公开(公告)号：CN110724660B

公开(公告)日：2021-11-23

申请号：CN201911139202.3

申请日：2019-11-20

Applicant: 北京林业大学

Inventor： 李伟 ,  朱茜雅 ,  韩方旭 ,  钮世辉

IPC: C12N5/04

Abstract: 本发明公开了一种制备樟子松针叶原生质体的方法，属于物细胞生物技术领域。所述方法包括（1）获得墇子松幼苗针叶，获得所述针叶叶条；（2）将所述叶条进行预处理；（3）将叶条放入酶解液中进行酶解；（4）将叶条从酶解液中取出，放入W5'溶液中，室温、避光、振荡，使得原生质体释放至所述W5'溶液中；（5）将包含原生质体的W5'溶液转移至100μm的尼龙网上进行过滤；（6）将包含原生质体的W5'溶液置于冰上30min，吸取上清液，加入预冷的W5'溶液中重悬原生质体。利用本发明，可获得较多数量并且状态良好、耐受性强的原生质体。

公开(公告)号：CN110724660A

公开(公告)日：2020-01-24

申请号：CN201911139202.3

申请日：2019-11-20

Applicant: 北京林业大学

Inventor： 李伟 ,  朱茜雅 ,  韩方旭 ,  钮世辉

IPC: C12N5/04

Abstract: 本发明公开了一种制备樟子松针叶原生质体的方法，属于物细胞生物技术领域。所述方法包括（1）获得墇子松幼苗针叶，获得所述针叶叶条；（2）将所述叶条进行预处理；（3）将叶条放入酶解液中进行酶解；（4）将叶条从酶解液中取出，放入W5'溶液中，室温、避光、振荡，使得原生质体释放至所述W5'溶液中；（5）将包含原生质体的W5'溶液转移至100μm的尼龙网上进行过滤；（6）将包含原生质体的W5'溶液置于冰上30min，吸取上清液，加入预冷的W5'溶液中重悬原生质体。利用本发明，可获得较多数量并且状态良好、耐受性强的原生质体。