公开(公告)号：CN101063145B

公开(公告)日：2010-04-14

申请号：CN200710008862.9

申请日：2007-04-20

Applicant: 厦门大学

Inventor： 王克坚 ,  杨明 ,  蔡晶晶

IPC: C12N15/63 ,  C12N15/12 ,  C07K14/46 ,  C12N1/21 ,  C12N15/66 ,  C12R1/19

Abstract: 黑鲷抗菌肽Hepcidin的表达载体和表达产物及其构建制备方法，涉及一种可高效表达黑鲷抗菌肽Hepcidin的表达载体的构建与表达。黑鲷抗菌肽Hepcidin的表达载体是在含有E.coli Trc启动子、蛋白质工程改造过的CKS基因及组氨酸标签(His-Tag)的原核表达载体pTrc-CKS上连接黑鲷Hepcidin基因所构建成的pTrc-CKS/hepcidin表达质粒，具有P3C酶切割位点，C末端融合6个组氨酸。其融合表达产物CKS-hepcidin可通过C末端His-Tag亲和层析纯化，纯化的融合产物可用P3C酶将融合蛋白中的CKS切除，获得纯化的Hepcidin。

公开(公告)号：CN1632120A

公开(公告)日：2005-06-29

申请号：CN200410092013.2

申请日：2004-11-03

Applicant: 厦门大学

Inventor： 王克坚 ,  周红玲 ,  杨明

IPC: C12N15/12 ,  C07K14/435 ,  C12N15/10 ,  C12N15/11

Abstract: 海水养殖鲈鱼的hepcidin抗菌肽基因，涉及从海水养殖鲈鱼中克隆的hepcidin抗菌肽基因。以攻毒鲈鱼肝脏总RNA为模板，参考杂交斑纹鲈鱼hepcidin和人hepcidin的基因序列，设计合成特异引物，利用RT－PCR、5`race和3`race等手段，属hepcidin基因家族新组员。具有抗真菌和革兰氏阳性、阴性菌的活性，是一种与铁代谢密切相关的铁调节激素，可与毕赤酵母等构建真核表达载体建立高效表达hepcidin的基因工程菌株，体外大量生产鲈鱼hepcidin抗菌肽，作为饲料免疫添加剂，减少乃至消除抗生素在水产品中的蓄积，提高水产品质量；作为某些耐药性抗生素的有效替代品，用于水产养殖业中耐药性细菌的防治药物及转基因鱼的育种研究。

公开(公告)号：CN1624127A

公开(公告)日：2005-06-08

申请号：CN200410090296.7

申请日：2004-11-03

Applicant: 厦门大学

Inventor： 王克坚 ,  杨明 ,  周红玲

IPC: C12N15/12 ,  C07K14/46 ,  C12N15/10

Abstract: 海水养殖真鲷的hepcidin抗菌肽基因，涉及一种从海水养殖真鲷中克隆的hepcidin抗菌肽基因。以攻毒真鲷肝脏总RNA为模板，参考杂交斑纹鲈鱼hepcidin的基因序列，设计合成特异引物，利用RT－PCR、5`race和3`race等手段，属hepcidin基因家族新组员。具有抗真菌和革兰氏阳性、阴性菌的活性，是一种与铁代谢密切相关的铁调节激素，可与毕赤酵母等构建真核表达载体建立高效表达hepcidin的基因工程菌株，体外大量生产真鲷hepcidin抗菌肽，作为饲料免疫添加剂，减少乃至消除抗生素在水产品中的蓄积，提高水产品质量；作为某些耐药性抗生素的有效替代品，用于水产养殖业中耐药性细菌的防治药物及转基因鱼的育种研究。

公开(公告)号：CN101063145A

公开(公告)日：2007-10-31

申请号：CN200710008862.9

申请日：2007-04-20

Applicant: 厦门大学

Inventor： 王克坚 ,  杨明 ,  蔡晶晶

IPC: C12N15/63 ,  C12N15/12 ,  C07K14/46 ,  C12N1/21 ,  C12N15/66 ,  C12R1/19

Abstract: 黑鲷抗菌肽Hepcidin的表达载体和表达产物及其构建制备方法，涉及一种可高效表达黑鲷抗菌肽Hepcidin的表达载体的构建与表达。黑鲷抗菌肽Hepcidin的表达载体是在含有E.coliTrc启动子、蛋白质工程改造过的CKS基因及组氨酸标签(His－Tag)的原核表达载体pTrc－CKS上连接黑鲷Hepcidin基因所构建成的pTrc－CKS/hepcidin表达质粒，具有P3C酶切割位点，C术端融合6个组氨酸。其融合表达产物CKS－hepcidin可通过C末端His－Tag亲和层析纯化，纯化的融合产物可用P3C酶将融合蛋白中的CKS切除，获得纯化的Hepcidin。