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公开(公告)号：CN116103209A
公开(公告)日：2023-05-12
申请号：CN202310382313.7
申请日：2023-04-12
Applicant: 北京理工大学
Abstract: 本发明一株肠杆菌CLH‑46及其制备单葡萄糖醛酸甘草次酸的用途、产品和方法，属于微生物与生物技术领域。本发明的肠杆菌（Enterobacter sp.）菌株CLH‑46的保藏编号为CGMCC No.26535。本发明还提供基于所述菌株CLH‑46的制备单葡萄糖醛酸甘草次酸的用途，菌剂产品和制备单葡萄糖醛酸甘草次酸的方法。用本发明的菌株CLH‑46发酵生产18α‑GAMG和18β‑GAMG的产率分别为97.1%和96.2%，发酵罐发酵中制备得到18α‑GAMG终浓度达到39.31g/L，18β‑GAMG终浓度达到29.47g/L。
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公开(公告)号：CN107513505A
公开(公告)日：2017-12-26
申请号：CN201710962610.3
申请日：2017-10-17
Applicant: 北京理工大学
CPC classification number: C07K14/705 , G01N21/6486
Abstract: 本发明公开了一种融合了甜味受体蛋白T1R2/T1R3和检测基因线路，以酵母细胞为宿主的可对待测物的甜味强度进行高效检测的生物系统，其中包括进行过修饰和密码子优化的甜味受体蛋白T1R2/T1R3，改造后适配于T1R2/T1R3的Gpa1蛋白，排除了信号干扰、将信号放大的G蛋白偶联信号通路，以及诱导型、具有荧光蛋白或酶作为报告基因的检测基因线路。将待测物加入到培养环境中，甜味物质分子与甜味受体结合后，利用宿主自身G蛋白偶联信号通路将信号放大，激活下游检测线路，以报告基因的表达情况作为信号输出，通过信号输出强度来表征甜味物质的甜味强度。本发明的培养条件简单、成本低廉、周期短、检测范围广、可重复性高、稳定性高，可实现对不同甜味物质甜味强度的高效检测。
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公开(公告)号：CN103865970A
公开(公告)日：2014-06-18
申请号：CN201410088328.3
申请日：2014-03-11
Applicant: 北京理工大学
Abstract: 本发明涉及利用产紫青霉Li-3（Penicillium？purpurogenum？Li-3）CGMCC？NO.5446固定化细胞转化甘草酸连续生产单葡萄糖醛酸基甘草次酸的工艺及装置，属于生物化工领域。用硅藻土和海藻酸钙共同固定化产紫青霉Li-3，固定化细胞在具隔离筛填充床反应器内转化甘草酸连续生产单葡萄糖醛酸基甘草次酸；本发明中的具隔离筛填充床反应器是在常规填充床反应器内添加隔离筛装置，使填充床分层负载固定化细胞珠体，以此来降低珠体自身重力引起的破损；本发明能长时间保持细胞活力，延长固定化细胞珠体寿命，提高了产物纯度，大大降低了生产成本，使大规模连续生产单葡萄醛酸基甘草次酸成为可能。
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公开(公告)号：CN118834777A
公开(公告)日：2024-10-25
申请号：CN202410832172.9
申请日：2024-06-25
Abstract: 本发明一种生产18α‑GAMG和/或18α‑GL的工程菌及其构建方法、应用和生产方法属于生物工程技术领域。所述工程菌选自：表达UDP‑葡萄糖脱氢酶和类纤维素合酶的酿酒酵母工程菌，表达UDP‑葡萄糖脱氢酶、类纤维素合酶和葡萄糖醛酸基转移酶的酿酒酵母工程菌，或表达UDP‑葡萄糖脱氢酶和葡萄糖醛酸基转移酶的酿酒酵母工程菌；类纤维素合酶选自具有SEQ ID NO.4所示氨基酸序列的GuCSyGT或GuCSyGT突变体；葡萄糖醛酸基转移酶的氨基酸序列选自：SEQ ID NO.26、SEQ ID NO.28、SEQ ID NO.30、SEQ ID NO.32。所述葡萄糖醛酸基转移酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.6所示；UDP‑葡萄糖脱氢酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明的工程菌和生产方法在30mL发酵规模下的18α‑GAMG的产量高达50mg/L，18α‑GL的产量高达40mg/L。
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公开(公告)号：CN118546805A
公开(公告)日：2024-08-27
申请号：CN202410644736.6
申请日：2024-05-23
Abstract: 本发明涉及基因工程领域，具体涉及生产石竹烯的基因工程菌株及其构建方法。该基因工程菌株的出发菌株为酿酒酵母；在基因工程菌株的基因组中，第一基因的内源启动子被替换为第一启动子，其中第一基因选自由ERG9、ERG1、ERG7和ERG11组成的组；第一启动子独立地选自由以下组成的组：PERG1、PERG7、PBTS1、PHXT1、PHXT4、PHXT6、PHXT7和PHXT11，或与其具有至少85％同一性的变体。本发明通过组合调控石竹烯合成的下游基因(第一基因)和精确调控转录因子(第二基因)使得菌株在代谢流平衡的同时供应大量前体用于合成石竹烯，所获得的菌株遗传性能稳定，适合发酵产业工业化应用。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN118207186A
公开(公告)日：2024-06-18
申请号：CN202410627081.1
申请日：2024-05-20
Applicant: 北京理工大学
Abstract: 本发明一种β‑葡萄糖醛酸苷酶及其重组表达载体、工程菌、发酵剂和量产甘草次酸的方法属于酶工程和微生物技术领域。所述β‑葡萄糖醛酸苷酶选自：β‑葡萄糖醛酸苷酶AcGUS、AcGUS1、AcGUS2、AcGUS3、AcGUS3突变体；AcGUS为GenBank登录号为AEK69352.1的氨基酸序列的第1位氨基酸缺失、第7位丙氨酸突变为甘氨酸、第66位精氨酸突变为赖氨酸、第256位丙氨酸突变为缬氨酸、第270位苏氨酸突变为丙氨酸、第332位缬氨酸突变为苯丙氨酸、第363位天冬氨酸突变为谷氨酸、第506位甲硫氨酸突变为缬氨酸所得的酶。本发明简单高效、可工业化规模制备18α‑GA和18β‑GA。
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公开(公告)号：CN115418323A
公开(公告)日：2022-12-02
申请号：CN202211220324.7
申请日：2022-10-08
Applicant: 北京理工大学
Abstract: 本发明“一种巴斯德毕赤酵母菌株AtAc3及其应用、发酵剂与甘草次酸制备方法”，属于微生物技术领域。本发明提供一种巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)菌株AtAc3，其保藏编号为CGMCC No.25102。本发明还提供菌株AtAc3在水解单葡萄糖醛酸甘草次酸和/或水解甘草酸方面的用途，基于该菌株AtAc3的制备甘草次酸的发酵剂和方法。本发明菌株AtAc3的对甘草酸的转化率高达96.58％，具有转化效率高、中间产物积累量少、发酵黏度低等优点，为绿色生产甘草次酸的工业应用奠定了重要基础。
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公开(公告)号：CN111411089A
公开(公告)日：2020-07-14
申请号：CN202010133761.X
申请日：2020-03-02
Applicant: 北京理工大学
Abstract: 本发明公开了一种对植物P450进行理性设计，提高其催化活性以及催化的区域选择性和化学选择性，从而特异性地或高效地合成目标产物的方法。利用该方法分别实现了五种稀有甘草三萜类化合物在酵母中的合成，包括甘草次酸、30-OH-11-oxo-β-香树脂醇、29-OH-11-oxo-β-香树脂醇、甘草次醛的特异性合成，以及11-脱氧-甘草次酸的高效合成。解决了当前酵母合成11-脱氧-甘草次酸效率低，且无法特异性合成甘草次酸、高价值甘草次酸中间体与其相应的其同分异构体的问题，从而有效地解决植物P450催化杂泛性导致的多种结构类似物同时积累而难以分离纯化的问题。
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公开(公告)号：CN110358754A
公开(公告)日：2019-10-22
申请号：CN201910023085.8
申请日：2019-01-10
Applicant: 北京理工大学
Abstract: 本发明涉及一种提高毕赤酵母表面展示β-葡萄糖醛酸苷酶活性的方法。该方法包括：(1)将来自于酿酒酵母基因组的Agα1蛋白的编码基因与来源于米曲霉β-葡萄糖醛酸酶(PGUS)的编码基因融合，导入到毕赤酵母细胞中，得到通过Agα1表面展示PGUS的重组酵母细胞；(2)将来自于酿酒酵母基因组的Pir1蛋白的编码基因与PGUS的编码基因融合，导入(1)获得的重组毕赤酵母细胞中，得到Agα1与Pir1两种锚定蛋白共同展示PGUS的重组酵母菌株。实验证明，这种方法能够显著增加毕赤酵母表面展示PGUS蛋白的量，且大幅提高了PGUS的稳定性。该方法解决了通过酶解法转化甘草酸为甘草次酸过程中存在的GUS不稳定与低效率的问题，同时对优化酵母表面展示效率的研究提供了方法指导。
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公开(公告)号：CN109628427A
公开(公告)日：2019-04-16
申请号：CN201811564903.7
申请日：2018-12-20
Applicant: 北京理工大学
IPC: C12N9/24 , C07K19/00 , C12N15/62 , C12N15/70 , C12N15/81 , C12N1/21 , C12N1/19 , C12P33/00 , C12R1/19 , C12R1/84
CPC classification number: C12N9/2402 , C07K2319/30 , C12N15/70 , C12N15/815 , C12P33/00 , C12Y302/01031
Abstract: 本发明“一种高效制备甘草次酸的重组酶及方法”，属于酶工程领域。所述重组酶包括来源于土曲霉的β‑葡萄糖醛酸苷酶AtGUS的TIM桶结构域、及来源于米曲霉的β‑葡萄糖醛酸苷酶PGUS的糖基结构域SBD和免疫球蛋白状β‑三明治结构域IMD。该重组酶AtGUS‑mix性状优良，60℃下的热稳定性比野生酶AtGUS高550％，且比酶活比野生酶AtGUS和PGUS分别高2和6.9倍。重组酶AtGUS‑mix的底物转化率达到95.06％，GA的收率达到98.82％。产物GA终浓度为19.22mM，是野生酶PGUS的5.7倍、AtGUS的2.6倍。
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