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公开(公告)号:CN117467684B
公开(公告)日:2024-09-17
申请号:CN202311171186.2
申请日:2023-09-11
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明涉及一种双功能融合酶及其制备方法和应用,双功能融合酶的制备方法包括:对脱氧雪腐镰刀菌烯醇解毒酶基因dadh和akr13b3进行PCR扩增;构建不同Linker介导的双功能融合酶DADH‑AKR13B3原核表达载体;将双功能融合酶DADH‑AKR13B3在宿主细胞中进行表达。该双功能融合酶将脱氧雪腐镰刀菌烯醇一步酶法解毒为无毒的3‑epi‑DON。上述技术方案中提供的融合酶能有效的将DON直接降解为3‑epi‑DON,可提高酶的催化效率,降低酶的生产成本,在食品和饲料工业中具有潜在的工业化应用前景。
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公开(公告)号:CN114478723B
公开(公告)日:2024-04-02
申请号:CN202210109812.4
申请日:2022-01-29
Applicant: 南京农业大学
IPC: C07K14/335 , A61K38/16 , A61P31/04
Abstract: 本发明公开了一种提高革兰氏阴性菌外膜通透性的抗菌肽。它是以植物乳杆菌素A为模板,通过删减其氨基酸序列、改变氨基酸组成、改变空间结构、改变电荷和疏水性等方法得到新型抗菌肽,该抗菌肽具有较强的抑菌活性,对大肠杆菌的MIC为3.125μg/mL,并且在0.78μg/mL时可显著的提高大肠杆菌外膜的通透性,提高疏水性抗生素对阴性菌的抗菌效果。本发明通过改造植物乳杆菌素A,尤其得到一种有效提高革兰氏阴性菌外膜通透性的抗菌肽OP4,可将红霉素的抗菌效果提高62.5倍。本发明为治疗革兰氏阴性菌的感染提供了新的潜在途径。
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公开(公告)号:CN117467684A
公开(公告)日:2024-01-30
申请号:CN202311171186.2
申请日:2023-09-11
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明涉及一种双功能融合酶及其制备方法和应用,双功能融合酶的制备方法包括:对脱氧雪腐镰刀菌烯醇解毒酶基因dadh和akr13b3进行PCR扩增;构建不同Linker介导的双功能融合酶DADH‑AKR13B3原核表达载体;将双功能融合酶DADH‑AKR13B3在宿主细胞中进行表达。该双功能融合酶将脱氧雪腐镰刀菌烯醇一步酶法解毒为无毒的3‑epi‑DON。上述技术方案中提供的融合酶能有效的将DON直接降解为3‑epi‑DON,可提高酶的催化效率,降低酶的生产成本,在食品和饲料工业中具有潜在的工业化应用前景。
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公开(公告)号:CN116210766B
公开(公告)日:2025-03-25
申请号:CN202211368136.9
申请日:2022-11-03
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种提高酸奶黏度和益生活性的方法,利用植物乳杆菌发酵酸奶,所述植物乳杆菌为植物乳杆菌cyaA超量表达菌株。该菌株通过一种新的CRP类似物与cAMP形成复合物激活植物乳杆菌胞外多糖合成,提高植物乳杆菌胞外多糖的产量,增加酸奶黏度。将植物乳杆菌发酵的碳源设定为麦芽糖。本发明通过分析多糖生物合成簇,鉴定与启动子结合的转录调节因子,以阐明了麦芽糖增加EPS产量的调节机制,并将其用于改善酸奶的质地,在不使用或者大大降低使用添加剂的情况下,提高了酸奶的黏度和益生活性,降低了生产成本,简化了生产工艺,提高了发酵乳的安全性。
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公开(公告)号:CN119144623A
公开(公告)日:2024-12-17
申请号:CN202411469671.2
申请日:2024-10-21
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种呕吐毒素解毒酶及其应用,公开了来源于酸杆菌门(Acidobacteriota)的DON解毒酶基因aadh序列、由DON解毒酶基因aadh编码而成的DON解毒酶和DON解毒酶的制备方法以及DON解毒酶在降解呕吐毒素中的应用,其中,所述制备方法包括如下步骤:对DON解毒酶基因aadh进行密码子优化和基因合成;构建DON解毒酶基因aadh的原核表达载体;将原核表达载体在原核宿主细胞中进行表达;本发明所述的DON解毒酶能降解呕吐毒素,以及能脱除霉变谷物原料及饲料中的毒素。
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公开(公告)号:CN114478723A
公开(公告)日:2022-05-13
申请号:CN202210109812.4
申请日:2022-01-29
Applicant: 南京农业大学
IPC: C07K14/335 , A61K38/16 , A61P31/04
Abstract: 本发明公开了一种提高革兰氏阴性菌外膜通透性的抗菌肽。它是以植物乳杆菌素A为模板,通过删减其氨基酸序列、改变氨基酸组成、改变空间结构、改变电荷和疏水性等方法得到新型抗菌肽,该抗菌肽具有较强的抑菌活性,对大肠杆菌的MIC为3.125μg/mL,并且在0.78μg/mL时可显著的提高大肠杆菌外膜的通透性,提高疏水性抗生素对阴性菌的抗菌效果。本发明通过改造植物乳杆菌素A,尤其得到一种有效提高革兰氏阴性菌外膜通透性的抗菌肽OP4,可将红霉素的抗菌效果提高62.5倍。本发明为治疗革兰氏阴性菌的感染提供了新的潜在途径。
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公开(公告)号:CN117264975A
公开(公告)日:2023-12-22
申请号:CN202311122251.2
申请日:2023-09-01
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明涉及本发明涉及一种呕吐毒素解毒酶基因的克隆、表达与应用,属于生物技术领域。本发明公开了来自德沃斯氏菌(Devosia strain)的呕吐毒素解毒酶基因dadh和akr13b3,其核苷酸序列分别如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.3所示,编码呕吐毒素(DON)解毒酶DADH、AKR13B3。其中DADH将DON氧化生成为低毒的3‑keto‑DON,AKR13B3将3‑keto‑DON还原生成为无毒产物3‑epi‑DON,证实DADH和AKR13B3对DON具有完全的解毒能力,能有效解决谷物原料及饲料中呕吐毒素污染问题,具有潜在的工业应用前景。
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公开(公告)号:CN115851501A
公开(公告)日:2023-03-28
申请号:CN202211186310.8
申请日:2022-09-27
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N1/20 , C12N9/42 , C12N9/02 , C12N9/08 , C12Q1/689 , A23L7/104 , A23L33/00 , A23L33/21 , A23L29/00 , C12R1/07
Abstract: 本发明公开了一种芽孢杆菌、微生物制剂及培养方法和应用,所述芽孢杆菌分类命名为LM1,保藏编号为CGMCC NO.24989,于2022年5月30日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心。本发明的芽孢杆菌,具有木质纤维素降解能力,具有很强的产纤维素酶和木质素酶的能力,能够通过发酵降解谷物膳食纤维中的木质纤维素,进而提高其中可溶性膳食纤维的含量。因此,本发明的具有降解木质纤维素能力的芽孢杆菌可用于制备纤维素酶或木质素酶,并可用于发酵谷物降解其中的木质纤维素,提高可溶性膳食纤维含量,进而提升谷物营养品质。
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公开(公告)号:CN116210766A
公开(公告)日:2023-06-06
申请号:CN202211368136.9
申请日:2022-11-03
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种提高酸奶黏度和益生活性的方法,利用植物乳杆菌发酵酸奶,所述植物乳杆菌为植物乳杆菌cyaA超量表达菌株。该菌株通过一种新的CRP类似物与cAMP形成复合物激活植物乳杆菌胞外多糖合成,提高植物乳杆菌胞外多糖的产量,增加酸奶黏度。将植物乳杆菌发酵的碳源设定为麦芽糖。本发明通过分析多糖生物合成簇,鉴定与启动子结合的转录调节因子,以阐明了麦芽糖增加EPS产量的调节机制,并将其用于改善酸奶的质地,在不使用或者大大降低使用添加剂的情况下,提高了酸奶的黏度和益生活性,降低了生产成本,简化了生产工艺,提高了发酵乳的安全性。
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公开(公告)号:CN116179585A
公开(公告)日:2023-05-30
申请号:CN202211373171.X
申请日:2022-11-03
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N15/74 , C12N15/31 , C12N1/21 , C07K14/335 , C12R1/25
Abstract: 本发明公开了一种提高植物乳杆菌环境胁迫耐受性的方法,包括敲除转录抑制因子LsrR的步骤,通过构建转录抑制因子LsrR的敲除质粒并将其导入植物乳杆菌中,实现敲除转录抑制因子LsrR,所述环境胁迫为恶劣温度条件、酸碱条件以及胆盐条件中的一种或者几种。本发明鉴定了植物乳杆菌中的转录调控因子并阐明调控多糖合成的调控机制。将基因组数据挖掘与共沉淀共沉淀分析相结合,以确定植物乳杆菌特有的调节蛋白。使用电泳迁移率变动分析(EMSA)来评估该调节剂与启动子DNA的结合以催化多糖合成,并探讨了植物乳杆菌对胆汁盐、冻干、温度、pH和AI‑2的反应机制。提供了一株环境胁迫耐受增强的植物乳杆菌,具体为植物乳杆菌lsrR敲除菌株,增强了植物乳杆菌对环境胁迫的耐受。
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