公开(公告)号：CN111856006A

公开(公告)日：2020-10-30

申请号：CN202010572083.7

申请日：2020-06-22

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 郭爱珍 ,  赵刚 ,  伊赫萨努拉·希拉尼 ,  陈颖钰 ,  胡长敏 ,  陈曦 ,  陈建国

IPC: G01N33/569 ,  A61K39/02 ,  A61P31/04 ,  C07K14/30 ,  C12N15/31 ,  C12N15/70

Abstract: 本发明公开了牛支原体分泌蛋白MbovP274在制备牛支原体诊断试剂、药物或疫苗中的应用，属于动物传染病防治技术领域。所述牛支原体分泌蛋白MbovP274具有如SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列，基因注释信息显示其为功能未知蛋白，通过实验发现MbovP274蛋白具有抗原性，可以与牛支原体阳性血清反应而不与牛支原体阴性血清反应；并且通过western blot鉴定出其为分泌蛋白，进一步验证出该蛋白可以诱导牛巨噬细胞高表达IL-8、IFN-γ，而IL-8是重要的中性粒细胞激活因子，IFN-γ是广泛的免疫调节因子。综合上述研究，认为MbovP274是牛支原体的重要致病因子且可以激活宿主免疫，在研发新药和疫苗方面具有重要潜力。

公开(公告)号：CN111635880A

公开(公告)日：2020-09-08

申请号：CN202010372788.4

申请日：2020-05-06

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 郭爱珍 ,  陈曦 ,  刘东明 ,  朱习芳 ,  张慧 ,  路豆昆 ,  陈颖钰 ,  胡长敏 ,  陈建国 ,  陈焕春

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/74 ,  C12N15/90 ,  A61K39/02 ,  A61P31/04 ,  C12R1/35

Abstract: 本发明公开了一种牛支原体VspX基因突变株，命名为牛支原体(Mycoplasma bovis)T8.101，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO:M 20191038，所述VspX基因具有如SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列。本发明还公开了该突变株的构建方法及其在牛支原体致病机制和免疫防控领域中的应用。该突变株不表达突变基因编码的蛋白，生长曲线、菌落形态和大小与野生菌株无明显差异。但对牛肺上皮细胞系和纤连蛋白的结合能力却显著下降，有作为毒力致弱菌株在牛支原体致病机制研究和防制药物研发领域应用的潜力。

公开(公告)号：CN111393513A

公开(公告)日：2020-07-10

申请号：CN202010225626.8

申请日：2020-03-26

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 郭爱珍 ,  穆罕默德·祖贝尔 ,  赵刚 ,  张慧 ,  陈颖钰 ,  胡长敏 ,  陈曦 ,  陈建国

IPC: C07K14/30 ,  C12N1/20 ,  C12R1/35

Abstract: 本发明属于动物传染病防治技术领域，具体涉及一种牛支原体分泌性黏附蛋白MbovP58。该蛋白基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，其编码的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。根据大肠杆菌密码子偏爱性，将Mbov_0581基因进行突变，突变后的序列如SEQ ID NO:3所示。用免疫转印法证实该蛋白为分泌蛋白，能与感染牛血清反应。用免疫荧光试验和流式细胞术检测大肠杆菌表达的重组蛋白rMbovP581对牛肺上皮细胞(EBL)的黏附，发现MbovP581对EBL细胞具有良好的黏附能力。综合该蛋白的分泌特征、免疫原性和黏附性，该蛋白可望在制备牛支原体诊断试剂、药物和疫苗中应用。

公开(公告)号：CN104726413B

公开(公告)日：2018-03-09

申请号：CN201510054798.2

申请日：2015-02-01

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 郭爱珍 ,  赵刚 ,  陈曦 ,  汪乾坤 ,  张慧 ,  郭雨丝 ,  陈颖钰 ,  胡长敏

IPC: C12N5/20 ,  C07K16/40 ,  G01N33/577 ,  G01N33/573

Abstract: 本发明属于动物传染病防治技术领域，具体涉及一株牛支原体NADH氧化酶的单克隆抗体。该单克隆抗体是由交瘤细胞株8B7分泌的，所述的NADH氧化酶是一种牛支原体烟酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化酶，本发明修饰的NOX基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。公开了NOX基因的克隆和表达及纯化步骤，重组蛋白质rNOX单克隆抗体的制备步骤以及免疫荧光检测法的建立和初步应用的步骤及效果。所述的杂交瘤细胞株8B7保藏在中国典型培养物保藏中心，其保藏号为CCTCC NO：C2014221，该单克隆抗体能特异性地识别牛支原体。

公开(公告)号：CN107118262A

公开(公告)日：2017-09-01

申请号：CN201610101212.8

申请日：2016-02-24

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 郭爱珍 ,  安瓦尔 ,  赵刚 ,  费萨尔 ,  陈曦 ,  陈颖钰 ,  胡长敏 ,  陈焕春

IPC: C07K14/30 ,  C12N1/21 ,  G01N33/68 ,  G01N33/569

CPC classification number: C07K14/30 ,  G01N33/569 ,  G01N33/68 ,  G01N2333/30

Abstract: 本发明具体涉及到一种牛支原体MbovP579蛋白及其应用。所述的蛋白是从牛支原体HB0801基因组中克隆表达获得，是一种未知功能的特异性免疫原性蛋白。以牛支原体HB0801基因组为模板，克隆Mbov_579基因，根据大肠杆菌的密码子偏爱性，对Mbov_579基因进行修饰，将牛支原体色氨酸密码子UGA突变成大肠杆菌中编码色氨酸的密码子UGG，最终获得在大肠杆菌中表达的重组rMbovP579。本发明的蛋白的基因的核苷酸序列是SEQ ID NO:13中1-2187位碱基所示的序列，其蛋白质的氨基酸序列如SEQ ID NO:14所示。该重组蛋白可作为牛支原体感染和疫苗免疫诊断试剂盒中的抗原蛋白。

公开(公告)号：CN119391748A

公开(公告)日：2025-02-07

申请号：CN202411831935.4

申请日：2024-12-12

Applicant: 华中农业大学 ,  武汉科前生物股份有限公司 ,  武汉科缘生物发展有限责任公司

Inventor： 金梅林 ,  高朔 ,  赵亚 ,  钟鸣 ,  左麒 ,  宋河涛 ,  林晓幸 ,  陈曦 ,  左文峰 ,  孙洁 ,  康超 ,  杭尧 ,  孙小美

IPC: C12N15/81 ,  C12N15/35 ,  A61K39/12 ,  A61P31/20 ,  C12R1/645

Abstract: 本发明属于生物医药技术领域，公开了马克斯克鲁维酵母高效稳定表达犬细小病毒VP2纳米颗粒的方法。申请人通过筛选，组装，制备了适用于马克斯克鲁维酵母的双复制子表达载体，该载体在马克斯克鲁维酵母中实现了高转化率和高表达效率的效果，所述的双复制子表达载体pGKD32为SEQ ID NO.2所示。申请人利用本发明提供马克斯克鲁维酵母表达系统，成功表达纳米颗粒形式的犬细小病毒VP2，为犬细小口服免疫策略的研发提供新思路。

公开(公告)号：CN119082090A

公开(公告)日：2024-12-06

申请号：CN202411327049.8

申请日：2024-09-23

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 郭爱珍 ,  耿元晨 ,  陈颖钰 ,  杨浩 ,  姜传文 ,  陈建国 ,  陈曦 ,  胡长敏 ,  张磊 ,  项志杰

IPC: C12N9/48 ,  C12N15/57 ,  C12N15/113 ,  C12N9/22 ,  C12N5/10 ,  C12N15/867 ,  A61K45/00 ,  A61K48/00 ,  A61P31/14 ,  C12R1/91

Abstract: 本发明公开了羧肽酶6(CPA6)基因在调控宿主抗牛肠道病毒(Bovine enterovirus，BEV)中的应用。利用CRISPR/Cas9基因编辑技术，构建了CPA6基因敲除的牛肾细胞系和抗BEV病毒感染的细胞模型，病毒学检测结果表明，BEV在基因敲除细胞上的增殖速度显著低于野生型细胞，而回补CPA6基因则导致细胞的抗病毒作用消失，表明CPA6基因在调控宿主抗BEV感染中发挥重要作用。本发明从细胞水平上鉴定了CPA6基因的功能，首次发现该基因可以作为基因编辑动物设计的潜在靶点应用于BEV感染的抗病育种、预防与治疗，对减少药物滥用，避免疫情发生具有重大意义。

公开(公告)号：CN118006811A

公开(公告)日：2024-05-10

申请号：CN202410141218.2

申请日：2024-01-31

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 陈曦 ,  郭爱珍 ,  赵梦莹 ,  姜传文 ,  于凡淞 ,  陈颖钰 ,  胡长敏 ,  陈建国 ,  张磊

IPC: C12Q1/689 ,  C12Q1/6844 ,  C12Q1/04 ,  C12N15/113 ,  C12N9/22 ,  C12N15/11 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明公开了一种牛溶血性曼氏杆菌(Mannheimia haemolytica，M.h)快速可视化检测试剂盒，该试剂盒中包括：(1)根据核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示的基因片段设计的引物，用于扩增牛溶血性曼氏杆菌lptB基因目的片段；(2)根据牛溶血性曼氏杆菌lptB基因目的片段设计的sgRNA，用于引导Cas12a蛋白识别靶标分子；(3)用于切割单链DNA的Cas12a蛋白；(4)含有标记物和淬灭剂的ssDNA报告分子。本发明还公开了一种牛溶血性曼氏杆菌非诊断目的快速可视化检测方法，该方法灵敏度高、特异性强，为高效、简便、快速检测牛M.h提供了有力工具。

公开(公告)号：CN116947981B

公开(公告)日：2024-04-23

申请号：CN202310837378.6

申请日：2023-07-07

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 郭爱珍 ,  袁歆玮 ,  赵慧 ,  涂仪琳 ,  杜知航 ,  胡长敏 ,  陈颖钰 ,  陈建国 ,  陈曦 ,  张磊

IPC: C07K14/065 ,  C12N15/39 ,  C12N5/20 ,  C07K16/08 ,  C12N15/70 ,  G01N33/577 ,  G01N33/569 ,  G01N33/535 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种LSDV和GTPV的通用型诊断抗原及其单克隆抗体，该抗原编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，本发明还公开了一种利用该抗原和单克隆抗体建立的牛结节性皮肤病诊断试剂盒，属于免疫学领域。本发明的抗原是经蛋白免疫印迹试验结合质谱测序从LSDV基因组中筛选到的一种通用型诊断靶标，具有免疫原性，利用其制备的单克隆抗体可实现对山羊痘病毒属的LSDV和GTPV感染或免疫血清抗体检测，具有灵敏性和特异性高，检测快速便捷等优点。本发明为LSDV的血清学检测和疫苗免疫评价提供了高价值工具。

公开(公告)号：CN115960184B

公开(公告)日：2023-12-12

申请号：CN202211187275.1

申请日：2022-09-28

Applicant: 华中农业大学 ,  天康生物制药有限公司

Inventor： 郭爱珍 ,  张宇豪 ,  杨文静 ,  杨莉 ,  陈建国 ,  胡长敏 ,  陈曦 ,  陈颖钰 ,  郝成武 ,  贺笋 ,  韩瑞

IPC: C07K14/285 ,  C07K16/12 ,  C12N5/20 ,  G01N33/577 ,  G01N33/569 ,  G01N33/543 ,  A61K39/40 ,  A61P31/04 ,  C12R1/91

Abstract: 本发明公开了一种溶血性曼氏杆菌(Mannheimia haemolytica)A6血清型白细胞毒素抗原蛋白，其氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示。本发明还公开了一种溶血性曼氏杆菌A6血清型白细胞毒素单克隆抗体，它是由保藏编号为CCTCC NO：C2022206的杂交瘤细胞株5D12产生的。该单克隆抗体能与牛溶血性曼氏杆菌A1和A6血清型LKT蛋白发生特异性反应，而且具有中和作用。因此不仅可用于制备LKT毒素蛋白的检测试剂盒，还可用于制备抗溶血性曼氏杆菌的药(56)对比文件F A Lainson.“Characterization ofepitopes involved in the neutralizationof Pasteurella haemolytica serotype A1leukotoxin”《.Microbiology (Reading)》.1996,第142卷(第Pt9期),第2499-2507页.Carolina Guzmán-Brambila 等.“LKTA andPlpE small fragments fusion proteinprotect against Mannheimia haemolyticachallenge”《.Research in VeterinaryScience》.2012,第93卷(第3期),第1293-1300页.陆奕彤 等.“溶血性曼氏杆菌重要抗原的免疫原性分析”《.江苏农业学报》.2022,第38卷(第2期),第446-452 页.李奕欣 等.“牛溶血性曼氏杆菌白细胞毒素、脂蛋白E和外膜蛋白A的免疫原性研究”《.中国预防兽医学报》.2021,第43卷(第7期),第753-758页.