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公开(公告)号：CN111607594B
公开(公告)日：2023-10-20
申请号：CN202010338637.7
申请日：2020-04-26
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/90 , C12N5/10
Abstract: 本发明公开了一种基于CRISPR‑Cas9编辑技术的敲除猪IRF8基因的细胞系及其构建方法，该细胞系采用以下步骤制备：(1)靶位点设计及sgRNA序列的合成：根据猪IRF8基因CDS区5’端设计sgRNA向导序列；(2)载体构建：将正链sgRNA序列和负链sgRNA序列退火形成双链DNA；将双链DNA与线性化的pGK1.1载体连接获得阳性打靶载体；(3)细胞转染：将阳性打靶载体混合电转染靶细胞IPEC‑J2获得IRF8基因敲除的IPEC‑J2细胞。建立IRF8基因敲除的小肠上皮细胞系，可为深入揭示腹泻病原体致病机制、抗性基因挖掘与鉴定以及抗腹泻病转基因猪的培育和应用提供更直接有效的研究模型。
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公开(公告)号：CN113243457B
公开(公告)日：2024-09-13
申请号：CN202110582146.1
申请日：2021-05-27
Applicant: 扬州大学
IPC: A23K50/30 , A23K20/105 , A61K31/575 , A61P1/12
Abstract: 本发明提供了一种防治仔猪肝源性腹泻的饲料添加剂及其制备方法和应用，饲料添加剂主要包括链甾醇，从红藻或褐藻中提取得到，经冷冻干燥‑有机提取‑烘干研磨‑洗脱烘干一系列操作，获得含链甾醇的饲料添加剂，并和普通饲料按一定比例混合制备得到本发明所述的可防治仔猪肝源性腹泻的饲料，并经实验证明，本发明所提供的饲料可有效防治仔猪肝源性腹泻，且制备成本低。
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公开(公告)号：CN112921040A
公开(公告)日：2021-06-08
申请号：CN202110344195.1
申请日：2021-03-31
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/85 , C12N5/10 , A01K67/027
Abstract: 一种基于CRISPR‑Cas9基因编辑技术的猪TFF1基因敲除细胞系的构建方法，本发明采用CRISPR/Cas9技术敲除IPEC‑J2细胞中的TFF1基因序列，建立TFF1基因敲除的IPEC‑J2细胞系，可用于TFF1基因在猪抗病育种中的功能验证，揭示TFF1基因在疾病抗性中的作用机制。
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公开(公告)号：CN113243457A
公开(公告)日：2021-08-13
申请号：CN202110582146.1
申请日：2021-05-27
Applicant: 扬州大学
IPC: A23K50/30 , A23K20/105 , A61K31/575 , A61P1/12
Abstract: 本发明提供了一种防治仔猪肝源性腹泻的饲料添加剂及其制备方法和应用，饲料添加剂主要包括链甾醇，从红藻或褐藻中提取得到，经冷冻干燥‑有机提取‑烘干研磨‑洗脱烘干一系列操作，获得含链甾醇的饲料添加剂，并和普通饲料按一定比例混合制备得到本发明所述的可防治仔猪肝源性腹泻的饲料，并经实验证明，本发明所提供的饲料可有效防治仔猪肝源性腹泻，且制备成本低。
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公开(公告)号：CN111607594A
公开(公告)日：2020-09-01
申请号：CN202010338637.7
申请日：2020-04-26
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/90 , C12N5/10
Abstract: 本发明公开了一种基于CRISPR-Cas9编辑技术的敲除猪IRF8基因的细胞系及其构建方法，该细胞系采用以下步骤制备：(1)靶位点设计及sgRNA序列的合成：根据猪IRF8基因CDS区5’端设计sgRNA向导序列；(2)载体构建：将正链sgRNA序列和负链sgRNA序列退火形成双链DNA；将双链DNA与线性化的pGK1.1载体连接获得阳性打靶载体；(3)细胞转染：将阳性打靶载体混合电转染靶细胞IPEC-J2获得IRF8基因敲除的IPEC-J2细胞。建立IRF8基因敲除的小肠上皮细胞系，可为深入揭示腹泻病原体致病机制、抗性基因挖掘与鉴定以及抗腹泻病转基因猪的培育和应用提供更直接有效的研究模型。
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