一种油松体胚发生介导的稳定遗传转化方法

    公开(公告)号:CN118360325A

    公开(公告)日:2024-07-19

    申请号:CN202410405117.1

    申请日:2024-04-07

    Abstract: 本发明公开了一种油松体胚发生介导的稳定遗传转化方法,包括采用农杆菌对油松胚性组织进行浸染处理,然后将浸染处理后的胚性组织接种于筛选培养基上进行抗性胚性组织的筛选培养。对筛选的抗性胚性组织进行成熟培养和萌发培养,获得转基因再生植株。本发明建立了一套稳定高效的油松遗传转化体系,可利用基因工程手段对油松进行快速定向遗传改良。该发明为研究油松本体内基因调控、基因功能验证、蛋白质互作、下游靶基因筛选等提供便捷工具,也为针叶树遗传改良和良种繁育提供新的理论基础。

    一种发根根瘤菌介导的油松不定根遗传转化方法

    公开(公告)号:CN118291529A

    公开(公告)日:2024-07-05

    申请号:CN202410718122.8

    申请日:2024-06-05

    Abstract: 本发明提供了一种发根根瘤菌介导的油松不定根遗传转化方法,将带有RUBY报告基因的载体转化到发根根瘤菌中;当油松种子苗的茎长距根部超过3cm时,切掉根部,将伤口处浸没在发根根瘤菌重悬液中,并进行抽真空;将植株根部伤口处裹满发根根瘤菌菌体后,移栽至土培基质中培养30~45d,当愈伤组织分化为再生不定根时,观察再生不定根的颜色,判断是否为植物阳性转化不定根。本发明所述构建的体系突破了油松遗传转化困难的技术屏障,为油松重要基因的功能以及根茎之间信号转导等相关研究工作提供了技术操作手段,并且为后续油松乃至其他针叶树种的关键功能基因功能鉴定以及遗传修饰种质创制提供了技术支撑和指导。

    一种Pt9G41650基因及其蛋白在判定油松种子休眠程度中的应用

    公开(公告)号:CN117887734A

    公开(公告)日:2024-04-16

    申请号:CN202410288165.7

    申请日:2024-03-14

    Abstract: 本发明属于农业生物技术领域,具体涉及一种Pt9G41650基因及其蛋白在判定油松种子休眠程度中的应用。本发明提供了Pt9G41650基因及其蛋白,Pt9G41650基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,该基因及其蛋白均能用于判定油松种子的休眠程度。此外,本发明还提供了特异性扩增上述基因的引物对,使用该引物对能特异性扩增Pt9G41650基因,并通过比较待测样本和参考样本中Pt9G41650基因的表达量,能够实现对待测样本休眠程度的准确判定。实验证明,本发明提供的技术方案可准确反映出油松种子的休眠程度,且精度更高,科学性更强,可重复性好。

    一种樟子松针叶原生质体的制备方法及应用

    公开(公告)号:CN110724660A

    公开(公告)日:2020-01-24

    申请号:CN201911139202.3

    申请日:2019-11-20

    Abstract: 本发明公开了一种制备樟子松针叶原生质体的方法,属于物细胞生物技术领域。所述方法包括(1)获得墇子松幼苗针叶,获得所述针叶叶条;(2)将所述叶条进行预处理;(3)将叶条放入酶解液中进行酶解;(4)将叶条从酶解液中取出,放入W5'溶液中,室温、避光、振荡,使得原生质体释放至所述W5'溶液中;(5)将包含原生质体的W5'溶液转移至100μm的尼龙网上进行过滤;(6)将包含原生质体的W5'溶液置于冰上30min,吸取上清液,加入预冷的W5'溶液中重悬原生质体。利用本发明,可获得较多数量并且状态良好、耐受性强的原生质体。

    一种Pt6G00980基因及其蛋白在判定油松种子萌发活力中的应用

    公开(公告)号:CN119876188A

    公开(公告)日:2025-04-25

    申请号:CN202510361379.7

    申请日:2025-03-26

    Abstract: 本发明公开了一种Pt6G00980基因及其蛋白在判定油松种子萌发活力中的应用,涉及生物技术领域。该基因的表达量与萌发活力呈负相关,随着油松种子的萌发而逐渐降低。本发明还提供检测该基因的引物组,通过使用本发明提供的引物组对待测样本的cDNA和参考样本的cDNA进行定量PCR扩增,并比较待测样本和参考样本中Pt6G00980基因的表达量,能够实现对待测样本萌发活力的准确判定。与传统的依赖观察种子萌发率及生理指标的分辨方法相比,本发明提供的技术方案可准确反映出油松种子的萌发活力,且精度更高,科学性更强,可重复性好。

    一种Pt9G41650基因及其蛋白在判定油松种子休眠程度中的应用

    公开(公告)号:CN117887734B

    公开(公告)日:2024-05-28

    申请号:CN202410288165.7

    申请日:2024-03-14

    Abstract: 本发明属于农业生物技术领域,具体涉及一种Pt9G41650基因及其蛋白在判定油松种子休眠程度中的应用。本发明提供了Pt9G41650基因及其蛋白,Pt9G41650基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,该基因及其蛋白均能用于判定油松种子的休眠程度。此外,本发明还提供了特异性扩增上述基因的引物对,使用该引物对能特异性扩增Pt9G41650基因,并通过比较待测样本和参考样本中Pt9G41650基因的表达量,能够实现对待测样本休眠程度的准确判定。实验证明,本发明提供的技术方案可准确反映出油松种子的休眠程度,且精度更高,科学性更强,可重复性好。

    一种挖掘油松年龄相关基因的方法

    公开(公告)号:CN115995269A

    公开(公告)日:2023-04-21

    申请号:CN202211547264.X

    申请日:2022-12-05

    Abstract: 本发明提供了一种挖掘油松年龄相关基因的方法,属于基因工程技术领域,包括:构建不同年龄的油松茎段的转录组数据集,获得原始数据;分析差异表达基因;利用差异表达基因确定皮尔逊相关系数的分界值,通过PCC的分界值构建多个基因表达网络;对基因表达网络中的TF表达量进行单调性测绘,以确定种子基因;将种子基因进行BFS算法运算,获得多个时序层级基因表达网络模型;根据获得的时序层级基因表达网络模型中出现的核心连接点基因,作为油松年龄相关基因。本发明成功挖掘出与年龄性状密切相关的基因DAL35,为分析油松老化分子机制奠定了基础,也为改善油松老化现象提供了遗传资源和技术支持。

Patent Agency Ranking