公开(公告)号：CN101113980A

公开(公告)日：2008-01-30

申请号：CN200710052583.2

申请日：2007-06-28

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 韩鹤友 ,  胡德红 ,  周锐 ,  董飞 ,  贝为成 ,  贾凡 ,  梁建功 ,  盛宗海 ,  陈焕春

IPC: G01N33/576 ,  G01N33/543 ,  G01N21/76

Abstract: 本发明公开了一种检测猪胸膜肺炎抗体的胶体金化学发光免疫分析方法，属于动物病毒学免疫检测和化学发光免疫检测技术领域。发明的要点如下：将猪胸膜肺炎Apx IVA抗原固定在96孔酶标板上，封闭96孔酶标板上多余的活性位点，加入待检样品，使之与本发明制备的猪胸膜肺炎Apx IVA抗原相结合；再加入金标兔抗猪IgG，使其与待检样品特异性反应；利用混酸溶解标记在兔抗猪IgG上的胶体金，将溶解液加入化学发光试剂中，检测化学发光强度。本发明中化学发光强度和待测抗体浓度成正比，可以得出化学发光强度和待测猪胸膜肺炎Apx IVA抗体浓度之间的线性关系。与现有技术相比本发明的方法更好的灵敏度，且特异性强，能更好地满足胸膜肺炎临床检测的需要。

公开(公告)号：CN119125552A

公开(公告)日：2024-12-13

申请号：CN202411316159.4

申请日：2024-09-20

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 贝为成 ,  饶静 ,  朱茜 ,  戚永乐 ,  刘小玉 ,  刘迦慧 ,  柳韵 ,  彭婷婷 ,  陈焕春

IPC: G01N33/569 ,  G01N33/58 ,  G01N33/558 ,  G01N33/543 ,  C07K14/195 ,  C12N15/31 ,  C12N15/70

Abstract: 本发明公开了一种区分猪胸膜肺炎放线杆菌野毒感染与疫苗免疫的胶体金试纸条及应用。本发明的试纸条以氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示的ApxIVA截短蛋白作为抗原，该截短蛋白在大肠杆菌中能够可溶性表达，其结构和功能接近天然apxIVA。本发明的试纸条包括样品垫、胶体金垫、NC膜、吸水滤纸、底板，胶体金垫包被有金标apxIVA截短蛋白和金标鸡IgY抗体，NC膜的C线、T线上固定有羊抗鸡IgY抗体、apxIVA截短蛋白，该试纸条仅需25μL生猪血清就可在5‑10min内做出检测，并能区分APP野毒株感染与基因缺失苗APP‑HB‑04M免疫血清样品。

公开(公告)号：CN108048382A

公开(公告)日：2018-05-18

申请号：CN201711328460.7

申请日：2017-12-13

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 贝为成 ,  袁芳艳 ,  游武进 ,  王斌 ,  陈焕春

IPC: C12N1/21 ,  A61K39/102 ,  A61P31/04 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明公开了一种不含抗性标记的猪胸膜肺炎放线杆菌血清1型六基因缺失株及其应用，属于细菌基因工程技术领域。本发明的猪胸膜肺炎放线杆菌血清1型六基因缺失株为缺失了apxIC基因、apxIIC基因、apxIV‑orf1基因、cpxAR基因、arcA基因以及ureA基因的猪胸膜肺炎放线杆菌血清1型菌株。该菌株不含抗性标记，其毒力低、在宿主体内易被清除，且具有很好的免疫保护力，是一种优秀的弱毒疫苗，对猪传染性胸膜肺炎的防治具有重要的意义。

公开(公告)号：CN102776134B

公开(公告)日：2013-10-16

申请号：CN201110122342.7

申请日：2011-05-12

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 方六荣 ,  龙田泗 ,  肖少波 ,  谭臣 ,  贝为成 ,  陈焕春

IPC: C12N1/20 ,  A61K39/09 ,  A61P31/04 ,  C12R1/46

Abstract: 本发明涉及动物传染病疫苗制备技术领域。具体涉及一种猪链球菌2型双基因缺失活疫苗的制备及应用。本发明以猪链球菌2型地方分离株SC19为基础，采用同源重组的方法，在缺失了单基因Ece1的基础上，继续缺失另一个Salk/R基因，获得猪链球菌2型ΔEce1/ΔSalk/R双基因缺失株，以该双基因缺失株的菌液和明胶为主要材料制备出猪链球菌2型双基因缺失活疫苗。本发明涉及的猪链球菌2型ΔEce1/ΔSalk/R株，保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC NO：M2010360。本发明制备的猪链球菌2型双基因缺失活疫苗中的Salk/R基因缺失后其毒力大幅度下降，安全性高，不存在毒力返强的风险，且免疫原性高，能够保护免疫猪抵抗5×LD50猪链球菌2型强毒菌株的攻击。

公开(公告)号：CN101265457A

公开(公告)日：2008-09-17

申请号：CN200710052792.7

申请日：2007-07-20

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 贝为成 ,  陈焕春 ,  刘金林 ,  周锐 ,  何启盖 ,  金梅林 ,  方六荣 ,  吴斌 ,  肖少波 ,  曹胜波

IPC: C12N1/20 ,  A61K39/02 ,  A61P31/04

Abstract: 本发明属于动物细菌基因工程领域，具体涉及一种区分疫苗免疫和野毒感染动物的猪胸膜肺炎放线杆菌血清7型双基因缺失突变株的构建、疫苗及应用。本发明得到一株区分疫苗免疫动物和野毒感染动物的猪胸膜肺炎放线杆菌血清7型基因缺失突变株APP－7－mut01(保藏号为CCTCC NO：M207004)。该株缺失APP血清7型两个主要的毒力因子apxIIC和apxIVAN基因。突变株对猪安全，且具良好免疫原性的毒素ApxIIA和ApxIVAC蛋白，保证了疫苗的免疫效力。用突变株的疫苗免疫动物，动物体内不再产生针对Apx IVAN蛋白抗体，而野毒猪感染的产生针对ApxIVAN蛋白抗体。本发明还公开了利用该双基因缺失突变株构建，疫苗制备及应用。