一种基于单核苷酸多态性标记的互花米草遗传分型方法

    公开(公告)号:CN103114144B

    公开(公告)日:2014-07-23

    申请号:CN201310048133.1

    申请日:2013-02-05

    Applicant: 南京大学

    CPC classification number: Y02A90/40

    Abstract: 本发明涉及一种基于单核苷酸多态性标记的互花米草遗传分型方法,本方法根据高通量转录组测序筛选得到目标基因,通过PCR反应、PCR产物测序得到多个单核苷酸多态性位点。再由所有有效的单核苷酸多态性位点组成单倍体型用于分子标记以达到遗传分型。本发明操作简便、通量灵活、单核苷酸多态性标记遗传稳定可靠,可在生物学、遗传学研究中推广应用。

    构建严谨型T7表达系统宿主菌的方法

    公开(公告)号:CN102286518A

    公开(公告)日:2011-12-21

    申请号:CN201110128885.X

    申请日:2011-05-18

    Applicant: 南京大学

    Abstract: 本发明公开了一种构建严谨型T7表达系统宿主菌的方法。利用内含肽反式剪接构建严谨型T7表达系统宿主菌,将T7RNA聚合酶分解为氨基末端即N端聚合酶与羧基末端即C端聚合酶,选择一个内含肽I,将内含肽I也分解为氨基末端即N端与羧基末端即C端的内含肽I;将这两个氨基末端的聚合酶与内含肽I融合,在这个基因上游融合常用启动子及其控制基因;同样的,将这两个羧基末端的聚合酶与内含肽I融合融合,在这个基因上游融合一个常用启动子及其控制基因;将这两个融合部分插入大肠杆菌的染色体或低拷贝数质粒中,就得到了严谨型T7表达系统宿主菌。

    索尔邦百合组培培养基及其快速繁殖方法

    公开(公告)号:CN1810097A

    公开(公告)日:2006-08-02

    申请号:CN200510134977.3

    申请日:2005-12-31

    Applicant: 南京大学

    Abstract: 本发明属于生物技术领域。运用组织培养方法,通过室内扩繁获得大量的索尔邦百合无菌组培苗。选取索尔邦百合鳞片叶为外植体,经消毒后切块接入含不同植物激素的培养基中,诱导培养基诱导出愈伤及芽丛,经继代培养基增殖后,当苗高5cm以上并且基部鳞茎球形成时移入生根培养基,经炼苗7天后移栽入基质中。诱导培养基为MS+2,4-D1.0~2.0mg/L和MS+BA1.5mg/L+NAA 0.2mg/L;增殖培养基为MS+2,4-D 1.0~1.5mg/L和MS+BA 0.5mg/L+NAA0.2mg/L;生根培养基为1/2MS+IBA0.2mg/L和NAA0.2mg/L。培养条件是,培养温度22~26℃,光照度2000~2200lx,光照12h.d-1,pH5.8。

    互花米草种群的SNP标记的分型方法

    公开(公告)号:CN103146817B

    公开(公告)日:2014-07-23

    申请号:CN201310046929.3

    申请日:2013-02-05

    Applicant: 南京大学

    CPC classification number: Y02A90/40

    Abstract: 本发明涉及一种互花米草种群的SNP标记的分型方法,本方法根据高通量转录组测序筛选得到目标基因,通过PCR反应、PCR产物测序得到多个SNP位点。再由所有有效的SNP位点组成单倍体型用于分子标记以达到遗传分型。本发明在一次实验中,即可得到丰富的多态性信息。SNP标记遗传稳定、操作简便,适合用物种溯源。

    构建严谨型T7表达系统宿主菌的方法

    公开(公告)号:CN102286518B

    公开(公告)日:2013-07-17

    申请号:CN201110128885.X

    申请日:2011-05-18

    Applicant: 南京大学

    Abstract: 本发明公开了一种构建严谨型T7表达系统宿主菌的方法。利用内含肽反式剪接构建严谨型T7表达系统宿主菌,将T7RNA聚合酶分解为氨基末端即N端聚合酶与羧基末端即C端聚合酶,选择一个内含肽I,将内含肽I也分解为氨基末端即N端与羧基末端即C端的内含肽I;将这两个氨基末端的聚合酶与内含肽I融合,在这个基因上游融合常用启动子及其控制基因;同样的,将这两个羧基末端的聚合酶与内含肽I融合融合,在这个基因上游融合一个常用启动子及其控制基因;将这两个融合部分插入大肠杆菌的染色体或低拷贝数质粒中,就得到了严谨型T7表达系统宿主菌。

    索尔邦百合组培培养基及其快速繁殖方法

    公开(公告)号:CN100429306C

    公开(公告)日:2008-10-29

    申请号:CN200510134977.3

    申请日:2005-12-31

    Applicant: 南京大学

    Abstract: 本发明属于生物技术领域。运用组织培养方法,通过室内扩繁获得大量的索尔邦百合无菌组培苗。选取索尔邦百合鳞片叶为外植体,经消毒后切块接入含不同植物激素的培养基中,诱导培养基诱导出愈伤及芽丛,经继代培养基增殖后,当苗高5cm以上并且基部鳞茎球形成时移入生根培养基,经练苗7天后移栽入基质中。诱导培养基为MS+2,4-D 1.0~2.0mg/L和MS+BA 1.5mg/L+NAA 0.2mg/L;增殖培养基为MS+2,4-D 1.0~1.5mg/L和MS+BA 0.5mg/L+NAA0.2mg/L;生根培养基为1/2MS+IBA0.2mg/L和NAA0.2mg/L。培养条件是,培养温度22~26℃,光照度2000~2200lx,光照12h.d-1,pH 5.8。

    利用内含肽反式剪接制作蛋白质分子量标准的方法

    公开(公告)号:CN101281201A

    公开(公告)日:2008-10-08

    申请号:CN200810024846.3

    申请日:2008-05-07

    Applicant: 南京大学

    Abstract: 本发明公开了一种利用内含肽反式剪接制作蛋白质分子量标准的方法,选择一段一定分子量的已知蛋白X,另选择两种互不兼容的内含肽A和B,将内含肽A和B分别分解为氨基末端(N端)与羧基末端(C端),即An、Ac、Bn、Bc;然后将它们组成五个重组蛋白,即起点蛋白(X-An)、中段1(Ac-X-Bn)蛋白、中段2蛋白(Bc-X-An)、终点1蛋白(Ac-X)、终点2蛋白(Bc-X);通过上面五个蛋白的相互组合连接叠加,获得多种分子量分布范围的蛋白质分子量标准。可用于蛋白质电泳、蛋白质定量以及蛋白质印迹等。

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