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公开(公告)号:CN105274160B
公开(公告)日:2020-06-12
申请号:CN201510772612.7
申请日:2015-11-11
Applicant: 南京工业大学
IPC: C12P17/06
Abstract: 本发明公开了一种酶法不对称还原制备(S)‑N‑boc‑3‑羟基哌啶的方法,以氨基酸序列如SEQIDNO:2所示的醇脱氢酶为催化剂,以N‑boc‑3‑哌啶酮为底物,NADH为辅酶体系,不对称还原制备(S)‑N‑boc‑3‑羟基哌啶。本发明首次将氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示的醇脱氢酶应用于不对称还原制备(S)‑N‑boc‑3‑羟基哌啶中,其对底物的转化率高达99.34%,产物的对映体过量值为100%。反应体系简单、底物浓度高、高底物浓度的催化反应无需分批投料,具有重要的工业应用价值。
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公开(公告)号:CN104726507A
公开(公告)日:2015-06-24
申请号:CN201510150710.7
申请日:2015-04-01
Applicant: 南京工业大学
CPC classification number: C12P7/62 , C12N9/0006
Abstract: 本发明公开了一种醛酮还原酶在催化生成(R)-4-氯-3羟基丁酸乙酯中的应用。即以氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示的醛酮还原酶为催化剂,以4-氯乙酰乙酸乙酯为底物,以NADPH为辅因子,不对称还原制备(R)-4-氯-3羟基丁酸乙酯。本发明首次将氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示的醛酮还原酶应用于4-氯乙酰乙酸乙酯不对称还原制备(R)-4-氯-3羟基丁酸乙酯中,取得很好的效果,其酶活高达8.1U/mg,在其对底物的转化率高达99.8%、产物的对映体过量值大于99%,且产量高,大大降低了生产成本。
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公开(公告)号:CN103290072B
公开(公告)日:2014-10-22
申请号:CN201310062928.8
申请日:2013-02-28
Applicant: 南京工业大学
CPC classification number: Y02P20/582
Abstract: 本发明公开了一种酶法不对称还原制备(S)-4-氯-3羟基丁酸乙酯的方法。即以氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示的羰酰还原酶为催化剂,以4-氯乙酰乙酸乙酯为底物,以NADPH为辅因子,不对称还原制备(S)-4-氯-3羟基丁酸乙酯。本发明首次将氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示的羰酰还原酶应用于4-氯乙酰乙酸乙酯不对称还原制备(S)-4-氯-3羟基丁酸乙酯中,取得很好的效果,其酶活高达7.3U/mg,其对底物的得率高达95%、产物的对映体过量值为100%,且产量高,大大降低了生产成本。
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公开(公告)号:CN117431227A
公开(公告)日:2024-01-23
申请号:CN202311158233.X
申请日:2023-09-08
Applicant: 翁源广业清怡食品科技有限公司 , 南京工业大学 , 广东广业清怡食品科技股份有限公司
Abstract: 本发明公开了一种淀粉分支酶突变体,所述淀粉分支酶突变体是将如SEQ ID NO.1所示的淀粉分支酶TrGBE的第306位、第416位、第429位、第557位和第588位中至少一个位点的氨基酸残基的突变得到的,还公开了编码所述淀粉分支酶突变体的核酸、含所述核酸的重组表达载体以及包含所述重组表达载体的基因工程菌。以及上述淀粉分支酶突变体、编码所述淀粉分支酶突变体的基因、含所述基因的重组表达载体以及包含所述重组表达载体的基因工程菌在制备抗性糊精产品或在制备食品或药品中的应用。该淀粉分支酶突变体具有优良的活性,使其制备抗性糊精的效率大幅度提高,具有广阔的工业应用前景。
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公开(公告)号:CN105154457B
公开(公告)日:2018-10-12
申请号:CN201510601825.3
申请日:2015-09-21
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种来源于丁香假单胞菌的山梨醇脱氢酶基因及其应用,基因核酸序列如SEQ ID NO:1所示,通过构建重组载体并在大肠杆菌中克隆表达,该基因编码的山梨醇脱氢酶氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。山梨醇脱氢酶能高效催化多种重要多元醇与其对应的酮糖的转化,山梨醇脱氢酶对底物的转化率均大于99%,相较于传统依赖异构酶的生产方法,大大降低了后期分离、脱色成本,具有重要的工业应用价值。
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公开(公告)号:CN103966277B
公开(公告)日:2017-01-18
申请号:CN201410218551.5
申请日:2014-05-22
Applicant: 南京工业大学
CPC classification number: Y02P20/588
Abstract: 本发明公开了一种固定化磷脂酶D催化制备磷脂酰丝氨酸的方法,该方法包括如下步骤:(1)以甲壳素为载体,以戊二醛为交联试剂,固定游离磷脂酶D得到磷脂酶D的固定化酶;(2)以步骤醋酸丁酯为有机相溶剂,以pH5.5、50mM的醋酸钠缓冲液为水相溶剂,在温度20~60℃条件下,L-丝氨酸与大豆磷脂按摩尔比10~100:1反应制备磷脂酰丝氨酸,反应结束后过滤回收磷脂酶D重复使用。本发明方法在双相催化体系中转酯率达到78%,固定化酶可以重复利用。方法简单,易于操作,制备成本低廉。(1)制备得到的磷脂酶D的固定化酶为催化剂,以
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公开(公告)号:CN103290072A
公开(公告)日:2013-09-11
申请号:CN201310062928.8
申请日:2013-02-28
Applicant: 南京工业大学
CPC classification number: Y02P20/582
Abstract: 本发明公开了一种酶法不对称还原制备(S)-4-氯-3羟基丁酸乙酯的方法。即以氨基酸序列如SEQIDNO:2所示的羰酰还原酶为催化剂,以4-氯乙酰乙酸乙酯为底物,以NADPH为辅因子,不对称还原制备(S)-4-氯-3羟基丁酸乙酯。本发明首次将氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示的羰酰还原酶应用于4-氯乙酰乙酸乙酯不对称还原制备(S)-4-氯-3羟基丁酸乙酯中,取得很好的效果,其酶活高达7.3U/mg,其对底物的得率高达95%、产物的对映体过量值为100%,且产量高,大大降低了生产成本。
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公开(公告)号:CN102559528B
公开(公告)日:2013-08-21
申请号:CN201210029158.2
申请日:2012-02-09
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种产甜叶菊糖基转移酶UGT76G1的基因工程菌,它是将UGT76G1编码基因插入PYes2载体的EcoRI和XhoI酶切位点之间,构建了重组质粒,再将重组质粒导入表达宿主酿酒酵母Saccharomyces cerevisiaeYPH499中得到的工程菌;其中,所述的UGT76G1编码基因为GenBank,No.GenBank:AY345974.1,该基因序列命名为UGT。本发明还公开了上述基因工程菌的构建方法及在生产莱鲍迪甙A中的应用。本发明在不外加昂贵UDPG的情况下,以廉价碳源葡萄糖为底物,调节酵母体内UDPG的代谢途径,全细胞催化St甙生成rebaudioside A。
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公开(公告)号:CN103160547A
公开(公告)日:2013-06-19
申请号:CN201310132479.X
申请日:2013-04-17
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种氨基酸序列如SEQIDNO:2所示的醇脱氢酶在4-氯乙酰乙酸乙酯不对称还原制备(R)-4-氯-3羟基丁酸乙酯中的应用。即以氨基酸序列如SEQIDNO:2所示的醇脱氢酶为催化剂,以4-氯乙酰乙酸乙酯为底物,以NADH为辅因子,不对称还原制备(R)-4-氯-3羟基丁酸乙酯。本发明首次将氨基酸序列如SEQIDNO:2所示的醇脱氢酶应用于4-氯乙酰乙酸乙酯不对称还原制备(R)-4-氯-3羟基丁酸乙酯中,取得很好的效果,其酶活高达5.6U/mg,其对底物的得率高达94%、产物的对映体过量值为100%,且产量高,大大降低了生产成本。
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公开(公告)号:CN105154457A
公开(公告)日:2015-12-16
申请号:CN201510601825.3
申请日:2015-09-21
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种来源于丁香假单胞菌的山梨醇脱氢酶基因及其应用,基因核酸序列如SEQ ID NO:1所示,通过构建重组载体并在大肠杆菌中克隆表达,该基因编码的山梨醇脱氢酶氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。山梨醇脱氢酶能高效催化多种重要多元醇与其对应的酮糖的转化,山梨醇脱氢酶对底物的转化率均大于99%,相较于传统依赖异构酶的生产方法,大大降低了后期分离、脱色成本,具有重要的工业应用价值。
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