，以及YKT6蛋白可作为促进NDV溶瘤活性的新的靶标，在人与动物肿瘤的治疗方面有潜在的应用前景。

公开(公告)号：CN118530351A

公开(公告)日：2024-08-23

申请号：CN202410948000.8

申请日：2024-07-16

Applicant: 扬州大学

Inventor： 胡娇 ,  刘秀梵 ,  胡增垒 ,  刘晓文 ,  王宇飞 ,  李建梅 ,  徐思怡 ,  顾敏 ,  王晓泉 ,  胡顺林

IPC: C07K16/10 ,  C12N15/13 ,  G01N33/569 ,  G01N33/577

Abstract: 本发明公开了一种能够识别新型鸭呼肠孤病毒NDRV σB蛋白的单克隆抗体、制备方法及其应用。所述单克隆抗体包括重链可变区和轻链可变区；重链可变区包括如SEQ ID NO：11、12、13所示氨基酸序列的VH CDR1、VH CDR2和VH CDR3，轻链可变区包括如SEQ ID NO：14、15、16所示氨基酸序列的VL CDR1、VL CDR2和VL CDR3；基于σB 6B9鼠单克隆抗体和σB兔多克隆抗体建立了用于σB蛋白定量的双抗夹心ELISA方法。该方法具有灵敏度高、线性范围广、成本低、操作方便、时间短等优势。该发明为NDRV亚单位疫苗的质量控制与免疫效力评价提供了新方法，也为NDRV疫苗的升级换代奠定基础。

公开(公告)号：CN116041496A

公开(公告)日：2023-05-02

申请号：CN202211644833.2

申请日：2022-12-21

Applicant: 扬州大学

Inventor： 胡增垒 ,  胡娇 ,  何晓政 ,  邓婧 ,  赵江艳 ,  刘秀梵

IPC: C07K16/10 ,  C12N15/13 ,  C12N5/20 ,  A61K39/42 ,  A61P31/16 ,  G01N33/577 ,  G01N33/569 ,  C12R1/91

Abstract: 本发明公开了一种H7N9亚型禽流感病毒中和性单克隆抗体及应用，其中单克隆抗体为IgG1、κ型，单克隆抗体包括重链可变区氨基酸及轻链可变区氨基酸，重链可变区氨基酸序列包括SEQ ID No.5所示的HCDR1、SEQ ID No.6所示的HCDR2、SEQ ID No.7所示的HCDR3；轻链可变区氨基酸序列包括SEQ ID No.8所示的LCDR1、SEQ ID No.9所示的LCDR2、SEQ ID No.10所示的LCDR3。

公开(公告)号：CN114230642B

公开(公告)日：2022-06-24

申请号：CN202111263546.2

申请日：2021-10-28

Applicant: 扬州大学

Inventor： 胡增垒 ,  刘秀梵 ,  张艳焱 ,  胡娇 ,  何晓政 ,  邓婧

IPC: C07K14/11 ,  G01N33/68 ,  G01N33/569 ,  G01N33/543

Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种区分H7N9亚型禽流感病毒感染与免疫动物的多肽及检测方法，所述多肽序列为KNVPEIPKGRG。本发明用生物信息学方法筛选了一条跨越H7N9亚型AIV HA蛋白裂解位点的多肽，并以该多肽为基础建立了酶联免疫吸附试验(ELISA)。该方法能够清晰地区分H7N9病毒感染与疫苗免疫动物，达到DIVA的目的。本发明提供的多肽可作为家禽或人H7N9亚型AIV的DIVA监测的新靶标，所建立的诊断方法在疫病防控与公共卫生领域有较好的应用潜力。

公开(公告)号：CN102776156B

公开(公告)日：2013-11-06

申请号：CN201210240399.1

申请日：2012-07-12

Applicant: 扬州大学

Inventor： 刘秀梵 ,  朱艳梅 ,  胡增垒 ,  胡顺林 ,  王晓泉

IPC: C12N7/01 ,  C12N15/85 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明涉及基因Ⅵb亚型鸽源新城疫病毒致弱株ⅥbI4及其构建方法。所述基因Ⅵb亚型鸽源新城疫病毒致弱株ⅥbI4，它的保藏号CGMCCNo：6149。本发明涉及应用反向遗传技术，利用含有鸽源新城疫病毒JS/07/04/Pi基因组全长的转录载体pTVT/071204，对其F基因进行致弱突变后获得转录载体ApTVT/071204，再将新城疫病毒rNDV/I4的NP、P和L基因片段替换ApTVT/071204上的对应部分，得到重组质粒ApTVT/ⅥbI4，该质粒与辅助质粒共转染BSR-T7/5细胞后成功拯救出重组病毒ⅥbI4。该病毒在鸡胚上具有较高的繁殖滴度，适合于疫苗的大规模生产，可用于制造疫苗。