公开(公告)号：CN115851607A

公开(公告)日：2023-03-28

申请号：CN202211646449.6

申请日：2022-12-21

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 侯静 ,  李梦婷 ,  陈轶群 ,  陈梓馨 ,  薛柯 ,  李淑娴 ,  吴怀通 ,  尹佟明

IPC: C12N5/10 ,  C12N15/65 ,  C12N15/82

Abstract: 本发明属于分子生物学技术领域，本发明提供了一种簸箕柳叶肉原生质体游离方法及瞬时表达体系的建立方法。本发明以簸箕柳组培苗及容器苗叶片为材料，利用酶解法(纤维素酶R10和离析酶R10)游离叶肉原生质体，然后利用聚乙二醇(PEG)法将载体p2GWF7导入得到的簸箕柳叶肉原生质体中，建立簸箕柳原生质体瞬时表达体系。利用本发明方法最终得到的原生质体的产量高达1.57×107个/gFW，且原生质体转化效率达74.3％。本发明为高通量开展簸箕柳关键基因的功能研究与利用提供了有力工具。

公开(公告)号：CN113249509A

公开(公告)日：2021-08-13

申请号：CN202010084061.6

申请日：2020-02-07

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 戴晓港 ,  尹佟明 ,  薛良交 ,  陈晨 ,  吴怀通 ,  房芝馨

IPC: C12Q1/6895 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明涉及生物技术领域，具体而言，提供了一种用于美洲黑杨和小叶杨种间杂交子代的鉴别引物和鉴定方法。本发明提供的用于美洲黑杨和小叶杨种间杂交子代的鉴别引物，包括含有SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2的(a)引物对和/或含有SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4的(b)引物对。该鉴别引物扩增产物在美洲黑杨和小叶杨两个物种中长度存在特异性，可单独使用其中一对引物进行鉴定，两对引物同时使用可以提高鉴别的准确性。此外，使用此引物进行鉴别可以直接排除花粉污染等造成的错误检测结果。

公开(公告)号：CN112725507A

公开(公告)日：2021-04-30

申请号：CN202110139141.1

申请日：2021-02-01

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 邱宇 ,  吴怀通 ,  薛良交 ,  尹佟明

IPC: C12Q1/6895 ,  C12Q1/6879 ,  C12Q1/6858 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明属于林木遗传育种领域，公开了一种用于早期鉴定山杨性别的通用SSR分子标记，及其在山杨性别早期鉴定和不飞絮杨树新品种选育中的应用。所述SSR分子标记包括2对SSR引物。该分子标记的特点包括：1)用上述二对引物能准确识别从自然群体中收集的山杨种质材料的性别；2)引物的扩增片段均位于山杨雄性特异的Y染色体上；3)利用二对引物对山杨DNA进行PCR扩增，获得的产物利用琼脂糖胶电泳检测，在雄株中均得到清晰稳定的扩增产物电泳谱带，在雌株中均得不到任何扩增产物电泳谱带。在山杨育种和栽培管理过程中，通过性别鉴定，用于山杨不飞絮雄株的早期选择，也用于对苗木性别的监测与管理，从而避免造林使用雌性苗木，从而控制飞絮问题。

公开(公告)号：CN111100868A

公开(公告)日：2020-05-05

申请号：CN201911307086.1

申请日：2019-12-17

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 尹佟明 ,  薛良交 ,  吴怀通 ,  陈赢男 ,  陆静 ,  李小平 ,  侯静 ,  戴晓港

IPC: C12N15/29 ,  C07K14/415 ,  C12N15/82 ,  A01H5/02 ,  C12Q1/6895

Abstract: 本发明公开了一种美洲黑杨的促雌基因FERR和抑雌基因FERR-R及其应用，属于植物基因工程技术领域。本发明通过家系连锁分析对美洲黑杨性别决定基因位点进行精细定位，然后利用自然群体材料开展全基因组关联分析，结合转录组及基因组甲基化测序，首次公开杨树促雌基因FERR和抑雌基因FERR-R，FERR-R基因不编码蛋白，而是通过产生siRNAs对促雌基因FERR的启动序列进行甲基化并对其转录本进行剪切，从而抑制促雌基因FERR在杨树雄株中的表达。而杨树雌株不含FERR-R基因，FERR表达不受FERR-R抑制，所以雌株的雌花发育。本发明提供的杨树促雌基因和抑雌基因可应用于杨树性别早期鉴定及分子育种。

公开(公告)号：CN117558341A

公开(公告)日：2024-02-13

申请号：CN202311612769.4

申请日：2023-11-29

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 韦素云 ,  尹佟明 ,  郭臣臣 ,  吴怀通 ,  戴晓港 ,  陈赢男

IPC: G16B20/20 ,  C12Q1/6895 ,  C12Q1/6869 ,  C40B40/06 ,  C40B50/00

Abstract: 本发明公开了美洲黑杨全基因组育种芯片及其构建方法和应用，属于杨树的生物育种领域。本发明利用大规模杨树群体的全基因组重测序数据鉴定多态位点，并通过设定最大缺失率、最小等位基因频率以及哈德温伯格平衡等检验参数，筛选出具有高质量的SNP位点。利用全基因组关联分析获得与生长材性等重要经济性状显著相关的功能位点，最终开发出适用于杨树重要经济性状的40K SNP育种芯片。本发明不仅设计了一种高效、低成本、高精度的基因分型芯片，而且显著提高了杨树重要性状的基因组选择育种准确度。因此，本发明能够提高林木早期选育效率，加速林木良种选育进程，为林木良种选育提供了高效的分子育种技术手段，具有广阔的育种应用前景。

公开(公告)号：CN114891080A

公开(公告)日：2022-08-12

申请号：CN202210489873.8

申请日：2022-05-07

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 周芳伟 ,  吴怀通 ,  尹佟明

IPC: C07K14/415 ,  C12N15/29 ,  C12N15/84 ,  A01H5/00 ,  A01H6/00

Abstract: 本发明首次公开了MBW复合体(PdeMIXTA‑PdeMYC‑PdeWD40)，调控杨絮起始发育，属于植物基因工程技术领域。本发明以杨树的PdeMIXTA基因为诱饵蛋白，对杨絮起始发育时期的的雌花芽的酵母文库进行筛选，得到两个互作蛋白PdeMYC和PdeWD40,通过酵母双杂交实验，双分子萤光互补实验和荧光素酶互补实验，验证了在杨树中PdeMIXTA‑PdeMYC‑PdeWD40形成MBW复合体行使功能，把杨树PdeMIXTA基因在拟南芥无毛突变体gl1中过量表达，可以恢复其野生型毛状体表型，表明该基因可以促进拟南芥表皮细胞凸起分化为表皮毛。以上证实MBW复合体是调控絮的起始发育的关键复合物，为通过基因编辑技术创制无絮杨新品种，提供可靠的靶基因和重要的理论支持。

公开(公告)号：CN109169256B

公开(公告)日：2021-12-24

申请号：CN201811071427.5

申请日：2018-09-13

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 戴晓港 ,  尹佟明 ,  李小平 ,  吴怀通 ,  陈赢男

IPC: A01H1/02 ,  A01G17/00 ,  A01G2/10

Abstract: 本发明提供了一种杨树全同胞子代苗的制备方法及其得到的杨树全同胞子代苗，涉及林木培育技术领域，上述制备方法首先分别从成年杨树上采集雌、雄花枝并将花枝基部浸泡于生根剂中，随后将浸泡生根剂后的雌、雄花枝扦插在育苗基质中，待雄花开放后收集花粉，并对雌花进行人工授粉后进行栽培管理得到杨树全同胞子代种子，然后将种子进行播种培育得到杨树全同胞子代苗。上述方法具有育苗效率高、所构建的苗种为无污染的杨树全同胞子代苗的优点，有效缓解了现有杨树高枝套袋杂交所存在的高空作业危险以及容易造成花粉污染的问题。

公开(公告)号：CN111100868B

公开(公告)日：2021-05-25

申请号：CN201911307086.1

申请日：2019-12-17

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 尹佟明 ,  薛良交 ,  吴怀通 ,  陈赢男 ,  陆静 ,  李小平 ,  侯静 ,  戴晓港

IPC: C12N15/29 ,  C07K14/415 ,  C12N15/82 ,  A01H5/02 ,  C12Q1/6895

Abstract: 本发明公开了一种美洲黑杨的促雌基因FERR和抑雌基因FERR‑R及其应用，属于植物基因工程技术领域。本发明通过家系连锁分析对美洲黑杨性别决定基因位点进行精细定位，然后利用自然群体材料开展全基因组关联分析，结合转录组及基因组甲基化测序，首次公开杨树促雌基因FERR和抑雌基因FERR‑R，FERR‑R基因不编码蛋白，而是通过产生siRNAs对促雌基因FERR的启动序列进行甲基化并对其转录本进行剪切，从而抑制促雌基因FERR在杨树雄株中的表达。而杨树雌株不含FERR‑R基因，FERR表达不受FERR‑R抑制，所以雌株的雌花发育。本发明提供的杨树促雌基因和抑雌基因可应用于杨树性别早期鉴定及分子育种。

公开(公告)号：CN110777153B

公开(公告)日：2021-03-09

申请号：CN201911307704.2

申请日：2019-12-17

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 尹佟明 ,  吴怀通 ,  薛良交 ,  陈赢男 ,  李小平 ,  侯静 ,  戴晓港 ,  陆静

IPC: C12N15/29 ,  C12N15/82 ,  A01H5/02 ,  A01H6/00 ,  C12Q1/6895

Abstract: 本发明公开了一种美洲黑杨促雄基因MmS及其应用，属于植物基因工程技术领域。本发明公开的美洲黑杨雄性特异的促雄基因MmS不编码蛋白，而是作为miRNA海绵吸附miRNA，通过降低所吸附的自由miRNA的浓度，从而使下游靶基因表达量上调。MmS基因在杨树雄株中以半合子的形式存在，仅存在于Y染色单体上，X染色单体不含该基因。促雄基因使杨树雄株雄花发育，而杨树雌株不含该基因，所以杨树雌株的雄性花器官不发育。杨树雄株达到性成熟年龄后会产生大量花粉，造成严重环境污染，在杨树雄株中敲除MmS基因，可以培育不产生花粉的杨树新品系，也可在植物中导入该基因，促进雄花发育，该基因在杨树育种中具有重要的应用价值。

公开(公告)号：CN111534628A

公开(公告)日：2020-08-14

申请号：CN202010359968.9

申请日：2020-04-29

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 尹佟明 ,  吴怀通 ,  邱宇

IPC: C12Q1/6895 ,  C12Q1/6879 ,  C12Q1/686 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了一种用于鉴定美洲黑杨性别的SSR分子标记引物组及其应用，属于分子遗传育种技术领域。本申请以提取的美洲黑杨基因组DNA为模板，利用SSR分子标记NJFU582、NJFU600和NJFU602的引物对进行PCR扩增，若扩增产物中含有与SSR分子标记NJFU582、NJFU600和NJFU602的分子量相符的条带，则所述待测美洲黑杨为雄株，反之为雌株。在美洲黑杨育种和栽培管理过程中，可以在苗期利用叶片等营养组织提取DNA进行性别鉴定，用于美洲黑杨不飞絮雄株的早期选择，也可用于美洲黑杨造林过程中，对苗木性别的监测与管理，从而有效控制苗木达到性成熟龄后飞絮带来的问题。