公开(公告)号：CN113121666A

公开(公告)日：2021-07-16

申请号：CN202110261150.8

申请日：2021-03-10

Applicant: 厦门大学

Inventor： 王克坚 ,  周瑛 ,  陈芳奕 ,  彭会 ,  陈慧芸

IPC: C07K14/435 ,  A61K38/17 ,  A61P31/04 ,  A61P31/10 ,  A23L3/3535 ,  A01N47/44 ,  A01P1/00 ,  A01P3/00

Abstract: 本发明公开了抗菌肽Scybaumancin105‑127及其应用，该抗菌肽首次发现于拟穴青蟹(Scylla paramamosain)，分子式为C106H188N36O28S3，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明的抗菌肽Scybaumancin105‑127对鲍曼不动杆菌、福氏志贺氏菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、新型隐球菌、单核细胞李斯特氏菌、屎肠球菌及痤疮丙酸杆菌具有良好的抗菌活性，对正常细胞无细胞毒性。该抗菌肽Scybaumancin105‑127抗菌活性高、安全无毒，对临床耐药性细菌也具有较强的抗菌活性，具有广阔的应用前景。

公开(公告)号：CN107760689B

公开(公告)日：2020-06-12

申请号：CN201711076744.1

申请日：2017-11-06

Applicant: 厦门大学

Inventor： 刘海鹏 ,  陈潇潇 ,  郑文云 ,  马兴元 ,  王克坚

IPC: C12N15/12 ,  C12N15/70 ,  C07K14/435 ,  A61K38/17 ,  A61P31/20 ,  A23K20/147

Abstract: 抑制WSSV感染的铁结合蛋白基因Cq‑Ferritin及其制备方法与应用，涉及红螯螯虾铁结合蛋白基因。将Cq‑Ferritin基因连接到原核表达载体pET32a(+)中，构建红螯螯虾铁结合蛋白pET32a‑Cq‑Ferritin重组表达载体；将所得重组表达载体导入宿主细胞E.coli(BL21:DE3)，并用硫代半乳糖苷(IPTG)对其进行诱导表达，获得表达产物；分离纯化得到的表达产物，超声破碎后通过亲和层析获得较高纯度的红螯螯虾铁结合蛋白。所述红螯螯虾Cq‑Ferritin对白斑综合征病毒的感染具有明显抑制作用，所述红螯螯虾铁结合蛋白在制备抗WSSV类新药和作为动物抗病饲料添加剂中应用。

公开(公告)号：CN108558993A

公开(公告)日：2018-09-21

申请号：CN201810031865.2

申请日：2018-01-12

Applicant: 厦门大学

Inventor： 刘海鹏 ,  谢晓露 ,  王克坚

IPC: C07K14/435 ,  C12N15/12 ,  C12N15/70 ,  A61K38/17 ,  A61P31/16

Abstract: 一种抑制WSSV感染的Cq-Ns1abp基因及其蛋白抗病毒活性应用，涉及白斑综合征病毒。将Cq-Ns1abp基因连接到原核表达载体pMal-C2x中，构建红螯螯虾抗WSSV感染调控因子pMal-C2x-Cq-Ns1abp重组表达载体；Cq-Ns1abp基因产物包含N端BTB结构域和C端Kelch结构域蛋白及全长蛋白；将所得重组表达载转化体分别导入宿主细胞，诱导表达得表达产物，再通过亲和层析获得较高纯度的rCq-Ns1abp重组蛋白。由于Cq-Ns1abp对WSSV感染具有抑制作用，对虾类抗病毒免疫具有重要作用，因此红螯螯虾抗WSSV感染调控因子在制备抗病毒感染药物和动物抗病饲料添加剂中应用。

公开(公告)号：CN108285481A

公开(公告)日：2018-07-17

申请号：CN201810091338.0

申请日：2018-01-30

Applicant: 厦门大学

Inventor： 刘海鹏 ,  刘灵珂 ,  张秋霞 ,  王克坚

IPC: C07K14/435 ,  C12N15/12 ,  C12N15/81 ,  A23K20/153 ,  A61K38/17 ,  A61P31/20

Abstract: 促进WSSV感染的基因Cq-BAF及制备方法与应用，所述红螯螯虾屏障自整合因子命名为Cq-BAF。构建Cq-BAF重组表达载体；将所得的重组表达载体转化宿主细胞，并对宿主细胞进行诱导表达，获得表达产物；分离纯化所得的表达产物，获得重组蛋白，即rCq-BAF。Cq-BAF能结合WSSV，抑制其功能后WSSV的感染复制能力降低，说明其本身对WSSV的感染具有促进作用，因此针对Cq-BAF的功能鉴定在探究WSSV如何感染虾类细胞中具有重要研究价值，作为抗病毒感染的靶点，为制备抗WSSV类新药和动物抗病饲料添加剂奠定良好基础。红螯螯虾屏障自整合因子在制备抗WSSV类新药和动物抗病饲料添加剂中应用。

公开(公告)号：CN104087593B

公开(公告)日：2017-07-04

申请号：CN201410327802.3

申请日：2014-07-10

Applicant: 厦门大学

Inventor： 刘海鹏 ,  陈荣元 ,  王克坚

IPC: C12N15/12 ,  C07K14/435 ,  C12N15/70 ,  A61K38/17 ,  A61P31/20 ,  A23K20/147 ,  A23K50/80

Abstract: 一种抗WSSV自噬相关基因Cq‑Atg8及其制备方法与应用，涉及一种自噬相关基因。所述抗WSSV自噬相关基因Cq‑Atg8源自红螯螯虾(C.quadricarinatus)，命名为Cq‑Atg8。所述Cq‑Atg8的制备方法包括以下步骤：1)构建Cq‑Atg8原核重组表达载体；2)将步骤1)所得Cq‑Atg8原核重组表达载体导入宿主细胞，并用IPTG对宿主细胞进行诱导表达，获得表达产物；3)分离纯化步骤2)所得的表达产物，获得重组蛋白，即rCq‑Atg8。所述rCq‑Atg8对WSSV感染复制具有明显抑制作用，因此rCq‑Atg8可在制备抗WSSV类药物和动物抗病饲料添加剂中应用。

公开(公告)号：CN102167736B

公开(公告)日：2013-03-27

申请号：CN201110129015.4

申请日：2011-05-17

Applicant: 厦门大学

Inventor： 王克坚 ,  范丹青 ,  蔡灵

IPC: C07K14/435 ,  C12N15/12 ,  C07K1/04 ,  A61K38/17 ,  A61P31/04 ,  A61P31/10 ,  A23K1/16

Abstract: 一种拟穴青蟹抗菌肽Sphistin及其应用。涉及甲壳类动物基因工程技术领域，提供一种拟穴青蟹抗菌肽Sphistin及其应用。所述拟穴青蟹抗菌肽Sphistin的分子式为C170H293N61O46S1，分子量为3959.61道尔顿。由38个氨基酸组成，来源于拟穴青蟹组蛋白Histone 2A蛋白的N端部分序列，是一种具有抗菌功能的多肽。采用现有的固相化学合成的方法即可获得纯度达95％以上拟穴青蟹抗菌肽Sphistin。所述拟穴青蟹抗菌肽Sphistin对多种革兰氏阴性菌、革兰氏阳性菌有显著的抗菌效果，抗菌谱宽、杀菌速率快，显示出极大的医用价值，在制备抗菌剂方面具有良好的应用。

公开(公告)号：CN102212124A

公开(公告)日：2011-10-12

申请号：CN201110127379.9

申请日：2011-05-17

Applicant: 厦门大学

Inventor： 刘海鹏 ,  陈荣元 ,  丁建 ,  王克坚

IPC: C07K14/435 ,  C07K1/22 ,  C12N15/12 ,  C12N15/81 ,  A61K38/17 ,  A61P31/04 ,  A23K1/17

CPC classification number: Y02A50/475

Abstract: 拟穴青蟹抗脂多糖因子及其制备方法与应用。涉及拟穴青蟹基因工程，提供拟穴青蟹抗脂多糖因子及其制备方法与应用。制备方法包括以下步骤：构建拟穴青蟹抗脂多糖因子重组表达载体；将所得重组表达载体导入宿主细胞，并将宿主细胞进行诱导表达，获得表达产物；分离纯化步所得的表达产物，获得重组蛋白，即拟穴青蟹抗脂多糖因子。拟穴青蟹抗脂多糖因子对革兰氏阴性菌弗氏志贺氏菌、解藻朊酸弧菌、副溶血性弧菌、施氏假单胞菌和荧光假单胞菌，革兰氏阳性菌谷氨酸棒杆菌具有明显抑制生长作用和杀菌作用，在制备抑菌药和作为动物饲料抗菌添加剂中具有潜在的应用价值。

公开(公告)号：CN101063145B

公开(公告)日：2010-04-14

申请号：CN200710008862.9

申请日：2007-04-20

Applicant: 厦门大学

Inventor： 王克坚 ,  杨明 ,  蔡晶晶

IPC: C12N15/63 ,  C12N15/12 ,  C07K14/46 ,  C12N1/21 ,  C12N15/66 ,  C12R1/19

Abstract: 黑鲷抗菌肽Hepcidin的表达载体和表达产物及其构建制备方法，涉及一种可高效表达黑鲷抗菌肽Hepcidin的表达载体的构建与表达。黑鲷抗菌肽Hepcidin的表达载体是在含有E.coli Trc启动子、蛋白质工程改造过的CKS基因及组氨酸标签(His-Tag)的原核表达载体pTrc-CKS上连接黑鲷Hepcidin基因所构建成的pTrc-CKS/hepcidin表达质粒，具有P3C酶切割位点，C末端融合6个组氨酸。其融合表达产物CKS-hepcidin可通过C末端His-Tag亲和层析纯化，纯化的融合产物可用P3C酶将融合蛋白中的CKS切除，获得纯化的Hepcidin。

公开(公告)号：CN1325515C

公开(公告)日：2007-07-11

申请号：CN200510053239.6

申请日：2005-02-17

Applicant: 厦门大学

Inventor： 王克坚 ,  黄文树 ,  李少菁 ,  王桂忠

IPC: C07K14/435 ,  C12N15/12 ,  C12P19/34 ,  A61P31/00

Abstract: 锯缘青蟹抗菌肽及其基因和基因的克隆方法，涉及一种抗菌活性多肽scygonadin及其基因。从锯缘青蟹雄性腺中分离纯化得抗菌肽scygonadin，并以锯缘青蟹的雄性腺总RNA为模板，根据测定的scygonadin抗菌肽N端20个氨基酸序列，设计合成简并引物，利用RT-PCR、RACE等分子生物学技术手段，克隆到锯缘青蟹抗菌肽scygonadin全长cDNA基因序列。该基因可通过构建真核表达载体建立高效表达该抗菌肽的基因工程菌株，体外生产抗菌肽，作为饲料免疫添加剂替代传统饲料中的抗生素，也可以作为抗生素的有效替代品，用于水产养殖业中耐药性细菌的防治药物。另外，还可以用于转基因青蟹的育种研究。

公开(公告)号：CN1721439A

公开(公告)日：2006-01-18

申请号：CN200510053239.6

申请日：2005-02-17

Applicant: 厦门大学

Inventor： 王克坚 ,  黄文树 ,  李少菁 ,  王桂忠

IPC: C07K14/435 ,  C12N15/12 ,  C12P19/34

Abstract: 锯缘青蟹抗菌肽及其基因和基因的克隆方法，涉及一种抗菌活性多肽scygonadin及其基因。从锯缘青蟹雄性腺中分离纯化得抗菌肽scygonadin，并以锯缘青蟹的雄性腺总RNA为模板，根据测定的scygonadin抗菌肽N端20个氨基酸序列，设计合成简并引物，利用RT－PCR、RACE等分子生物学技术手段，克隆到锯缘青蟹抗菌肽scygonadin全长cDNA基因序列。该基因可通过构建真核表达载体建立高效表达该抗菌肽的基因工程菌株，体外生产抗菌肽，作为饲料免疫添加剂替代传统饲料中的抗生素，也可以作为抗生素的有效替代品，用于水产养殖业中耐药性细菌的防治药物。另外，还可以用于转基因青蟹的育种研究。