基于双重荧光RT-PCR鉴别检测试剂盒、方法及应用

    公开(公告)号:CN114959119A

    公开(公告)日:2022-08-30

    申请号:CN202210707494.1

    申请日:2022-06-21

    Abstract: 本发明公开了基于双重荧光RT‑PCR鉴别检测试剂盒、方法及应用,具体涉及分子生物学检测技术领域,包括RHDV和RHDV2引物探针组,所述RHDV和RHDV2引物探针组包括针对经典RHDV的特异性引物对、TaqMan探针和针对RHDV2的特异性引物对、TaqMan探针;所述针对经典RHDV的特异性引物对包括正向引物序列如SEQ ID NO.1所示和反向引物序列SEQ IDNO.2所示。本发明通过4条引物及2条探针加入同一荧光RT‑PCR反应体系中,彼此之间不干扰检测效果,一次加样进行扩增,实时观察扩增结果,有效克服了现有试剂盒操作繁琐,时间长,特异性差的缺陷,能用于临床经典RHDV和RHDV2疑似样本的快速鉴别检测。适用于科研单位和基层单位RHD的流行病学调查和疾病检测,具有良好的商业应用前景,对我国RHD的防控具有重要意义。

    一种非洲猪瘟病毒荧光ERA恒温快速检测试剂盒

    公开(公告)号:CN112176103A

    公开(公告)日:2021-01-05

    申请号:CN202011038302.X

    申请日:2020-09-28

    Abstract: 本发明涉及一种利用重组酶ERA扩增技术研制的非洲猪瘟病毒的荧光ERA恒温快速检测试剂盒、使用方法及应用。本发明以非洲猪瘟基因序列的保守区域K205R基因为靶基因,根据引物、探针设计原则设计出特异性引物与探针,并通过引物探针配对筛选实验,反应条件优化、特异性、敏感性及模拟临床样品验证等试验,最终建立准确、敏感、快速、简便的非洲猪瘟病毒荧光ERA恒温快速检测方法,并组装了试剂盒,本发明利用荧光定量PCR仪,仅需恒温38℃条件下反应20min即可判定出结果,敏感可达1拷贝/μL。与传统PCR和荧光定量PCR相比,操作简单,检测时间短,可实现临床现场快速检测。

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