兔小肠上皮细胞系及其制备方法

    公开(公告)号:CN102212504B

    公开(公告)日:2012-12-19

    申请号:CN201110114926.X

    申请日:2011-05-05

    Abstract: 本发明提供的兔小肠上皮细胞系,取新生未哺乳仔兔回肠段,机械剪碎,胶原酶IV消化,获得原代培养的兔小肠上皮细胞,联合应用相差消化法和相差贴壁法对兔小肠上皮细胞进行初步;然后应用单克隆方法进一步纯化,得到的细胞株生长状态良好,稳定;细胞形状规则,成铺路石状,角蛋白8鉴定结果为阳性;经过继代培养,筛选获得的一株细胞系,继代培养一直稳定。兔小肠上皮细胞系,来源于新生未哺乳的日本大耳白兔回肠段,保藏编号:CGMCC No.4784;可用于肠道内营养物质吸收通路,抗营养物质的作用,微生态营养,细胞间的信号转导以及隐窝-绒毛系统中各种细胞增殖和分化机制等的研究。

    大豆凝集素提取纯化方法

    公开(公告)号:CN102212105A

    公开(公告)日:2011-10-12

    申请号:CN201110114904.3

    申请日:2011-05-05

    Abstract: 本发明公开了亲和层析填料D-GalN-FF-sepharose4B,成本低、机械强度好,能够耐受较高的纯化压力,流动相的流速加快,纯化周期短,化学性质稳定,能够耐受较高浓度的强碱,使用过的填料可以再生使用,再生方法简单;本发明大豆凝集素纯化方法,纯化工艺比以往的纯化工艺简单、省时,只需一步离心,避免了过量硫酸铵的使用,遭成环境的污染。一个纯化周期内产量(>100mg)高于其他方法一个周期内的纯化产量(<45mg);可实现工业化生产。对本发明制得的纯化大豆凝集素,进行了大豆凝集素分子量及纯度的测定、Western blot鉴定、兔红细胞凝集效价的比较,与标准品相同,无差异。

    于污染条件下分离肠道上皮细胞的方法

    公开(公告)号:CN114480255A

    公开(公告)日:2022-05-13

    申请号:CN202210240520.4

    申请日:2022-03-10

    Abstract: 本申请公开了一种于污染条件下分离肠道上皮细胞的方法,污染条件包括肠道包含细菌数不低于105cfu/m3以及所述方法实施环境中浮游微生物不低于104cfu/L,该方法包括对肠道组织块进行消化、密度梯度离心得到纯化的上皮细胞步骤。本申请适用于不同年龄阶段和生理状态的不同种属动物(新生和已采食动物均可)肠道上皮细胞的分离纯化,且无需控制和使用无菌提取条件及细胞传代纯化技术,操作方法快速、简便、高效,所用仪器设备为实验常规仪器设备,成本低廉,在医学、动物学、营养学等领域的研究以及试剂盒的研发等具有重要的指导意义。

    一种同步释放氨基酸的饲料制备方法及其应用

    公开(公告)号:CN113016941A

    公开(公告)日:2021-06-25

    申请号:CN202110485685.3

    申请日:2021-04-30

    Abstract: 本发明属于蓄牧业养殖技术领域,尤其涉及一种同步释放氨基酸的饲料制备方法及其应用。本发明首先利用膨化工艺、热处理工艺将玉米或者各类淀粉中的淀粉糊化,利用冷水溶解氨基酸,达到5‑100%饱和,利用喷雾装置将含有氨基酸的冷水溶液均匀喷洒至糊化淀粉或者糊化原料表面,使氨基酸上的氨基与淀粉发生交联,同时淀粉在低温老化获得胶状颗粒物料,利用羧甲基纤维素钠,明胶调节物料粘度,从而依据不同动物的生理需求调节氨基酸释放速度,利用制粒机对物料进行制粒,利用破碎机进行破碎,不同动物对于氨基酸释放速度的需求不同,不同日粮类型对于氨基酸释放速度需求也不同,可以调节颗粒大小和粘合剂用量来调节氨基酸释放速度。

    S-8菌及其灭活大豆抗营养因子的工艺方法

    公开(公告)号:CN104830718B

    公开(公告)日:2018-05-29

    申请号:CN201510205215.1

    申请日:2015-04-28

    Inventor: 秦贵信 鲍男

    Abstract: 本发明公开了一种S‑8菌及其灭活大豆抗营养因子的工艺方法,属于大豆抗营养因子灭活技术领域。本发明所述的S‑8菌,该菌株为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)S‑8,保藏起始日期为2014年11月2日,保藏编号为CGMCC No.9915。所述的S‑8菌灭活大豆抗营养因子的工艺方法,具体包括以下步骤:将S‑8菌在厚度为5‑20cm的物料,30‑40℃发酵培养24小时,获得灭活大豆抗营养因子的发酵豆粕。本发明利用筛选自土壤的S‑8菌在24小时以内将大豆中的主要抗营养因子都得到良好的灭活。在抗营养因子的灭活方面、发酵时间和营养物的改进等方面与现有技术相比都具有显著改进。

    大豆凝集素提取纯化方法

    公开(公告)号:CN102212105B

    公开(公告)日:2014-10-29

    申请号:CN201110114904.3

    申请日:2011-05-05

    Abstract: 本发明公开了亲和层析填料D-GalN-FF-sepharose4B,成本低、机械强度好,能够耐受较高的纯化压力,流动相的流速加快,纯化周期短,化学性质稳定,能够耐受较高浓度的强碱,使用过的填料可以再生使用,再生方法简单;本发明大豆凝集素纯化方法,纯化工艺比以往的纯化工艺简单、省时,只需一步离心,避免了过量硫酸铵的使用,遭成环境的污染。一个纯化周期内产量(>100mg)高于其他方法一个周期内的纯化产量(<45mg);可实现工业化生产。对本发明制得的纯化大豆凝集素,进行了大豆凝集素分子量及纯度的测定、Western blot鉴定、兔红细胞凝集效价的比较,与标准品相同,无差异。

    一种动物消化道黏蛋白提取纯化的方法

    公开(公告)号:CN118344459B

    公开(公告)日:2025-02-07

    申请号:CN202410542803.3

    申请日:2024-04-30

    Abstract: 一种动物消化道黏蛋白提取纯化的方法,本发明涉及一种黏蛋白提取纯化的方法。本发明解决了现有动物消化道黏蛋白提取纯化的方法存在的无法达到最佳效果的问题。方法:溶液配制、获得黏液样品、黏液粗提液的提取与制备、黏蛋白提取纯化。本发明延长半胱氨酸蛋白酶抑制剂孵育时间,进而在减少半胱氨酸蛋白酶抑制剂浓度梯度的条件下,尽可能的保证提取蛋白的新鲜和活性,达到和蛋白提取浓度一致的效果。本发明降低了离心的转速,因此在仪器的选择上和可操作上,降低了提取的难度。本发明的方法保证了蛋白质的新鲜,电泳检测结果显示没有拖尾的现象,提取效果好,提取纯度高。

    一种用于不同种属动物消化道杯状细胞的提取纯化方法

    公开(公告)号:CN117229997A

    公开(公告)日:2023-12-15

    申请号:CN202311220857.X

    申请日:2023-09-21

    Abstract: 一种用于不同种属动物消化道杯状细胞的提取纯化方法,涉及细胞生物技术领域,具体涉及一种用于不同种属动物消化道杯状细胞的提取纯化方法。是要解决现有方法分离纯化得到上皮细胞无法反映出消化道的实际机能,现有方法无法用于不同种属动物,不同生理状态动物的问题。方法:一、将动物肠段去除肠道脂肪和结缔组织,清洗;二、将肠段切成小段放入Na2EDTA溶液中孵育;三、上皮剥离,孵育;四、终止消化,得到细胞沉淀;五、取Percoll分离液,离心形成线性密度梯度;六、将细胞悬液加入到线性密度梯度液面上,离心收集下层细胞,离心,得到消化道杯状细胞沉淀。本发明用于提取纯化动物消化道杯状细胞。

    一种氮素、碳架同步释放的瘤胃降解蛋白、制备方法及应用

    公开(公告)号:CN113229413A

    公开(公告)日:2021-08-10

    申请号:CN202110567219.X

    申请日:2021-05-24

    Abstract: 本发明属于蓄牧业养殖技术领域,尤其涉及一种氮素、碳架同步释放的瘤胃降解蛋白、制备方法及应用。本发明将淀粉类原料糊化后与尿素混合,同时控制含水量。糊化后淀粉呈现多孔无规则卷曲状态,在这一状态下淀粉的氢键断裂、羟基暴露,在含水条件下,易于与尿素结合形成玻璃状淀粉尿素复合物。由于淀粉与尿素采用氢键相互紧密连接,在这一状态下淀粉只能和尿素同时分解释放,从而实现氮素、碳架同步释放的目的。

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