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公开(公告)号：CN118374440A
公开(公告)日：2024-07-23
申请号：CN202410576309.9
申请日：2024-05-10
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明提供了一种高效、稳定的从不同年龄和部位的猪体中分离成纤维细胞的方法。该方法利用组织块贴壁法进行原代培养，并且优化了细胞的生长环境和营养供应，提高了成纤维细胞的活性和纯度。本发明还涉及细胞的体外传代培养和增殖分化能力验证，确保所得成纤维细胞适合细胞培养肉的生产。通过本发明，可获得高增殖能力的成纤维细胞，且这些细胞在体外表现出细胞外基质相关基因的特异性表达，对提高细胞培养肉的生产效率和质量具有重要作用。
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公开(公告)号：CN117871501A
公开(公告)日：2024-04-12
申请号：CN202410045565.5
申请日：2024-01-11
Applicant: 南京农业大学
IPC: G01N21/65 , G01N33/569 , G01N33/543 , C12Q1/24 , G01N33/531 , B22F1/054
Abstract: 本发明的免疫磁分离联合拉曼光谱特异性检测单增李斯特菌，利用链霉亲和素‑生物素介导偶联单增李斯特菌抗体制备免疫磁珠；将其与已知浓度的单增李斯特菌标准液混合、孵化后，得到磁珠/食源性致病菌复合物，再加入纳米银颗粒增强基底进行表面增强拉曼检测，建立单增李斯特菌浓度‑拉曼强度标准曲线；将待测样品与磁珠、纳米银基底混合进行拉曼检测，所得拉曼强度与标准曲线进行对比，即可得出待测样品中单增李斯特菌的含量。其是一种捕获效率高、简便、分离时间短，从复杂基质中快速、特异分离目的菌单增李斯特菌的检测方法。相比于菌落计数方法，本发明的检测方法用时显著缩短，检测时间﹤3h；为致病菌检测指出了新的方向性。
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公开(公告)号：CN116399838A
公开(公告)日：2023-07-07
申请号：CN202310075669.6
申请日：2023-02-07
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种使用荧光‑高光谱成像技术，快速检测鸡肉储藏过程中微生物含量的方法。包括以下步骤：获取400‑1000nm鸡胸肉样品的原始荧光‑高光谱图像；对原始荧光‑高光谱图像进行校正；利用感兴趣区域(ROI)提取荧光‑高光谱图像的平均光谱数据；对光谱数据进行预处理；利用SVM建立荧光‑高光谱预测模型。本发明提供的荧光‑高光谱成像技术，对鸡肉储藏过程中的微生物生长具有良好的预测能力，极大地缩短了微生物培养周期，实现了鸡肉储藏过程中微生物的在线、无损监测。
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公开(公告)号：CN115191475A
公开(公告)日：2022-10-18
申请号：CN202210853632.7
申请日：2022-07-11
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种优质肉类复合保鲜剂，包括双乙酸钠、迷迭香提取物、单双甘油脂肪酸酯与乳酸链球菌素，双乙酸钠、迷迭香提取物、单双甘油脂肪酸酯与乳酸链球菌素的使用量分别占总质量比例为0.05％～0.25％、0.006％～0.03％、0.2％～2.2％与0.01％～0.05％。同时，本发明公开了该复合保鲜剂的使用方法。本发明利用栅栏技术，将对乳酸链球菌素、双乙酸钠、迷迭香提取物和单双甘油脂肪酸酯进行复配，获得最佳比例的优质肉类复合保鲜剂，减少单一保鲜剂的应用，达到最佳保鲜效果，延长乳化肠的货架期。
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公开(公告)号：CN112592989B
公开(公告)日：2021-07-13
申请号：CN202011354285.0
申请日：2020-11-27
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种区分奇异变形杆菌和沙门氏菌的RPA引物及检测方法。区分奇异变形杆菌和沙门氏菌的RPA引物由针对奇异变形杆菌毒力基因ureR的引物和针对沙门氏菌dnaN的引物组成；所述的针对奇异变形杆菌毒力基因ureR的引物为：上游引物ureR‑F：SEQ ID NO.1，下游引物ureR‑R：SEQ ID NO.2；针对沙门氏菌dnaN的引物为：上游引物dnaN‑F：SEQ ID NO.3，下游引物dnaN‑R：SEQ ID NO.4。本发明采用RPA扩增技术同时检测和区分这两种细菌，用时更短，更灵敏，无需PCR等昂贵设备，便于基层和大批量样本的快速检测使用。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN119530146A
公开(公告)日：2025-02-28
申请号：CN202411860714.X
申请日：2024-12-17
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N5/0775
Abstract: 本发明提供了双氢黄酮类化合物柚皮苷在促进猪肌肉干细胞增殖及分化形成肌管中的应用，其是将柚皮苷添加至含15％胎牛血清、1％双抗的DMEM/F12培养基及含2％马血清、1％双抗的DMEM分化培养基至终浓度70μM，分别在增殖及分化阶段处理猪肌肉干细胞，使用Hoechst 33342染色及免疫荧光染色法分别对增殖阶段细胞数量及分化阶段形成肌管中Myosin的荧光面积、荧光强度及核融合率进行判定。加入柚皮苷处理后的肌肉干细胞的相对增殖倍数及肌管中Myosin荧光面积、荧光强度及核融合率均显著高于空白对照组。采用本方法可以促进猪肌肉干细胞的增殖及分化，为维持细胞干性及培养肉的规模化生产提供新思路。
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公开(公告)号：CN114990056B
公开(公告)日：2024-04-12
申请号：CN202210695711.X
申请日：2022-06-20
Applicant: 南京周子未来食品科技有限公司 , 南京农业大学
IPC: C12N5/077
Abstract: 本发明提供一种高纯度猪脂肪祖细胞的分离纯化方法，包括如下步骤：采集猪脂肪组织，漂洗，消化，得到含有猪脂肪祖细胞的单核细胞悬液；取含有脂肪祖细胞的单核细胞悬液，离心、细胞筛过滤、裂解、贴壁培养，取贴壁细胞即为含有猪脂肪祖细胞的单核细胞群；将猪脂肪祖细胞的单核细胞群进行流式分选，先选取出CD31和CD45阴性的细胞，再从前述细胞中选取出CD29和CD140a阳性的细胞，即为纯化后的猪脂肪祖细胞。应用本发明的纯化方法，可以稳定的获得高纯度的猪脂肪祖细胞。分离得到的猪脂肪祖细胞具有高效的分化效率。应用本发明的方法，可以为培养脂肪研究和实际生产提供大量的种子细胞来源。
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公开(公告)号：CN114958730A
公开(公告)日：2022-08-30
申请号：CN202210429466.8
申请日：2022-04-22
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N5/077
Abstract: 本发明提供一种肌肉干细胞增殖培养基、分化培养基及其应用。包括添加有3，2’‑二羟基黄酮的肌肉干细胞增殖培养基，添加有槲皮素的肌肉干细胞分化培养基。采用肌肉干细胞增殖培养基在体外短期培养猪肌肉干细胞时增殖速度显著提高，培养3天得到的细胞数量是正常培养基的1.35倍；在肌肉干细胞分化培养基中诱导分化5天，细胞的分化能力显著上升，肌肉特异性表蛋白肌球蛋白重链表达量显著上升。本发明还提供所述培养基的应用，以及基于本发明所述培养基制备培养肉的方法，提高肌肉干细胞在体外短期培养的扩增数量及分化能力，有利于培养肉的生产。
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公开(公告)号：CN114835727A
公开(公告)日：2022-08-02
申请号：CN202210634612.0
申请日：2022-06-07
Applicant: 南京农业大学
IPC: C07D495/04 , G01N33/68
Abstract: 本发明公开了一种咖啡酸‑生物素小分子探针及其制备方法和应用，咖啡酸小分子探针结构式包括咖啡酸、生物素和连接链三部分组成。本发明设计的咖啡酸小分子探针用于研究多酚‑蛋白作用机制，结果表明其有效富集到与咖啡酸作用的蛋白，该小分子探针为研究其他多酚与蛋白作用机制提供基础和模板分子，同时也为探索咖啡酸其他药理作用机制提供良好工具，具有重要的学术研究价值和应用前景。
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公开(公告)号：CN113862225A
公开(公告)日：2021-12-31
申请号：CN202111169385.0
申请日：2021-10-08
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N5/10 , C12N5/0775 , C12N15/867 , C12N15/66 , C12N15/12 , C12N15/54
Abstract: 本发明提供一种用于培养肉种子细胞体外扩大培养的改良培养基以及基因操作方法。改良后的培养基添加有靶向Hippo‑YAP通路的激活剂、抑制剂，其能够在高密度条件下促进肌肉干细胞增殖并维持干性基因表达。基因操作方法指对Hippo‑YAP通路的关键元件进行敲低、敲除、过表达等基因操作，可促进高密条件下肌肉干细胞的增殖和干性维持。改良培养基以及基因操作方法有助于体外大量扩增功能性肌肉干细胞，较好地满足培养肉生产对于种子细胞的大规模需求。
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