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公开(公告)号：CN102559528A
公开(公告)日：2012-07-11
申请号：CN201210029158.2
申请日：2012-02-09
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种产甜叶菊糖基转移酶UGT76G1的基因工程菌，它是将UGT76G1编码基因插入PYes2载体的EcoRI和XhoI酶切位点之间，构建了重组质粒，再将重组质粒导入表达宿主酿酒酵母Saccharomyces cerevisiaeYPH499中得到的工程菌；其中，所述的UGT76G1编码基因为GenBank，No.GenBank：AY345974.1，该基因序列命名为UGT。本发明还公开了上述基因工程菌的构建方法及在生产莱鲍迪甙A中的应用。本发明在不外加昂贵UDPG的情况下，以廉价碳源葡萄糖为底物，调节酵母体内UDPG的代谢途径，全细胞催化St甙生成rebaudioside A。
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公开(公告)号：CN100445376C
公开(公告)日：2008-12-24
申请号：CN200610097996.8
申请日：2006-11-27
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了突变的木糖异构酶及其基因和用途。该木糖异构酶的氨基酸序列为SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.5或SEQ ID NO.7所示。该木糖异构酶比野生酶活性有较大提高，可用于高果糖浆的生产。突变木糖异构酶的基因可用于构建利用木糖的重组菌。
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公开(公告)号：CN1884508A
公开(公告)日：2006-12-27
申请号：CN200610085762.1
申请日：2006-06-29
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种突变的木糖异构酶及其基因。该突变的木糖异构酶来自嗜热栖热菌(Thermus thermophilus)，其氨基酸序列为SEQ ID NO.2所示。该突变的木糖异构酶在没有改变原有热稳定性的基础上，提高了对底物D－木糖的特异性。该突变的木糖异构酶可以用于木糖、葡萄糖等混合液中专一地检测木糖的含量，本发明所提供的突变木糖异构酶的基因可用于构建利用木糖的重组菌。
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公开(公告)号：CN103642765B
公开(公告)日：2015-11-18
申请号：CN201310727759.5
申请日：2013-12-25
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种醇脱氢酶突变体，为野生型醇脱氢酶的氨基酸发生如下任意一种情况的突变：野生型醇脱氢酶的序列中第35位丝氨酸突变为天冬氨酸；野生型醇脱氢酶的序列中第35位丝氨酸突变为天冬氨酸，且第36位精氨酸突变为异亮氨酸；野生型醇脱氢酶的序列中第34位丙氨酸、缬氨酸、或半胱氨酸突变为异亮氨酸，且第35位丝氨酸突变为天冬氨酸，且第36位精氨酸突变为异亮氨酸；野生型醇脱氢酶的序列中第13位丝氨酸突变为丙氨酸，且第34位丙氨酸、缬氨酸、或半胱氨酸突变为异亮氨酸，且第35位丝氨酸突变为天冬氨酸，且第36位精氨酸突变为异亮氨酸；所述的野生型醇脱氢酶的序列如SEQ ID NO：2、4、6或8中的任意一项所示。
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公开(公告)号：CN103184185B
公开(公告)日：2014-11-05
申请号：CN201310033013.4
申请日：2013-01-29
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 一株产电基因工程菌菌株，分类命名为铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）PAO1-phzM，已保藏于中国典型培养物保藏中心CCTCC，保藏编号：CCTCC NO：M：2013001。该菌株以铜绿假单胞菌PAO1菌株为宿主菌，将甲基转移酶基因phzM插入pBBR1MCS-5载体的EcoRI和SpeI酶切位点之间，再将重组质粒导入表达宿主Pseudomonas aeruginosa PAO1中获得。本发明采用基因工程手段将绿脓素合成途径中关键基因-甲基转移酶基因phzM在铜绿假单胞菌中进行重组表达，使重组铜绿假单胞菌能够多产绿脓素2.7倍，从而大幅提高产电能力，与原始菌株相比输出电压提高了2倍。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102321564B
公开(公告)日：2014-04-23
申请号：CN201110260211.5
申请日：2011-09-05
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种高效表达三磷酸胞苷合成酶的基因工程菌，其分类命名为大肠埃希氏菌(Escherichia？coli)，该菌株已于2011年7月8日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC？No.5048。本发明还公开了上述基因工程菌的构建方法及其应用。本发明首次将谷氨酸棒杆菌ATCC13032中三磷酸胞苷合成酶基因pyrG在大肠杆菌Rosetta中高效表达。重组的基因工程菌株能够高效表达三磷酸胞苷合成酶基因pyrG，分泌表达三磷酸胞苷合成酶，IPTG诱导表达重组大肠杆菌，酶活为10U/mg；乳糖自诱导表达重组大肠杆菌，酶活为7U/mg。
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公开(公告)号：CN103184185A
公开(公告)日：2013-07-03
申请号：CN201310033013.4
申请日：2013-01-29
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 一株产电基因工程菌菌株，分类命名为铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）PAO1-phzM，已保藏于中国典型培养物保藏中心CCTCC，保藏编号：CCTCC NO：M：2013001。该菌株以铜绿假单胞菌PAO1菌株为宿主菌，将甲基转移酶基因phzM插入pBBR1MCS-5载体的EcoRI和SpeI酶切位点之间，再将重组质粒导入表达宿主Pseudomonas aeruginosa PAO1中获得。本发明采用基因工程手段将绿脓素合成途径中关键基因-甲基转移酶基因phzM在铜绿假单胞菌中进行重组表达，使重组铜绿假单胞菌能够多产绿脓素2.7倍，从而大幅提高产电能力，与原始菌株相比输出电压提高了2倍。
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公开(公告)号：CN101392225B
公开(公告)日：2012-06-27
申请号：CN200810156168.6
申请日：2008-10-06
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种不对称转化制备(S)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯的重组酵母菌，它是导入羰酰还原酶基因和葡萄糖脱氢酶基因的酿酒酵母菌。本发明还公开了上述重组酵母菌的构建方法。利用本发明重组酵母菌制备(S)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯的方法为：以4-氯乙酰乙酸乙酯为底物，以葡萄糖为辅助底物，由本发明的重组酵母菌进行转化反应制备得到(S)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯。本发明的重组酵母菌可在不添加任何辅酶的条件下，高效催化4-氯乙酰乙酸乙酯为(S)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯，光学纯度e.e值大于98％，对底物的转化率大于95％，降低了生产成本，比起其它无需外加昂贵辅酶的菌种，对底物的转发率高，光学活性高。
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公开(公告)号：CN102286556A
公开(公告)日：2011-12-21
申请号：CN201110225388.1
申请日：2011-08-08
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种山梨糖还原酶在生物法制备(S)-4-氯-3羟基丁酸乙酯中的应用。即以氨基酸序列如SEQIDNO：2所示的山梨糖还原酶为催化剂，以4-氯乙酰乙酸乙酯为底物，以NADPH为辅因子，不对称还原制备(S)-4-氯-3羟基丁酸乙酯。本发明首次将氨基酸序列如SEQIDNO：2所示的山梨糖还原酶应用于4-氯乙酰乙酸乙酯不对称还原制备(S)-4-氯-3羟基丁酸乙酯中，取得很好的效果，其酶活高达5.6U/mg，其对底物的得率高达90%、产物的对映体过量值为100％，且产量高，大大降低了生产成本。
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公开(公告)号：CN101372699B
公开(公告)日：2011-11-30
申请号：CN200810124754.2
申请日：2008-09-02
Applicant: 南京工业大学
CPC classification number: C12P7/42 , C12N9/0004
Abstract: 本发明公开了一种氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示的羰酰还原酶在4-氯乙酰乙酸乙酯不对称还原制备(S)-4-氯-3羟基丁酸乙酯中的应用。即以氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示的羰酰还原酶为催化剂，以4-氯乙酰乙酸乙酯为底物，以NADPH为辅因子，不对称还原制备(S)-4-氯-3羟基丁酸乙酯。本发明首次将氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示的羰酰还原酶应用于4-氯乙酰乙酸乙酯不对称还原制备(S)-4-氯-3羟基丁酸乙酯中，取得很好的效果，其对底物的得率高达95％、产物的对映体过量值为100％，且产量高，大大降低了生产成本。
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