一种转基因抗纹枯病水稻的培育方法

    公开(公告)号:CN105647967A

    公开(公告)日:2016-06-08

    申请号:CN201410640572.6

    申请日:2014-11-14

    Abstract: 本发明属于植物基因工程技术领域。具体涉及一种转基因抗纹枯病水稻的培育方法。以多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白基因OsPGIP1为目标基因,以Hyg基因作为选择标记基因,采用农杆菌介导的水稻遗传转化法,将目标基因导入受体水稻品种中花11中,通过超表达OsPGIP1基因获得对纹枯病有显著抗性的转基因水稻材料OEpgip1-3。本发明公开了植物转化载体的构建、水稻遗传转化、转化植物的分子鉴定以及田间纹枯病抗性评价试验等过程。

    降解除草剂草甘膦的抗性基因及其编码蛋白

    公开(公告)号:CN103421824B

    公开(公告)日:2014-12-31

    申请号:CN201310320412.9

    申请日:2013-08-28

    Abstract: 本发明属于基因工程领域,涉及一种高效降解除草剂草甘膦的抗性基因的分离、体外定向进化及功能鉴定,本发明还涉及草甘膦的抗性基因在植物除草剂草甘膦,B3S1基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示,其编码的蛋白质的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。通过扩增来自海洋细菌蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)的甘氨酸氧化酶编码基因(thiO),对其进行连续两轮随机突变和一轮DNA改组试验,并结合基于T7噬菌体裂解-辣根过氧物酶/邻联茴香胺酶偶联活性筛选技术,获得最终草甘膦氧化酶突变体B3S1。本发明证实了该基因的功能及在降解除草剂草甘膦抗性中应用途径。

    5-烯醇丙酮莽草酸-3-磷酸合酶基因的分离

    公开(公告)号:CN103194465B

    公开(公告)日:2014-06-18

    申请号:CN201210006891.2

    申请日:2012-01-10

    Abstract: 本发明属于基因工程技术领域,具体涉及一种抗草甘膦基因5-烯醇丙酮莽草酸-3-磷酸合酶(EPSPS)基因的分离鉴定,所述的5-烯醇丙酮莽草酸-3-磷酸合酶(EPSPS)基因的核苷酸序列如SEQ?ID?NO:1所述,该基因编码的氨基酸序列如SEQ?ID?NO:2所述。5-烯醇丙酮莽草酸-3-磷酸合酶(EPSPS)基因是从深海细菌Janibacter?limosus菌株的基因组文库中克隆得到,包含该基因质粒的重组大肠杆菌LZD001保藏在中国典型培养物保藏中心,其保藏编号为CCTCC?No:M2011493。经过生物学实验验证,证明该基因对草甘膦具有一定的耐受性。

    降解除草剂草甘膦的抗性基因及其编码蛋白

    公开(公告)号:CN103421824A8

    公开(公告)日:2014-03-26

    申请号:CN201310320412.9

    申请日:2013-08-28

    Abstract: 发明名称:降解除草剂草甘膦的抗性基因及其编码蛋白本发明属于基因工程领域,涉及一种高效降解除草剂草甘膦的抗性基因的分离、体外定向进化及功能鉴定,本发明还涉及草甘膦的抗性基因在植物除草剂草甘膦,B3S1基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示,其编码的蛋白质的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。通过扩增来自海洋细菌蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)的甘氨酸氧化酶编码基因(thiO),对其进行连续两轮随机突变和一轮DNA改组试验,并结合基于T7噬菌体裂解-辣根过氧物酶/邻联茴香胺酶偶联活性筛选技术,获得最终草甘膦氧化酶突变体B3S1。本发明证实了该基因的功能及在降解除草剂草甘膦抗性中应用途径。

    转基因抗虫水稻的培育方法

    公开(公告)号:CN103421838A

    公开(公告)日:2013-12-04

    申请号:CN201310138291.6

    申请日:2013-04-19

    Inventor: 林拥军 唐微

    Abstract: 本发明属于水稻基因工程技术领域。具体涉及一种转基因抗鳞翅目害虫水稻的培育方法。利用人工合成的新型杀虫基因cry1C作为目标基因其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。以bar基因作为选择标记基因,采用农杆菌介导的遗传转化法,将目标基因导入水稻优良恢复系明恢63中,获得高抗水稻鳞翅目害虫的新型转基因水稻材料T1C-19。此外,可通过有性杂交和体细胞杂交技术将T19-1的抗虫基因重组到新的水稻种质中去,培育成水稻抗虫新品种(系)。本发明公开了转化载体的构建、水稻遗传转化和转化植物的分子鉴定、插入位点的序列分析以及室内和田间抗虫试验等过程的验证试验。

    一种抗寒的草铵膦抗性基因及应用

    公开(公告)号:CN102559717B

    公开(公告)日:2013-03-06

    申请号:CN201210001518.8

    申请日:2012-01-05

    Abstract: 本发明公开了一种抗寒的草铵膦抗性基因及应用,将深海混合菌液按1%的接种量转接到含有草铵膦的HLB的蛋白胨,酵母培养物和氯化钠液体培养基上培养。再将生长好的菌液在含有草铵膦的HLB固体培养基上划线培养。划线分离得到单菌落以后,再按照上述方法复筛一次,得到的抗性细菌。抽提该原始单菌落的基因组DNA,并以其为PCR模板,选用16S扩增通用引物1492R(5-GGTTACCTTGTTACGACTT-3)和27F(5-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3)以细菌染色体DNA为模板进行PCR扩增,鉴定结果为Rhodococcusequi,原始细菌的16S序列为SEQIDNO:1所示的核苷酸序列,一种分离的草铵膦抗性的编码基因,其序列为SEQIDNO:2所示的核苷酸序列。经过生物学实验验证,证明该酶具有高活性,耐低温,可广泛用于不同抗除草剂转基因作物。

    一个水稻胚乳特异表达基因的启动子区域的分离克隆及表达模式鉴定

    公开(公告)号:CN101831428A

    公开(公告)日:2010-09-15

    申请号:CN201010146054.0

    申请日:2010-04-07

    Abstract: 本发明属于植物基因工程领域。从水稻基因组中克隆了同一胚乳特异表达基因(GeneBank登录号为gb:AK107215.1)上游七个不同长度的启动子(EnP2、EnP2-967、EnP2-771、EnP2-591、EnP2-281、EnP2-186和EnP2-155),其核苷酸序列如SEQ?ID?NO:1、SEQ?ID?NO:2、SEQ?ID?NO:3、SEQ?ID?NO:4、SEQ?ID?NO:5、SEQ?ID?NO:6和SEQ?ID?NO:7所示;启动子仅在转化植株的胚乳表达,并且随着胚乳发育阶段的不断进行,表达量呈现下降趋势;在其他组织如叶片、叶鞘、茎杆、根、花、颖壳及胚中均检测不到表达。本发明公开了这七个启动子及其相应表达载体的制备方法,以及通过农杆菌介导的转基因方法导入水稻的应用。

    一种籼稻的离体培养方法
    18.
    发明公开

    公开(公告)号:CN1711831A

    公开(公告)日:2005-12-28

    申请号:CN200410013345.7

    申请日:2004-06-24

    Inventor: 林拥军 张启发

    Abstract: 本发明属于新植物技术领域。公开了一种籼稻的离体培养方法。筛选得到一种适用于籼稻离体培养的愈伤组织继代培养基(J3)和一种分化培养基(DL3)。新的培养基含有大量成分、微量成分、附加成分、碳源和植物激素等组分。应用本发明的培养基和现有经典培养基,在四个有广泛代表性的、目前普遍推广的籼稻品种“明恢63”、“珍汕97B”、“中419”和“W9864S”组培材料上进行了对比试验。结果显示,本发明的籼稻离体培养方法和培养基,在籼稻愈伤组织的继代和再生方面明显优于同类方法和培养基,可以较好地克服籼稻品种离体培养和转基因应用中的困难。

    一种耐除草剂的水稻羟基苯丙酮酸双加氧酶突变体及应用

    公开(公告)号:CN117887677A

    公开(公告)日:2024-04-16

    申请号:CN202410064609.9

    申请日:2024-01-16

    Abstract: 本发明属于基因工程技术领域,具体涉及一种通过基因突变技术对来源于水稻的对羟基苯丙酮酸双加氧酶(HPPD)进行定向进化,以对其HPPD抑制剂类除草剂抗性进行改良,并进一步公开了该突变体及其编码基因在新型耐HPPD抑制剂作物培育领域中的应用。本发明所述耐除草剂的水稻羟基苯丙酮酸双加氧酶突变体,通过体外随机突变技术的方法对植物源HPPD基因OsHPPD进行改造,进而获得具有HPPD抑制剂抗性的植物来源的HPPD突变体,使之对HPPD抑制剂抗性的提高。

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