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公开(公告)号：CN103525896A
公开(公告)日：2014-01-22
申请号：CN201310447516.6
申请日：2013-09-27
Applicant: 南京工业大学
IPC: C12Q1/06
Abstract: 本发明公开了一种基于TTC染色法的高活力酵母细胞定量筛选方法，将待检测酵母细胞菌液涂布于平板，培养待其长出单菌落；然后接种于96孔细胞培养板各孔培养液中，培养至测定得到菌体OD值在1-3之间，离心弃上清；在96孔细胞培养板各孔中加入TTF萃取剂，震荡10-15S后离心；将震荡离心后的上清液吸取到96孔酶标板中，利用酶标仪在486nm波长下测定TTF吸收值，根据TTF标准曲线及测定的细胞OD值，计算每个孔中TTF含量，以此确定细胞活力大小。本方法筛选结果定量可靠地直接反应细胞活力，不仅能明显降低筛选时间，而且能降低操作过程中的视觉判断产生的人为错误。
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公开(公告)号：CN103215301A
公开(公告)日：2013-07-24
申请号：CN201310034108.8
申请日：2013-01-29
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，涉及微生物燃料电池产电基因工程菌的构建、菌株及其应用。通过分子生物学手段在铜绿假单胞菌PAO1中异源表达大肠杆菌中NAD+从头合成途径与回补途径中共同的关键基因nadE，获得产电量高的基因工程菌株铜绿假单胞菌（Pseudomonasaeruginosa）PA-nadE，应用于微生物燃料电池领域的发展，并且为产电铜绿假单胞菌的基因工程研究奠定了良好的基础。
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公开(公告)号：CN103059008B
公开(公告)日：2016-03-16
申请号：CN201310029180.1
申请日：2013-01-25
IPC: C07D407/04 , C07D311/36 , C07D311/40
Abstract: 一种同时制备高纯度葛根素和大豆苷元的方法，将粉碎的葛根与乙醇按料液比是1:6~1:10混合提取，将所得混合物过滤，滤液减压浓缩至干，得到葛根提取物浸膏，将葛根提取物浸膏用适当浓度的乙醇溶液复溶后，加入盐酸溶液和氯仿回流水解萃取一定时间，静置冷却，分出氯仿，减压浓缩，浓缩物采用乙醇溶液重结晶，得到大豆苷元结晶，酸水解液加水稀释，放置48-72h可析出葛根素粗晶，将其用乙酸-甲醇重结晶，得葛根素产品。本发明同时提取分离葛根中葛根素和大豆苷元，提高了葛根自身的利用价值，充分利用了中药材资源。水解和萃取同时完成，节省操作工序和溶剂的使用量，生产成本低，得率高。
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公开(公告)号：CN103525896B
公开(公告)日：2015-04-08
申请号：CN201310447516.6
申请日：2013-09-27
Applicant: 南京工业大学
IPC: C12Q1/06
Abstract: 本发明公开了一种基于TTC染色法的高活力酵母细胞定量筛选方法，将待检测酵母细胞菌液涂布于平板，培养待其长出单菌落；然后接种于96孔细胞培养板各孔培养液中，培养至测定得到菌体OD值在1-3之间，离心弃上清；在96孔细胞培养板各孔中加入TTF萃取剂，震荡10-15S后离心；将震荡离心后的上清液吸取到96孔酶标板中，利用酶标仪在486nm波长下测定TTF吸收值，根据TTF标准曲线及测定的细胞OD值，计算每个孔中TTF含量，以此确定细胞活力大小。本方法筛选结果定量可靠地直接反应细胞活力，不仅能明显降低筛选时间，而且能降低操作过程中的视觉判断产生的人为错误。
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公开(公告)号：CN103059008A
公开(公告)日：2013-04-24
申请号：CN201310029180.1
申请日：2013-01-25
IPC: C07D407/04 , C07D311/36 , C07D311/40
Abstract: 一种同时制备高纯度葛根素和大豆苷元的方法，将粉碎的葛根与乙醇按料液比是1:6~1:10混合提取，将所得混合物过滤，滤液减压浓缩至干，得到葛根提取物浸膏，将葛根提取物浸膏用适当浓度的乙醇溶液复溶后，加入盐酸溶液和氯仿回流水解萃取一定时间，静置冷却，分出氯仿，减压浓缩，浓缩物采用乙醇溶液重结晶，得到大豆苷元结晶，酸水解液加水稀释，放置48-72h可析出葛根素粗晶，将其用乙酸-甲醇重结晶，得葛根素产品。本发明同时提取分离葛根中葛根素和大豆苷元，提高了葛根自身的利用价值，充分利用了中药材资源。水解和萃取同时完成，节省操作工序和溶剂的使用量，生产成本低，得率高。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102560122B
公开(公告)日：2016-09-21
申请号：CN201210036232.3
申请日：2012-02-17
Applicant: 南京工业大学
CPC classification number: Y02P10/234 , Y02P10/238
Abstract: 本发明公开了一种铅回收的方法，包括从废铅电池中回收铅的方法。所述方法将包含PbSO4、PbO2、PbO和Pb的铅废弃物与柠檬酸发酵液混合反应，以产生柠檬酸铅；从水溶液中分离柠檬酸铅，再将柠檬酸铅转化为铅或氧化铅。本发明方法解决了铅膏火法冶炼工艺中SO2排放以及高温下铅的挥发问题；直接采用柠檬酸发酵液处理铅废弃物，降低成本，减少污染，特别是可以从废旧电池中更有效、更节能地回收铅。
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公开(公告)号：CN103215301B
公开(公告)日：2014-07-09
申请号：CN201310034108.8
申请日：2013-01-29
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，涉及微生物燃料电池产电基因工程菌的构建、菌株及其应用。通过分子生物学手段在铜绿假单胞菌PAO1中异源表达大肠杆菌中NAD+从头合成途径与回补途径中共同的关键基因nadE，获得产电量高的基因工程菌株铜绿假单胞菌（Pseudomonasaeruginosa）PA-nadE，应用于微生物燃料电池领域的发展，并且为产电铜绿假单胞菌的基因工程研究奠定了良好的基础。
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公开(公告)号：CN103184185B
公开(公告)日：2014-11-05
申请号：CN201310033013.4
申请日：2013-01-29
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 一株产电基因工程菌菌株，分类命名为铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）PAO1-phzM，已保藏于中国典型培养物保藏中心CCTCC，保藏编号：CCTCC NO：M：2013001。该菌株以铜绿假单胞菌PAO1菌株为宿主菌，将甲基转移酶基因phzM插入pBBR1MCS-5载体的EcoRI和SpeI酶切位点之间，再将重组质粒导入表达宿主Pseudomonas aeruginosa PAO1中获得。本发明采用基因工程手段将绿脓素合成途径中关键基因-甲基转移酶基因phzM在铜绿假单胞菌中进行重组表达，使重组铜绿假单胞菌能够多产绿脓素2.7倍，从而大幅提高产电能力，与原始菌株相比输出电压提高了2倍。
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公开(公告)号：CN103184185A
公开(公告)日：2013-07-03
申请号：CN201310033013.4
申请日：2013-01-29
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 一株产电基因工程菌菌株，分类命名为铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）PAO1-phzM，已保藏于中国典型培养物保藏中心CCTCC，保藏编号：CCTCC NO：M：2013001。该菌株以铜绿假单胞菌PAO1菌株为宿主菌，将甲基转移酶基因phzM插入pBBR1MCS-5载体的EcoRI和SpeI酶切位点之间，再将重组质粒导入表达宿主Pseudomonas aeruginosa PAO1中获得。本发明采用基因工程手段将绿脓素合成途径中关键基因-甲基转移酶基因phzM在铜绿假单胞菌中进行重组表达，使重组铜绿假单胞菌能够多产绿脓素2.7倍，从而大幅提高产电能力，与原始菌株相比输出电压提高了2倍。
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公开(公告)号：CN102925404A
公开(公告)日：2013-02-13
申请号：CN201210486611.2
申请日：2012-11-26
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 发明属于生物工程技术领域，涉及镉富集基因工程菌及其构建和应用，具体是指镉富集基因工程菌构建及其构建得到的一株菌株，还涉及该菌株的镉耐受和镉吸收等功能的表征。采用本发明所述的构建方法得到的一株富集重镉的基因工程菌，其分类命名为恶臭假单胞菌（Pseudomonasputida）KT2440-SpPCS，其保藏编号为：CCTCCNO：M 2012435。其构建过程主要是通过分子生物学手段在恶臭假单胞菌KT2440中异源表达粟酒裂殖酵母（Schizosaccharomycespombe）植物螯合肽合成酶基因SpPCS，本发明得到的基因工程菌株可以作为植物促生菌，这为后续与植物配合协同修复重金属的研究奠定了基础。
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