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公开(公告)号：CN101550427A
公开(公告)日：2009-10-07
申请号：CN200910066596.4
申请日：2009-02-28
Applicant: 吉林大学
IPC: C12N15/85 , C12N15/06 , A01K67/027 , C12Q1/25
Abstract: 本发明提供一种检测Cre位点特异重组酶活性的转基因报告猪及培养方法，采用基因工程的方法构建LoxP位点锚定终止子，后接报告基因的打靶载体，当Cre重组酶存在的情况下，将Loxp锚定的终止子删除，使后接的报告基因得以表达，从而用于监测Cre重组酶的活性；通过细胞转染及细胞筛选技术筛选出可以特异性检测Cre活性的成纤维细胞；利用体核移植技术进行克隆猪。用于在体内监测Cre重组酶的活性，为建立人类疾病模型提供了监测工具，解决了目前转基因克隆猪的技术不成熟，克隆效率较低问题。
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公开(公告)号：CN116497022A
公开(公告)日：2023-07-28
申请号：CN202210816466.3
申请日：2022-07-12
Applicant: 吉林大学
IPC: C12N15/113 , C12N9/22 , C12N15/66 , C12N15/877 , C12N15/89 , C12N5/10 , A01K67/027
Abstract: 本发明提供一种SOD1基因p.I151V突变的人源肌萎缩侧索硬化症兔模型及构建方法，利用SpG‑ABEmax技术突变SOD1基因p.I151V位点构建一对寡聚核苷酸链，在SOD1基因靶位点处设计1个sgRNA序列，合成一对寡聚核苷酸链制备sgRNA表达载体。本发明利用SpG‑ABEma单碱基基因编辑技术构建SOD1(p.I151V)点突变兔模型，能够有效模拟人SOD1(p.I151V)点突变型ALS病理过程，有助于探究SOD1基因突变对于动物神经发育的具体调控作用及影响因素，增强对SOD1生物学功能的了解,为临床上预防和诊疗ALS疾病奠定相关的理论基础，提供新的思路和方法；能更有效地测试新药和新诊断标记物等在临床应用中的效果，同时大大降低新药研发的风险，为临床研究提供基础模型。
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公开(公告)号：CN114958911A
公开(公告)日：2022-08-30
申请号：CN202210521763.5
申请日：2022-05-13
Applicant: 吉林大学
IPC: C12N15/85 , C12N15/113 , A01K67/027
Abstract: 本发明公开了一种利用eAID‑Cas9构建的帕金森病兔模型，同时还提供了其构建方法，选取EIF4G1基因的第23号外显子的一个突变位点(p.Arg1205His)，随之通过CRISPR/Cas9技术中优化的eAID‑BE4max系统突变改位点构建帕金森病新的兔模型，能够模拟出更相似于人类帕金森病的行为学、生理学、解剖学及遗传学表征，更有利于研究疾病的发病过程、生物学标志物、新药测试、诊断试剂等，同时大大降低新药研发的风险，为临床研究提供动物模型。
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公开(公告)号：CN114946766A
公开(公告)日：2022-08-30
申请号：CN202210548261.1
申请日：2022-05-20
Applicant: 吉林大学
IPC: A01K67/027 , C12N15/85 , C12N15/89 , C12N15/113 , C12N15/12
Abstract: 本发明公开了一种构建先天性高胰岛素血症模型的方法及模型，通过对kcnj11基因P.H259R位点及P.H296R位点进行共同突变打靶，胚胎注射后进行胚胎移植，获得兔先天性高胰岛素血症模型，利用SpRY‑ABEmax基因编辑技术优势是没有识别PAM区域的序列限制，可以完成指定位点的突变顺利进行；克服了传统的CRISPR/Cas9基因编辑技术需要识别PAM区域为NGG碱基序列，大部分突变位点无法进行编辑；本发明所利用的SpRY‑ABEmax碱基编辑技术在家兔上进行应用，能够有助于基础医学研究及机制探究。
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公开(公告)号：CN105400808A
公开(公告)日：2016-03-16
申请号：CN201510603431.1
申请日：2015-09-22
Applicant: 吉林大学
IPC: C12N15/63 , C12N15/873 , C12N15/89 , A01K67/027 , C12Q1/68
Abstract: 一种利用生殖特异性启动子表达cre的重组酶载体，属于生物技术领域。本发明的目的是利用VASA基因的生殖特异性表达，来建立转基因猪模型的利用生殖特异性启动子表达cre的重组酶载体。本发明载体的构建方法是：①VASA转录起始位点上游序列扩增与纯化；②VASA转录起始位点上游序列测序；③VASA-Cre表达载体构建。本发明利用基因工程技术构建了一个生殖系统特异表达cre重组酶的质粒，并且重组质粒可以在药物压力下独立于细胞染色体外存在。该质粒可以保证在生殖系统中特异表达cre重组酶，可以与loxp相结合，进行相关生殖系统表达基因的敲除，为cre重组酶系统的发展和相关基因的研究起到积极的推动作用。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN101550427B
公开(公告)日：2011-09-14
申请号：CN200910066596.4
申请日：2009-02-28
Applicant: 吉林大学
IPC: C12N15/85 , C12N15/06 , A01K67/027 , C12Q1/25
Abstract: 本发明提供一种检测Cre位点特异重组酶活性的转基因报告猪及培养方法，采用基因工程的方法构建LoxP位点锚定终止子，后接报告基因的打靶载体，当Cre重组酶存在的情况下，将Loxp卯定的终止子删除，使后接的报告基因得以表达，从而用于监测Cre重组酶的活性；通过细胞转染及细胞筛选技术筛选出可以特异性检测Cre活性的成纤维细胞；利用体核移植技术进行克隆猪。用于在体内监测Cre重组酶的活性，为建立人类疾病模型提供了监测工具，解决了目前转基因克隆猪的技术不成熟，克隆效率较低问题。
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公开(公告)号：CN101984062A
公开(公告)日：2011-03-09
申请号：CN201010182404.9
申请日：2010-05-26
Applicant: 吉林大学
Abstract: 本发明涉及一种维持干细胞自我更新的6个猪源关键基因的体外转录质粒构建，其特征在于具体制备方法如下：首先设计基因体外转录空载体Vitro-TransPMD-18T，然后获得EGFP和维持干细胞自我更新的猪源的6个关键基因的cDNA，并按相应的酶切位点进行酶切连接，最后用体外转录试剂盒对7个体外转录质粒进行体外转录，得到相应的mRNA，然后将Vitro-Trans-EGFP转染进猪胚胎成纤维细胞：其6个基因体外转录出的mRNA转染进猪胚胎成纤维细胞后能够使其转变成猪的多能干细胞；6个基因体外转录出的mRNA能够高效翻译。
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公开(公告)号：CN105400810B
公开(公告)日：2019-05-07
申请号：CN201510557129.7
申请日：2015-09-06
Applicant: 吉林大学
Abstract: 一种采用敲除技术建立低磷性佝偻病模型的方法，属于生物技术领域。本发明的目的是采用CRISPR‑CAS9基因敲除技术成功获得人类低磷性佝偻病模型的采用敲除技术建立低磷性佝偻病模型的方法。本发明的步骤是：sgRNA表达载体的构建，CAS9mRNA的合成，受精卵的获取和显微注射，受精卵的培养和发育。本发明成功获得低磷性佝偻病模型，该模型的获得能够有效地模拟人类疾病的病理过程，能更有效地预测新疫苗、新药和新诊断试剂等在临床应用中的效果，同时大大降低新药研发的风险，为临床研究提供基础模型。
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公开(公告)号：CN106755026A
公开(公告)日：2017-05-31
申请号：CN201611172845.4
申请日：2016-12-18
Applicant: 吉林大学
IPC: C12N15/63 , C12N15/66 , C12N15/89 , A01K67/027
Abstract: 一种sgRNA表达载体的构建及牙釉质钙化不全模型的建立，属于生物技术领域。本发明的目的是采用CRISPR‑CAS9基因敲除技术成功获得人类牙釉质钙化不全模型的sgRNA表达载体的构建及牙釉质钙化不全模型的建立。本发明sgRNA表达载体的构建：sgRNA选取：在FAM83H基因第5个外显子处选取2个sgRNA序列作用靶点，合成两对寡聚核苷酸链，sgRNA双链DNA片段的合成，UC57和sgRNA双链DNA连接，使用sgRNA表达载体建立牙釉质钙化不全模型。本发明能更有效地预测新疫苗、新药和新诊断试剂等在临床应用中的效果，同时大大降低新药研发的风险，为临床研究提供基础模型。
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公开(公告)号：CN105400810A
公开(公告)日：2016-03-16
申请号：CN201510557129.7
申请日：2015-09-06
Applicant: 吉林大学
Abstract: 一种采用敲除技术建立低磷性佝偻病模型的方法，属于生物技术领域。本发明的目的是采用CRISPR-CAS9基因敲除技术成功获得人类低磷性佝偻病模型的采用敲除技术建立低磷性佝偻病模型的方法。本发明的步骤是：sgRNA表达载体的构建，CAS9mRNA的合成，受精卵的获取和显微注射，受精卵的培养和发育。本发明成功获得低磷性佝偻病模型，该模型的获得能够有效地模拟人类疾病的病理过程，能更有效地预测新疫苗、新药和新诊断试剂等在临床应用中的效果，同时大大降低新药研发的风险，为临床研究提供基础模型。
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