公开(公告)号：CN105403696B

公开(公告)日：2017-09-19

申请号：CN201510919955.1

申请日：2015-12-11

Applicant: 扬州大学

Inventor： 杨占军 ,  王磊 ,  曹越 ,  李娟

IPC: G01N33/543 ,  G01N21/76

Abstract: 本发明提供了一种基于纳米模拟酶的无标记化学发光免疫传感器及制备和分析方法：首先将壳聚糖溶液分散的硫化铜纳米粒子修饰于环氧基活化的载体片表面；再将链酶亲和素固定于硫化铜纳米粒子表面；随后通过链酶亲和素对生物素的特异识别作用，将生物素化的抗体固定于载体片表面，牛血清蛋白封闭后制备得到无标记化学发光免疫传感器。硫化铜纳米模拟酶的使用，改善了传统化学发光免疫分析中天然酶稳定性差，易受环境影响等缺点，使得构建的化学发光体系的稳定性和灵敏度得到显著的提高，并且大大降低了检测费用，具有非常重要的应用价值和实际意义。

公开(公告)号：CN104330553B

公开(公告)日：2016-03-09

申请号：CN201410670552.3

申请日：2014-11-20

Applicant: 扬州大学

Inventor： 杨占军 ,  曹越 ,  李娟

IPC: G01N33/543 ,  G01N21/76

Abstract: 本发明公开了一种无标记化学发光免疫传感器及其免疫分析方法，一种无标记化学发光免疫传感器的免疫分析方法包括如下步骤：(1)将所述免疫传感器固定在免疫微反应器后，将带抗原样品以0.5ml/min的速度注入流通池，在线温育后形成免疫复合物；(2)用缓冲液PBST以1ml/min的速度冲洗免疫复合物，除去未反应的免疫试剂；(3)将化学发光底物溶液以0.5ml/min的速度通入免疫传感器，产生的化学发光信号由光电倍增管记录。本发明以化学发光探针和无标记的抗体共固定于具有良好生物相容性的固相界面，制得该免疫传感器，结合流动注射，构建了一种廉价、快速、方便的无标记化学发光免疫分析方法。

公开(公告)号：CN109971840A

公开(公告)日：2019-07-05

申请号：CN201910286939.1

申请日：2019-04-11

Applicant: 扬州大学

Inventor： 曹越 ,  郜重丞 ,  包文斌 ,  王海飞 ,  吴正常

IPC: C12Q1/6858 ,  C12Q1/6888

Abstract: 本发明公开了一种用于猪抗病育种的遗传分子标记方法和应用，遗传分子标记方法包括以下步骤：包括以下步骤：步骤一：猪TLR5基因变异位点的筛选和确定；步骤二：扩增包含所确定变异位点的序列；步骤三：对步骤二的扩增产物进行SSCP分析，全面检测猪核心群基因型；步骤四：对个体基因型与代表一般抗病力的重要细胞因子之间进行关联分析；最终选择扩增产物PCR‑SSCP带型4条带中出现3条带的样本为抗病育种中的有利个体。本发明提供的用于猪抗病育种的遗传分子标记方法，准确度高，可大批量检测，为提高仔猪的免疫应答能力和一般抗病力提供了一种有效的分子标记育种手段，将本遗传分子标记用于抗病育种，还可以加快育种进程。

公开(公告)号：CN106353500A

公开(公告)日：2017-01-25

申请号：CN201610920297.2

申请日：2016-10-21

Applicant: 扬州大学

Inventor： 杨占军 ,  曹越 ,  李娟 ,  胥蕾

IPC: G01N33/574

CPC classification number: G01N33/57484

Abstract: 本发明提供了一种基于硫化铜纳米模拟酶的无标记化学发光成像免疫传感器的制备及分析方法，通过丝网印技术在可抛式环氧硅烷化的载玻片表面制得4×12免疫传感阵列，并将分散于壳聚糖的硫化铜纳米粒子滴涂于阵列微孔中；继续滴涂链酶亲和素于阵列微孔中，再将生物素化的抗体修饰于链酶亲和素功能化的硫化铜纳米粒子表面，封闭后即制得该无标记化学发光免疫传感器。该无标记化学发光免疫传感器可以对48个样品同时检测，改善了单组分无标记化学发光免疫分析模式分析时间长，劳动量大，试剂消耗多等缺陷，实现了多种肿瘤标志物廉价、快速、高通量、高灵敏的联合检测，适用于肿瘤早期的大规模筛查，具有非常重要的应用价值和实际意义。

公开(公告)号：CN105403696A

公开(公告)日：2016-03-16

申请号：CN201510919955.1

申请日：2015-12-11

Applicant: 扬州大学

Inventor： 杨占军 ,  曹越 ,  李娟

IPC: G01N33/543 ,  G01N21/76

CPC classification number: G01N33/543 ,  G01N21/76

Abstract: 本发明提供了一种基于纳米模拟酶的无标记化学发光免疫传感器及制备和分析方法：首先将壳聚糖溶液分散的硫化铜纳米粒子修饰于环氧基活化的载体片表面；再将链酶亲和素固定于硫化铜纳米粒子表面；随后通过链酶亲和素对生物素的特异识别作用，将生物素化的抗体固定于载体片表面，牛血清蛋白封闭后制备得到无标记化学发光免疫传感器。硫化铜纳米模拟酶的使用，改善了传统化学发光免疫分析中天然酶稳定性差，易受环境影响等缺点，使得构建的化学发光体系的稳定性和灵敏度得到显著的提高，并且大大降低了检测费用，具有非常重要的应用价值和实际意义。

公开(公告)号：CN104330553A

公开(公告)日：2015-02-04

申请号：CN201410670552.3

申请日：2014-11-20

Applicant: 扬州大学

Inventor： 杨占军 ,  曹越 ,  李娟

IPC: G01N33/543 ,  G01N21/76

CPC classification number: G01N33/552 ,  G01N21/76

Abstract: 本发明公开了一种无标记化学发光免疫传感器及其免疫分析方法，一种无标记化学发光免疫传感器的免疫分析方法包括如下步骤：(1)将所述免疫传感器固定在免疫微反应器后，将带抗原样品以0.5ml/min的速度注入流通池，在线温育后形成免疫复合物；(2)用缓冲液PBST以1ml/min的速度冲洗免疫复合物，除去未反应的免疫试剂；(3)将化学发光底物溶液以0.5ml/min的速度通入免疫传感器，产生的化学发光信号由光电倍增管记录。本发明以化学发光探针和无标记的抗体共固定于具有良好生物相容性的固相界面，制得该免疫传感器，结合流动注射，构建了一种廉价、快速、方便的无标记化学发光免疫分析方法。