公开(公告)号：CN104897902A

公开(公告)日：2015-09-09

申请号：CN201510271439.2

申请日：2015-05-25

Applicant: 吉林农业大学

Inventor： 赵元 ,  鲍男 ,  张诗尧 ,  秦贵信 ,  张晓东 ,  娜仁高娃

IPC: G01N33/68 ,  G01N33/531

CPC classification number: G01N33/68 ,  G01N33/531

Abstract: 本发明一种大豆抗原β-conglycinin的检测方法，建立一种检测大豆抗原β-conglycinin直接ELISA方法。由方阵实验确定包被抗原为1μg/mL，抗体最适稀释度1：400，由正交响应面实验设计确定最佳封闭时间为58.31min，酶标抗体最佳反应时间为139.16min，底物液作用最佳反应时间为19.43min，灵敏度达1ug/ml，线性检测范围在20ng/ml～640ng/ml之间。板间变异系数(CV％)的平均数为8.16％，板内变异系数(CV％)的平均数为6.91％，交叉反应小于20％。本发明检测方法具有样品前处理相对简单、快速、成本低、仪器化程度低、耗时短等特点，可应用于大豆及其深加工产品中大豆球蛋白含量的检测，适用于现场监控和大量样本筛查。

公开(公告)号：CN104865388A

公开(公告)日：2015-08-26

申请号：CN201510271474.4

申请日：2015-05-25

Applicant: 吉林农业大学

Inventor： 赵元 ,  鲍男 ,  张诗尧 ,  秦贵信 ,  娜仁高娃 ,  车东升

IPC: G01N33/68

CPC classification number: G01N33/68

Abstract: 本发明涉及一种大豆球蛋白的直接ELISA检测法的构建方法及应用。所述一种大豆球蛋白的直接ELISA检测法的构建方法通过优化直接ELISA检测法的参数，包括包被抗原为1μg/mL，抗体最适稀释度1：800；最佳封闭时间为60.42min，酶标抗体最佳反应时间为149.63min，底物液作用最佳反应时间为15.03min，最终绘制直接ELISA检测法的标准曲线。在应用直接ELISA检测法测量时，将待测大豆球蛋白溶液先后与大豆球蛋白特异多克隆一抗、将酶标记抗兔IgG作为酶标二抗进行反应，再加入底物液显色，用标准曲线进行判断，直接得到待测大豆球蛋白溶液的大豆球蛋白含量。该检测方法具有简单，快速、成本低，耗时短等特点，可应用于大豆及其深加工产品中大豆球蛋白含量的检测。