公开(公告)号：CN114107517A

公开(公告)日：2022-03-01

申请号：CN202111328555.5

申请日：2021-11-10

Applicant: 扬州大学

Inventor： 王海飞 ,  齐晓艺 ,  包文斌 ,  吴圣龙 ,  戴超辉 ,  姚建明

IPC: C12Q1/6888 ,  C12Q1/6858 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了一种与猪流感病毒抗性相关的SNP标记及其应用，本发明属于分子生物学技术领域。本发明所述SNP标记为猪MAN2A1基因中第481位碱基发生A/T碱基突变，所述猪MAN2A1基因的核苷酸序列的GeneBank登录号为：Gene ID:100514631，所述的猪流感病毒包括猪流感病毒H1N1和猪流感病毒H3N2。本发明提出了鉴定出猪流感病毒抗性相关的SNP分子标记，为猪流感抗性选育提供可利用分子标记资源。

公开(公告)号：CN113832235A

公开(公告)日：2021-12-24

申请号：CN202111035954.2

申请日：2021-09-06

Applicant: 扬州大学

Inventor： 包文斌 ,  范海瑞 ,  吴正常 ,  任战士 ,  吴圣龙 ,  殷宗俊 ,  王海飞

IPC: C12Q1/6888 ,  C12Q1/686 ,  C12N15/113 ,  A61K45/00 ,  A61P1/12 ,  A61P31/04

Abstract: 本发明通过组学测序筛选出1个大肠杆菌F18感染调控的关键候选lncRNA‑FUT3‑AS1，序列为SEQ ID NO:1，在此基础上，本研究围绕FUT3‑AS1功能与调控机制开展深入分析，首先利用qPCR和Northern blot技术检测了FUT3‑AS1在梅山猪与苏太猪F18大肠杆菌敏感型与抗性型断奶仔猪十二指肠中的表达差异情况，成功建立lncRNA‑FUT3‑AS1沉默的猪小肠上皮细胞，干扰效率达到68%，且通过细菌计数、革兰氏染色、扫描电镜以及间接免疫荧光等一系列检测手段发现，沉默lncRNA‑FUT3‑AS1可以显著地降低F18大肠杆菌对IPEC‑J2细胞的黏附能力。由此表明，lncRNA‑FUT3‑AS1在断奶仔猪抵抗F18大肠杆菌侵染过程中发挥了重要的抗性调控功能，其表达水平下调降低了小肠上皮细胞对F18大肠杆菌的黏附能力，有助于提高仔猪对F18大肠杆菌侵染的抵抗能力。

公开(公告)号：CN112921040A

公开(公告)日：2021-06-08

申请号：CN202110344195.1

申请日：2021-03-31

Applicant: 扬州大学

Inventor： 包文斌 ,  渠欢 ,  宗秋芳 ,  黄小国 ,  蔡德敏 ,  王海飞

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/85 ,  C12N5/10 ,  A01K67/027

Abstract: 一种基于CRISPR‑Cas9基因编辑技术的猪TFF1基因敲除细胞系的构建方法，本发明采用CRISPR/Cas9技术敲除IPEC‑J2细胞中的TFF1基因序列，建立TFF1基因敲除的IPEC‑J2细胞系，可用于TFF1基因在猪抗病育种中的功能验证，揭示TFF1基因在疾病抗性中的作用机制。

公开(公告)号：CN112011539A

公开(公告)日：2020-12-01

申请号：CN202010867825.9

申请日：2020-08-26

Applicant: 扬州大学

Inventor： 王海飞 ,  周雅静 ,  包文斌 ,  范海瑞 ,  吴圣龙

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/85 ,  C12N5/071 ,  A01K67/027

Abstract: 本发明公开了一种基于CRISPR-Cas9技术靶向敲除猪GDPD2基因的细胞系及其构建方法，该细胞系采用以下步骤制备：(1)根据猪GDPD2基因设计sgRNA向导序列；(2)将正链sgRNA序列和负链sgRNA序列退火形成双链DNA；将双链DNA与线性化的pGK1.1载体连接获得阳性打靶载体；(3)将阳性打靶载体混合电转染靶细胞IPEC-J2获得GDPD2基因敲除的IPEC-J2细胞。本发明首次利用CRISPR/Cas9技术建立猪GDPD2基因敲除的IPEC-J2细胞系，有助于研究GDPD2的蛋白功能。CRISPR/Cas9敲除技术方法简单，设计sgRNA即可对靶基因进行高效敲除，导致GDPD2基因功能的缺失，是理想的GDPD2基因敲除的IPEC-J2细胞模型。

公开(公告)号：CN109971840A

公开(公告)日：2019-07-05

申请号：CN201910286939.1

申请日：2019-04-11

Applicant: 扬州大学

Inventor： 曹越 ,  郜重丞 ,  包文斌 ,  王海飞 ,  吴正常

IPC: C12Q1/6858 ,  C12Q1/6888

Abstract: 本发明公开了一种用于猪抗病育种的遗传分子标记方法和应用，遗传分子标记方法包括以下步骤：包括以下步骤：步骤一：猪TLR5基因变异位点的筛选和确定；步骤二：扩增包含所确定变异位点的序列；步骤三：对步骤二的扩增产物进行SSCP分析，全面检测猪核心群基因型；步骤四：对个体基因型与代表一般抗病力的重要细胞因子之间进行关联分析；最终选择扩增产物PCR‑SSCP带型4条带中出现3条带的样本为抗病育种中的有利个体。本发明提供的用于猪抗病育种的遗传分子标记方法，准确度高，可大批量检测，为提高仔猪的免疫应答能力和一般抗病力提供了一种有效的分子标记育种手段，将本遗传分子标记用于抗病育种，还可以加快育种进程。

公开(公告)号：CN119524163A

公开(公告)日：2025-02-28

申请号：CN202411537435.X

申请日：2024-10-31

Applicant: 扬州大学

Inventor： 包文斌 ,  肖叶懿 ,  汪劲能 ,  王海飞 ,  吴正常 ,  蔡德敏 ,  蔡家嘉

IPC: A61K48/00 ,  A61K31/26 ,  A61P39/02

Abstract: 本发明公开了ATP6AP1基因在制备抗霉菌毒素药物中的应用。本发明通过增强ATP6AP1蛋白的表达或稳定性，直接作用于霉菌毒素引起的细胞损伤机制，提高了治疗效果的针对性；通过减轻DON等霉菌毒素引起的细胞活性下降和活性氧含量升高，有助于减少霉菌毒素对动物和人类健康的负面影响；通过加入萝卜硫素不仅增强了ATP6AP1蛋白的稳定性，还提高了药物的效果，使得在较低浓度下即可达到治疗效果，减少了药物使用量，降低了副作用；本发明方法既可以作为预防措施减少霉菌毒素的影响，也可以作为治疗手段减轻已经造成的损害。

公开(公告)号：CN119345208A

公开(公告)日：2025-01-24

申请号：CN202411299192.0

申请日：2024-09-18

Applicant: 扬州大学

Inventor： 吴正常 ,  包文斌 ,  靳健 ,  王海飞 ,  高崧

IPC: A61K31/519 ,  A23K50/30 ,  A23K20/10 ,  A61P31/20 ,  A61P31/14

Abstract: EPZ004777在制备治疗猪圆环病毒2型感染产品中的应用，本发明首次发现50μg/mL EPZ004777对猪圆环病毒2型在复制阶段具有显著的抑制作用，可应用于制备治疗猪肠道冠状病毒感染药物和/或饲料添加剂。

公开(公告)号：CN118697739A

公开(公告)日：2024-09-27

申请号：CN202410737629.8

申请日：2024-06-07

Applicant: 扬州大学

Inventor： 单祎祎 ,  包文斌 ,  吴正常 ,  王海飞 ,  肖琦

IPC: A61K31/496 ,  A61P31/20

Abstract: 本发明公开了GSK126在制备预防和/或治疗猪圆环病毒药物中的应用。本发明首次发现GSK126具有抗猪圆环病毒的活性，GSK126在宿主细胞中表现出显著的抑制猪圆环病毒增殖的作用，具有良好且稳定的抗猪圆环病毒效果。

公开(公告)号：CN114107517B

公开(公告)日：2024-02-23

申请号：CN202111328555.5

申请日：2021-11-10

Applicant: 扬州大学

Inventor： 王海飞 ,  齐晓艺 ,  包文斌 ,  吴圣龙 ,  戴超辉 ,  姚建明

IPC: C12Q1/6888 ,  C12Q1/6858 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了一种与猪流感病毒抗性相关的SNP标记及其应用，本发明属于分子生物学技术领域。本发明所述SNP标记为猪MAN2A1基因中第481位碱基发生A/T碱基突变，所述猪MAN2A1基因的核苷酸序列的GeneBank登录号为：Gene ID:100514631，所述的猪流感病毒包括猪流感病毒H1N1和猪流感病毒H3N2。本发明提出了鉴定出猪流感病毒抗性相关的SNP分子标记，为猪流感抗性选育提供可利用分子标记资源。

公开(公告)号：CN110004145B

公开(公告)日：2023-01-31

申请号：CN201910263714.4

申请日：2019-04-02

Applicant: 扬州大学

Inventor： 包文斌 ,  王诗琴 ,  戴开宇 ,  王海飞 ,  吴圣龙

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/85 ,  C12N15/90 ,  C12N15/12 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开一种sgRNA、双链DNA、载体和细胞。本发明还公开了一种KLF4基因的敲除方法。本发明首次利用CRISPR/Cas9技术构建KLF4敲除的IPEC‑J2细胞系，可作为猪疾病研究的理想细胞模型；利用CRISPR/Cas9技术进行基因敲除，比基因沉默、干扰等技术手段可更有效地敲除KLF4基因，更有助于KLF4蛋白的功能研究；基因测序检测表明KLF4基因序列被敲除，可造成KLF4基因功能的缺失，是较为理想的KLF4基因敲除的IPEC‑J2细胞模型。本发明的敲除方法简便，打靶效率高。