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公开(公告)号:CN102399812A
公开(公告)日:2012-04-04
申请号:CN201010276083.9
申请日:2010-09-07
Applicant: 北京大学
Abstract: 本发明公开了凤眼莲的遗传转化方法。该方法包括如下步骤:在授粉后的雨久花科植物雌蕊中的花粉管开始萌发之后和花粉管通道闭合之前,将含有外源基因的重组质粒的溶液或含有外源基因的重组菌的溶液滴加到授粉后的柱头上,使所述外源基因通过花粉管通道导入受精卵细胞,随着受精卵细胞的生长发育,得到转入所述外源基因的种子。实验证明,本发明方法的转化效率高,平均转化率可达1.44%,且得到的转化种子成苗率高。因此,本发明方法在凤眼莲(Eichhomia crassipes)的遗传改良领域将有广阔的应用前景。
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公开(公告)号:CN102399812B
公开(公告)日:2013-04-10
申请号:CN201010276083.9
申请日:2010-09-07
Applicant: 北京大学
Abstract: 本发明公开了凤眼莲的遗传转化方法。该方法包括如下步骤:在授粉后的雨久花科植物雌蕊中的花粉管开始萌发之后和花粉管通道闭合之前,将含有外源基因的重组质粒的溶液或含有外源基因的重组菌的溶液滴加到授粉后的柱头上,使所述外源基因通过花粉管通道导入受精卵细胞,随着受精卵细胞的生长发育,得到转入所述外源基因的种子。实验证明,本发明方法的转化效率高,平均转化率可达1.44%,且得到的转化种子成苗率高。因此,本发明方法在凤眼莲(Eichhomia crassipes)的遗传改良领域将有广阔的应用前景。
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公开(公告)号:CN102876644A
公开(公告)日:2013-01-16
申请号:CN201210345067.X
申请日:2012-09-17
Applicant: 北京大学
Abstract: 本发明公开了一种归巢核酸酶I-PfoP3I及其编码基因和应用。本发明提供了一种蛋白质(归巢核酸酶I-PfoP3I),是如下(a)或(b):(a)由序列表中序列5所示的氨基酸序列组成的蛋白质;(b)将序列5的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有归巢核酸酶活性的由序列1衍生的蛋白质。本发明还保护序列表的序列2自5’末端第1090-1761位核苷酸所示的DNA分子(I型内含子的编码序列)或与其对应的RNA分子(I型内含子)。本发明提供的归巢核酸酶I-PfoP3I具体特定的切割位点,可用于基因工程。本发明提供的I型内含子可用于抑制细菌增殖。本发明对于生物学领域具有重大价值。
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公开(公告)号:CN102876644B
公开(公告)日:2014-11-05
申请号:CN201210345067.X
申请日:2012-09-17
Applicant: 北京大学
Abstract: 本发明公开了一种归巢核酸酶I-PfoP3I及其编码基因和应用。本发明提供了一种蛋白质(归巢核酸酶I-PfoP3I),是如下(a)或(b):(a)由序列表中序列5所示的氨基酸序列组成的蛋白质;(b)将序列5的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有归巢核酸酶活性的由序列1衍生的蛋白质。本发明还保护序列表的序列2自5’末端第1090-1761位核苷酸所示的DNA分子(I型内含子的编码序列)或与其对应的RNA分子(I型内含子)。本发明提供的归巢核酸酶I-PfoP3I具体特定的切割位点,可用于基因工程。本发明提供的I型内含子可用于抑制细菌增殖。本发明对于生物学领域具有重大价值。
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公开(公告)号:CN103525780B
公开(公告)日:2015-06-10
申请号:CN201310464104.3
申请日:2013-10-08
Applicant: 北京大学
IPC: C12N9/12 , C12N15/54 , C12N15/63 , C12N5/10 , C12N1/15 , C12N1/19 , C12N1/21 , C12N15/82 , A01H5/00
Abstract: 本发明公开了水稻钙依赖性蛋白激酶基因及其应用。本发明公开的一种蛋白,为如下(1)或(2)所示:(1)SEQ ID No.2中自N端起第1位至第390位氨基酸所示的蛋白;(2)将SEQ ID No.2中自N端起第1位至第390位氨基酸所示的蛋白经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的蛋白质。本发明对于将水稻中响应病原菌的CDPK应用于增强植物抗病能力的分子育种具有重要的意义。
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公开(公告)号:CN103525780A
公开(公告)日:2014-01-22
申请号:CN201310464104.3
申请日:2013-10-08
Applicant: 北京大学
IPC: C12N9/12 , C12N15/54 , C12N15/63 , C12N5/10 , C12N1/15 , C12N1/19 , C12N1/21 , C12N15/82 , A01H5/00
CPC classification number: C12N9/12 , C12N15/8282 , C12Y207/11001
Abstract: 本发明公开了水稻钙依赖性蛋白激酶基因及其应用。本发明公开的一种蛋白,为如下(1)或(2)所示:(1)SEQ ID No.2中自N端起第1位至第390位氨基酸所示的蛋白;(2)将SEQ ID No.2中自N端起第1位至第390位氨基酸所示的蛋白经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的蛋白质。本发明对于将水稻中响应病原菌的CDPK应用于增强植物抗病能力的分子育种具有重要的意义。
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公开(公告)号:CN101979506B
公开(公告)日:2012-09-05
申请号:CN201010273112.6
申请日:2010-09-06
Applicant: 北京大学
Abstract: 本发明公开了一种高通量水稻转基因方法。本发明还公开了一种用于基因转化的渗透培养基。该培养基溶剂是水,溶质包括5-10g/L的蔗糖、100-300μL/L Silwet L-77、1-5μg/L的赤霉素和0.1-0.5mg/L的细胞分裂素。本发明提供的水稻转基因方法是将含有待转基因的农杆菌转化液浸渍或淋冲水稻花序,成熟后收获种子,所述种子萌发得到所述转基因水稻;所述含有待转基因的农杆菌转化液的OD600为1.0-1.2。本发明转化效率在2.9~3.6‰。本方法操作简便,可用于大规模基因转化与筛选,并具有效率高、成本低、周期短、通用性强、不受基因型影响,可在不同科、属、种的植物中推广应用,具有广泛的实际应用价值。
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公开(公告)号:CN101948869B
公开(公告)日:2012-08-29
申请号:CN201010273113.0
申请日:2010-09-06
Applicant: 北京大学
Abstract: 本发明公开了一种高通量大豆转基因方法。该方法,包括如下步骤:在大豆花的柱头上滴加基因转化液,成熟后收获种子。本方法避免了因剪切柱头带来的组织损伤,对T1代种子的结实率及发芽率的影响小。本发明提供的方法还包括筛选,该筛选包括如下步骤:在所述种子出苗后从真叶完全展开至第1三出叶展开之前,在叶面上喷洒除草剂;进一步筛选可以包括分子生物学检测,上述筛选方法操作流程简单、时间短、成本低,可用于实施高通量的筛选,而且筛选抗性苗的阳性率高,减少了分子检测的工作量。
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公开(公告)号:CN101979506A
公开(公告)日:2011-02-23
申请号:CN201010273112.6
申请日:2010-09-06
Applicant: 北京大学
Abstract: 本发明公开了一种高通量水稻转基因方法。本发明还公开了一种用于基因转化的渗透培养基。该培养基溶剂是水,溶质包括5-10g/L的蔗糖、100-300μL/L Silwet L-77、1-5μg/L的赤霉素和0.1-0.5mg/L的细胞分裂素。本发明提供的水稻转基因方法是将含有待转基因的农杆菌转化液浸渍或淋冲水稻花序,成熟后收获种子,所述种子萌发得到所述转基因水稻;所述含有待转基因的农杆菌转化液的OD600为1.0-1.2。本发明转化效率在2.9~3.6‰。本方法操作简便,可用于大规模基因转化与筛选,并具有效率高、成本低、周期短、通用性强、不受基因型影响,可在不同科、属、种的植物中推广应用,具有广泛的实际应用价值。
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公开(公告)号:CN101948869A
公开(公告)日:2011-01-19
申请号:CN201010273113.0
申请日:2010-09-06
Applicant: 北京大学
Abstract: 本发明公开了一种高通量大豆转基因方法。该方法,包括如下步骤:在大豆花的柱头上滴加基因转化液,成熟后收获种子。本方法避免了因剪切柱头带来的组织损伤,对T1代种子的结实率及发芽率的影响小。本发明提供的方法还包括筛选,该筛选包括如下步骤:在所述种子出苗后从真叶完全展开至第1三出叶展开之前,在叶面上喷洒除草剂;进一步筛选可以包括分子生物学检测,上述筛选方法操作流程简单、时间短、成本低,可用于实施高通量的筛选,而且筛选抗性苗的阳性率高,减少了分子检测的工作量。
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