受稻瘟菌诱导的启动子及其应用

    公开(公告)号:CN101935660A

    公开(公告)日:2011-01-05

    申请号:CN201010270229.9

    申请日:2010-09-02

    Applicant: 北京大学

    Abstract: 本发明公开了水稻中受稻瘟菌诱导的启动子。本发明所提供的受稻瘟菌诱导的启动子,为如下1)-3)中任一所述的DNA分子:1)其核苷酸序列选自序列表中序列1,且具有序列表中序列1自5’末端第868位到1101位的核苷酸序列,同时其自5’末端第一位核苷酸位于序列表中序列1自5’末端第1位到868位中的任一位置;2)在严格条件下与1)的DNA分子杂交且具有相同功能的DNA分子;3)与1)或2)的DNA分子具有90%以上同源性且具有相同功能的DNA分子。本发明有助于将水稻中受稻瘟菌诱导的启动子应用于增强植物抗病防御反应速率的分子育种中,具有重要的实践意义。

    一种表达虎纹捕鸟蛛毒素-I的方法及其专用载体

    公开(公告)号:CN100383250C

    公开(公告)日:2008-04-23

    申请号:CN200410096658.3

    申请日:2004-12-06

    Applicant: 北京大学

    Abstract: 本发明公开了一种表达虎纹捕鸟蛛毒素-I的方法及其专用载体。该表达虎纹捕鸟蛛毒素-I的专用载体是含有虎纹捕鸟蛛毒素-I基因的重组杆状病毒表达载体。所述虎纹捕鸟蛛毒素-I基因的5′端连接有组氨酸标签编码序列;所述带有组氨酸标签编码序列的虎纹捕鸟蛛毒素-I基因具有序列表中序列1的核苷酸序列。表达虎纹捕鸟蛛毒素-I的方法,是将专用表达载体转化含有杆状病毒质粒的大肠杆菌,获得重组杆状病毒,将该重组杆状病毒转染昆虫细胞,表达虎纹捕鸟蛛毒素-I。本发明具有蛋白表达量高(900ng/mL),生物活性高的优点,具有重要的工业应用前景和实际意义。

    一种表达虎纹捕鸟蛛毒素-I的方法及其专用载体

    公开(公告)号:CN1786177A

    公开(公告)日:2006-06-14

    申请号:CN200410096658.3

    申请日:2004-12-06

    Applicant: 北京大学

    Abstract: 本发明公开了一种表达虎纹捕鸟蛛毒素-I的方法及其专用载体。该表达虎纹捕鸟蛛毒素-I的专用载体是含有虎纹捕鸟蛛毒素-I基因的重组杆状病毒表达载体。所述虎纹捕鸟蛛毒素-I基因的5′端连接有组氨酸标签编码序列;所述带有组氨酸标签编码序列的虎纹捕鸟蛛毒素-I基因具有序列表中序列1的核苷酸序列。表达虎纹捕鸟蛛毒素-I的方法,是将专用表达载体转化含有杆状病毒质粒的大肠杆菌,获得重组杆状病毒,将该重组杆状病毒转染昆虫细胞,表达虎纹捕鸟蛛毒素-I。本发明具有蛋白表达量高(900ng/mL),生物活性高的优点,具有重要的工业应用前景和实际意义。

    高通量水稻转基因方法
    16.
    发明授权

    公开(公告)号:CN101979506B

    公开(公告)日:2012-09-05

    申请号:CN201010273112.6

    申请日:2010-09-06

    Applicant: 北京大学

    Abstract: 本发明公开了一种高通量水稻转基因方法。本发明还公开了一种用于基因转化的渗透培养基。该培养基溶剂是水,溶质包括5-10g/L的蔗糖、100-300μL/L Silwet L-77、1-5μg/L的赤霉素和0.1-0.5mg/L的细胞分裂素。本发明提供的水稻转基因方法是将含有待转基因的农杆菌转化液浸渍或淋冲水稻花序,成熟后收获种子,所述种子萌发得到所述转基因水稻;所述含有待转基因的农杆菌转化液的OD600为1.0-1.2。本发明转化效率在2.9~3.6‰。本方法操作简便,可用于大规模基因转化与筛选,并具有效率高、成本低、周期短、通用性强、不受基因型影响,可在不同科、属、种的植物中推广应用,具有广泛的实际应用价值。

    一种腐败螺旋菌及其应用
    17.
    发明授权

    公开(公告)号:CN1295324C

    公开(公告)日:2007-01-17

    申请号:CN200310117123.5

    申请日:2003-12-03

    Applicant: 北京大学

    Abstract: 本发明公开了一种腐败螺旋菌及其应用,其目的是提供一种能溶解鱼腥藻的腐败螺旋菌及其应用,本发明所提供的腐败螺旋菌为腐败螺旋菌(Saprospira sp.)PdY3CGMCC No.1043,它具有溶解鱼腥藻等蓝藻的特性,作为一种有效的湖泊蓝藻水华的生物控藻因子,通过结合环境工程技术,配合其它溶藻因子(如溶解微囊藻的蛭弧菌(Bdellovibrio sp.)S-23 CGMCC No.1045等其它溶藻因子),将在治理蓝藻水华、恢复水体生态系统中得到广泛的应用。

    一种PCR方法
    18.
    发明公开

    公开(公告)号:CN1891832A

    公开(公告)日:2007-01-10

    申请号:CN200510080550.X

    申请日:2005-07-04

    Applicant: 北京大学

    Abstract: 本发明公开了一种具有较高特异性,并且操作简单的PCR方法。该PCR方法,通过模板变性、SiteFinder在低温下与基因组模板退火、单方向延伸,将SiteFinder序列引入基因组序列之中;通过2轮PCR指数倍扩增目标DNA分子,而非目标分子因茎环结构的抑制作用而无法完成指数扩增,从而达到选择性扩增目标分子的目的;通过限制性内切酶识别位点选择性地克隆目标分子;最后,通过已知序列上GSP2下游的GSP3特异性的筛选目标分子。本发明的PCR方法与现有PCR方法相比,具有简单快速、特异性高、通用性强、重复性好、一次扩增片段较长且成本低廉等优点,广泛适用于分子生物学研究中多种目的染色体步查,如转基因动、植物及微生物中外源基因插入位点的鉴定、基因未知区段新基因的分离等。

    一种PCR方法
    19.
    发明授权

    公开(公告)号:CN1220774C

    公开(公告)日:2005-09-28

    申请号:CN03101874.2

    申请日:2003-01-28

    Applicant: 北京大学

    Abstract: 本发明提供了一种PCR方法,它包括以下步骤:1)利用末端转移酶将基因组DNA加Poly d(T)n尾;2)将DNA片段用产生3’-突出端的限制性内切酶进行酶切,产生3’突出末端DNA片段;3)利用DNA聚合酶,以产生3’突出末端的DNA片段为模板与已知序列区的特异引物进行单向PCR反应;4)单向PCR反应特异靶目标DNA的3’-末端多附加一个A碱基、然后与带有3’-T尾的T-linker连接;5)以已知区特异引物和T-linker内的引物扩增目标DNA分子。本发明PCR方法具有简单快速、特异性高、通用性强、重复性好、一次扩增片段较长且成本低廉等优点。可广泛适用于分子生物学研究中多种目的的染色体步查,如转基因动、植物及微生物中外源基因插入位点的鉴定、基因未知区段新基因的分离等。

    一种腐败螺旋菌及其应用
    20.
    发明公开

    公开(公告)号:CN1624107A

    公开(公告)日:2005-06-08

    申请号:CN200310117123.5

    申请日:2003-12-03

    Applicant: 北京大学

    Abstract: 本发明公开了一种腐败螺旋菌及其应用,其目的是提供一种能溶解鱼腥藻的腐败螺旋菌及其应用,本发明所提供的腐败螺旋菌为腐败螺旋菌(Saprospira sp.)PdY3CGMCC №1043,它具有溶解鱼腥藻等蓝藻的特性,作为一种有效的湖泊蓝藻水华的生物控藻因子,通过结合环境工程技术,配合其它溶藻因子(如溶解微囊藻的蛭弧菌(Bdellovibrio sp.)S-23 CGMCC№1045等其它溶藻因子),将在治理蓝藻水华、恢复水体生态系统中得到广泛的应用。

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