公开(公告)号：CN118308395B

公开(公告)日：2025-03-18

申请号：CN202410466807.8

申请日：2024-04-18

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 马金成 ,  梁锦钊 ,  林敏 ,  张文彬 ,  胡喆 ,  王海洪

IPC: C12N15/74 ,  C12N15/65 ,  C12Q1/6897

Abstract: 本发明涉及基因工程技术领域，具体涉及一种检测革兰氏阴性菌启动子转录活性的报告基因质粒载体、质粒及应用；本发明报告基因质粒载体包括pFA‑Gm和/或pFA‑Kan质粒，pFA‑Gm质粒包括复制子元件、mob元件以及筛选标记庆大霉素抗性基因，pFA‑Gm质粒的多克隆位点区域两侧分别含有大肠杆菌编码核糖体RNA的rrnB基因的终止区T1和T2，pFA‑Gm质粒的多克隆位点的3′端方向含有1×Flag标签；报告基因质粒为将报告基因片段连接到报告基因质粒载体上而得到；本发明通过报告基因质粒实现对革兰氏阴性细菌中基因启动子转录活性的评估，较实时荧光定量PCR技术的成本以及操作难度更低。

公开(公告)号：CN118064343A

公开(公告)日：2024-05-24

申请号：CN202410272264.6

申请日：2024-03-11

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 梁社坚 ,  王静欣 ,  张文彬 ,  刘嘉慧 ,  黎志杭 ,  陈天心 ,  陈淼

IPC: C12N1/21 ,  C07K19/00 ,  C12N15/75 ,  C12R1/125

Abstract: 本发明公开了一种产四种抗菌肽的重组枯草芽孢杆菌、构建方法及其应用，属于微生物工程技术领域。该菌株包含如SEQ ID NO.1所示的多串联表达盒，能高效表达天蚕素A、天蚕素B、蜜蜂肽Ia和鲎肽素I。本发明构建了一种多串联表达抗菌肽的枯草芽孢杆菌工程菌，在实现稳定遗传的同时提高抗菌肽的表达量，为发展抗菌肽作为新型替抗药物提供技术支撑。

公开(公告)号：CN117987446A

公开(公告)日：2024-05-07

申请号：CN202410214630.2

申请日：2024-02-27

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 马金成 ,  林敏 ,  王海洪 ,  张文彬 ,  胡喆 ,  余永红

IPC: C12N15/78 ,  C12N15/54 ,  C12N15/53 ,  C12N15/31 ,  C12P17/12 ,  A01N63/27 ,  A01P1/00 ,  A01P3/00 ,  C12R1/385

Abstract: 本发明公开了一种产吩嗪‑1‑羧酸基因突变工程菌及其构建方法与应用，属于基因工程技术领域。本发明以绿脓菌素产量更高的铜绿假单胞菌菌株CICC20240作为出发菌株，在出发菌株CICC20240中将Pa acpP替换为Ec acpP，同时敲除基因PA0051、PA5332、PA4209和PA4217，构建高PCA的基因工程菌株用于生产发酵。

公开(公告)号：CN115786229B

公开(公告)日：2024-05-03

申请号：CN202211697472.8

申请日：2022-12-28

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 马金成 ,  温宇明 ,  游晓琳 ,  王海洪 ,  张文彬 ,  胡喆 ,  黄云超

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/74 ,  C12N15/31 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明属于细胞工程技术领域，具体涉及一种用于红球菌基因敲除的重组系统及其应用。包括：Che9c60&61重组酶质粒、Flp重组酶和游离双链DNA敲除盒片段；游离双链DNA敲除盒片段包括：目的基因上下游同源臂序列及在其间插入包含抗性基因的两个同向FRT序列；Flp重组酶质粒的基因序列如SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.3所示。该用于红球菌基因敲除的重组系统可以有效对红球菌进行无痕敲除，庆大霉素抗性丢失效率达到了100％和78.7％；而且本发明基于FRT位点特异性重组酶Flpw方法可有效实现红球菌Rhodococcus ruber R1的高效无痕敲除，为下一轮基因编辑(多基因敲除)回收抗性基因。