一种提高间充质干细胞促进急性髓系白血病分化能力的诱导方法

    公开(公告)号:CN111454896B

    公开(公告)日:2023-02-03

    申请号:CN202010282961.1

    申请日:2020-04-10

    Applicant: 南京大学

    Abstract: 本发明属于医药生物技术领域,具体涉及一种提高间充质干细胞促进急性髓系白血病细胞分化能力的诱导方法的应用。本发明提供的间充质干细胞为人来源的脐带间充质干细胞(UC‑MSCs),在经过细胞因子骨形成蛋白6(BMP6)预处理活化后得到的间充质干细胞(pre‑active MSCs);所述pre‑active MSCs可高效诱导急性髓系白血病细胞分化,该种能力是通过改变UC‑MSCs的IL‑6和IDO的表达量来实现的;所述间充质干细胞为异体间充质干细胞,在经过BMP6处理活化后能够使其分泌能力显著改变,抗AML能力显著增强。该种方法采用BMP6预处理活化MSCs的方法提高了MSCs诱导急性髓系白血病细胞分化的能力,可应用于急性髓系白血病的分化治疗。

    PPARγ蛋白的第166位苏氨酸磷酸化修饰及其应用

    公开(公告)号:CN114591418A

    公开(公告)日:2022-06-07

    申请号:CN202011413315.0

    申请日:2020-12-04

    Applicant: 南京大学

    Abstract: 本发明属于生物医药领域,涉及PPARγ第166位苏氨酸磷酸化修饰作为疾病标志物,在临床前或临床上诊断与检测中的应用;在疾病病程的分期、分级及预后评估中的应用;在指导临床药物的选择的应用;作为研究用指标在制备检测试剂盒、试纸或芯片中的应用;作为调控靶点在制备治疗疾病的药物开发中的应用;作为调控靶点在治疗代谢性疾病及免疫系统疾病中的应用。本发明基于多种生物化学与分子生物学手段,鉴定了哺乳动物(包括人)的PPARγ第166位苏氨酸磷酸化修饰,并证实了其在代谢系统和免疫系统中的功能地位。同时,本发明就发现的生物学功能,进行了相关检测试剂的开发,并以此磷酸化修饰为靶点,筛选并优化出了可用于调控此磷酸化修饰的小分子药物。

    一种用FRET技术检测抗原抗体相互作用的方法

    公开(公告)号:CN114486822A

    公开(公告)日:2022-05-13

    申请号:CN202011151977.5

    申请日:2020-10-23

    Applicant: 南京大学

    Abstract: 本发明属于化学发光生物技术领域,特别涉及一种荧光共振能量转移技术,应用于抗原抗体亲和力相互作用的检测。本发明提供的一种用FRET检测技术是,选用异硫氰酸荧光素(FITC)和罗丹明B(Rhodamine B)做荧光标记物,将罗丹明B与偶联剂EDC/NHS预处理活化基团羧基,将荧光素基团与抗原抗体发生标记反应,将标记好的样品分别经Sephadex G‑25筛选纯化,将带有标记的抗原抗体在酶标板中反应,利用FRET技术测定其荧光强度,检测其相互作用的发生。本发明提供的检测技术旨在利用荧光标记技术搭建一个平台,用于抗原抗体相互作用的筛选检测,且不需多次孵育、洗涤循环,可直接在溶液中反应检测的便捷技术,可应用于抗体的制备、免疫治疗的研究、蛋白功能的检测等方面。

    一种具有抗肿瘤功能的免疫细胞及其应用

    公开(公告)号:CN106754723B

    公开(公告)日:2020-03-17

    申请号:CN201611095758.3

    申请日:2016-12-02

    Applicant: 南京大学

    Inventor: 沈萍萍 牛志远

    Abstract: 本发明属于医药生物技术领域,具体涉及一种基因改造过的对恶性实体瘤具有治疗作用的免疫细胞及其应用,本发明提供的免疫细胞是特定的通过基因改造使之过表达脂代谢相关基因的免疫细胞;所述免疫细胞抑制肿瘤生长的能力是通过在肿瘤微环境中降低免疫细胞本身脂滴的积累,降低促肿瘤基因/蛋白表达,增强免疫细胞的吞噬能力、抗原呈递能力及肿瘤杀伤能力来实现的:所述免疫细胞为离体NKT细胞、DC细胞、巨噬细胞、单核细胞、粒细胞或T细胞。相关代谢调控基因的过表达使免疫细胞抗肿瘤能力显著增强,相较目前受到强烈关注的嵌合抗原受体T细胞免疫疗法(CAR‑T),毒副作用低且不会引起细胞因子风暴,满足临床需求。

    一种杂合肽囊素佐剂及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN102796200B

    公开(公告)日:2014-12-10

    申请号:CN201210295586.X

    申请日:2012-08-17

    Applicant: 南京大学

    Inventor: 沈萍萍 蔡梅红

    Abstract: 本发明属于分子免疫学技术领域,具体涉及一种杂合肽囊素佐剂及其制备方法和应用。主要技术方法如下:先设计出14个囊素三肽的氨基酸序列(Lys-His-Gly-NH2)和2个活性四肽的氨基酸序列(Lys-Asn-Pro-Tyr)密码子为主体的杂合肽囊素N197的核酸序列。接着构建了重组表达载体PET32a-N197,将其转入BL-21(DE3)大肠杆菌后,杂合肽囊素N197获得了高效表达。纯化后的杂合肽囊素N197具有显著的免疫佐剂的特性。本发明中的杂合肽囊素N197具有高效的佐剂特性,且利用大肠杆菌系统可以在体外对其进行大规模的生产,其生产成本低,生产效率高,生物活性好,非常适合企业化生产,具有很好的作为畜禽免疫佐剂的应用前景。

    白杨素在制备治疗肥胖相关代谢炎症药中的应用

    公开(公告)号:CN103432112A

    公开(公告)日:2013-12-11

    申请号:CN201310376829.7

    申请日:2013-08-26

    Applicant: 南京大学

    Abstract: 本发明属于中药应用技术领域,具体涉及白杨素在制备治疗肥胖相关代谢炎症药中的应用。本发明所述白杨素促进了IL-4激活的鼠巨噬细胞替代活化:促进抑炎细胞因子IL-10的释放,促进巨噬细胞替代活化典型标志分子精氨酸酶活的上升,表面分子MGL1/2的上调,经典分子CD206,Ym1,Fizz的上调。特别是在高脂饲喂诱发的肥胖小鼠C57/B6中,白杨素可以抑制血清中促炎细胞因子TNF-α、血清中AST和ALT的释放,提高抑炎细胞因子IL-10的释放,并改善了肝脏和脂肪组织的病变,抑制腹腔巨噬细胞的吞噬功能,抗原递呈能力以及NO的释放能力并且下调了巨噬细胞典型活化表面分子CCR7,CD80的表达。本发明为治疗肥胖相关代谢炎症疾病开发了一种新的治疗药物。

    一种罗丹明B人工抗原及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN103145830A

    公开(公告)日:2013-06-12

    申请号:CN201310072715.3

    申请日:2013-03-07

    Applicant: 南京大学

    Inventor: 沈萍萍 徐加发

    Abstract: 本发明属于免疫学检测技术领域,具体涉及一种罗丹明B人工抗原及其制备方法和应用。由于罗丹明B分子结构本身含有羧基,因此不需要另行引入活性基团。本发明将罗丹明B分子直接以碳二亚胺为偶联剂,在N-羟基琥珀酰亚胺存在的情况下与载体蛋白偶联从而得到罗丹明B的人工抗原。由于在最大程度上保持了其结构的稳定性,因此将其免疫动物后有助于提高抗体的质量。整个方法简单易行,操作简便,人工抗原得率和纯度高。

    一种重组鸡β干扰素的制备方法及其应用

    公开(公告)号:CN102154307A

    公开(公告)日:2011-08-17

    申请号:CN201110044022.4

    申请日:2011-02-24

    Applicant: 南京大学

    Inventor: 沈萍萍 蔡梅红

    Abstract: 本发明属于分子免疫学技术领域,具体涉及一种体外高效制备鸡β干扰素的方法及其应用。主要技术方法如下:利用PCR的方法从鸡肝基因组中扩增出鸡β干扰素基因,将该基因连接到PET28a载体上,构建出重组鸡β干扰素成熟蛋白基因重组载体并转入BL-21大肠杆菌表达系统。鸡β干扰素在大肠杆菌中获得了高效表达,表达的鸡β干扰素的包涵体经过高浓度尿素变性后,经NI-NTA的亲和层析柱纯化,收集洗脱峰并用梯度尿素浓度溶液复性。本发明中的重组鸡β干扰素具有很好的抗病毒的生物学活性,且生产成本低,生产效率高,生物活性好,非常适合企业化生产。

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