一种大豆抗原β-conglycinin的检测方法

    公开(公告)号:CN104897902A

    公开(公告)日:2015-09-09

    申请号:CN201510271439.2

    申请日:2015-05-25

    CPC classification number: G01N33/68 G01N33/531

    Abstract: 本发明一种大豆抗原β-conglycinin的检测方法,建立一种检测大豆抗原β-conglycinin直接ELISA方法。由方阵实验确定包被抗原为1μg/mL,抗体最适稀释度1:400,由正交响应面实验设计确定最佳封闭时间为58.31min,酶标抗体最佳反应时间为139.16min,底物液作用最佳反应时间为19.43min,灵敏度达1ug/ml,线性检测范围在20ng/ml~640ng/ml之间。板间变异系数(CV%)的平均数为8.16%,板内变异系数(CV%)的平均数为6.91%,交叉反应小于20%。本发明检测方法具有样品前处理相对简单、快速、成本低、仪器化程度低、耗时短等特点,可应用于大豆及其深加工产品中大豆球蛋白含量的检测,适用于现场监控和大量样本筛查。

    兔小肠上皮细胞系及其制备方法

    公开(公告)号:CN102212504A

    公开(公告)日:2011-10-12

    申请号:CN201110114926.X

    申请日:2011-05-05

    Abstract: 本发明提供的兔小肠上皮细胞系,取新生未哺乳仔兔回肠段,机械剪碎,胶原酶IV消化,获得原代培养的兔小肠上皮细胞,联合应用相差消化法和相差贴壁法对兔小肠上皮细胞进行初步;然后应用单克隆方法进一步纯化,得到的细胞株生长状态良好,稳定;细胞形状规则,成铺路石状,角蛋白8鉴定结果为阳性;经过继代培养,筛选获得的一株细胞系,继代培养一直稳定。兔小肠上皮细胞系,来源于新生未哺乳的日本大耳白兔回肠段,保藏编号:CGMCC No.4784;可用于肠道内营养物质吸收通路,抗营养物质的作用,微生态营养,细胞间的信号转导以及隐窝-绒毛系统中各种细胞增殖和分化机制等的研究。

    一种动物消化道黏蛋白提取纯化的方法

    公开(公告)号:CN118344459A

    公开(公告)日:2024-07-16

    申请号:CN202410542803.3

    申请日:2024-04-30

    Abstract: 一种动物消化道黏蛋白提取纯化的方法,本发明涉及一种黏蛋白提取纯化的方法。本发明解决了现有动物消化道黏蛋白提取纯化的方法存在的无法达到最佳效果的问题。方法:溶液配制、获得黏液样品、黏液粗提液的提取与制备、黏蛋白提取纯化。本发明延长半胱氨酸蛋白酶抑制剂孵育时间,进而在减少半胱氨酸蛋白酶抑制剂浓度梯度的条件下,尽可能的保证提取蛋白的新鲜和活性,达到和蛋白提取浓度一致的效果。本发明降低了离心的转速,因此在仪器的选择上和可操作上,降低了提取的难度。本发明的方法保证了蛋白质的新鲜,电泳检测结果显示没有拖尾的现象,提取效果好,提取纯度高。

    一种大豆球蛋白的直接ELISA检测法的构建方法及应用

    公开(公告)号:CN104865388A

    公开(公告)日:2015-08-26

    申请号:CN201510271474.4

    申请日:2015-05-25

    CPC classification number: G01N33/68

    Abstract: 本发明涉及一种大豆球蛋白的直接ELISA检测法的构建方法及应用。所述一种大豆球蛋白的直接ELISA检测法的构建方法通过优化直接ELISA检测法的参数,包括包被抗原为1μg/mL,抗体最适稀释度1:800;最佳封闭时间为60.42min,酶标抗体最佳反应时间为149.63min,底物液作用最佳反应时间为15.03min,最终绘制直接ELISA检测法的标准曲线。在应用直接ELISA检测法测量时,将待测大豆球蛋白溶液先后与大豆球蛋白特异多克隆一抗、将酶标记抗兔IgG作为酶标二抗进行反应,再加入底物液显色,用标准曲线进行判断,直接得到待测大豆球蛋白溶液的大豆球蛋白含量。该检测方法具有简单,快速、成本低,耗时短等特点,可应用于大豆及其深加工产品中大豆球蛋白含量的检测。

    S-8菌及其灭活大豆抗营养因子的工艺方法

    公开(公告)号:CN104830718A

    公开(公告)日:2015-08-12

    申请号:CN201510205215.1

    申请日:2015-04-28

    Inventor: 秦贵信 鲍男

    CPC classification number: C12R1/125 C12N1/20

    Abstract: 本发明公开了一种S-8菌及其灭活大豆抗营养因子的工艺方法,属于大豆抗营养因子灭活技术领域。本发明所述的S-8菌,该菌株为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)S-8,保藏起始日期为2014年11月2日,保藏编号为CGMCC No.9915。所述的S-8菌灭活大豆抗营养因子的工艺方法,具体包括以下步骤:将S-8菌在厚度为5-20cm的物料,30-40℃发酵培养24小时,获得灭活大豆抗营养因子的发酵豆粕。本发明利用筛选自土壤的S-8菌在24小时以内将大豆中的主要抗营养因子都得到良好的灭活。在抗营养因子的灭活方面、发酵时间和营养物的改进等方面与现有技术相比都具有显著改进。

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