公开(公告)号：CN1891832A

公开(公告)日：2007-01-10

申请号：CN200510080550.X

申请日：2005-07-04

Applicant: 北京大学

Inventor： 安成才 ,  谭桂红 ,  高音 ,  石苗 ,  张欣跃 ,  何善平 ,  陈章良

IPC: C12P19/34

Abstract: 本发明公开了一种具有较高特异性，并且操作简单的PCR方法。该PCR方法，通过模板变性、SiteFinder在低温下与基因组模板退火、单方向延伸，将SiteFinder序列引入基因组序列之中；通过2轮PCR指数倍扩增目标DNA分子，而非目标分子因茎环结构的抑制作用而无法完成指数扩增，从而达到选择性扩增目标分子的目的；通过限制性内切酶识别位点选择性地克隆目标分子；最后，通过已知序列上GSP2下游的GSP3特异性的筛选目标分子。本发明的PCR方法与现有PCR方法相比，具有简单快速、特异性高、通用性强、重复性好、一次扩增片段较长且成本低廉等优点，广泛适用于分子生物学研究中多种目的染色体步查，如转基因动、植物及微生物中外源基因插入位点的鉴定、基因未知区段新基因的分离等。

公开(公告)号：CN100513577C

公开(公告)日：2009-07-15

申请号：CN200510080550.X

申请日：2005-07-04

Applicant: 北京大学

Inventor： 安成才 ,  谭桂红 ,  高音 ,  石苗 ,  张欣跃 ,  何善平 ,  陈章良

IPC: C12P19/34

Abstract: 本发明公开了一种具有较高特异性，并且操作简单的PCR方法。该PCR方法，通过模板变性、SiteFinder在低温下与基因组模板退火、单方向延伸，将SiteFinder序列引入基因组序列之中；通过2轮PCR指数倍扩增目标DNA分子，而非目标分子因茎环结构的抑制作用而无法完成指数扩增，从而达到选择性扩增目标分子的目的；通过限制性内切酶识别位点选择性地克隆目标分子；最后，通过已知序列上GSP2下游的GSP3特异性的筛选目标分子。本发明的PCR方法与现有PCR方法相比，具有简单快速、特异性高、通用性强、重复性好、一次扩增片段较长且成本低廉等优点，广泛适用于分子生物学研究中多种目的染色体步查，如转基因动、植物及微生物中外源基因插入位点的鉴定、基因未知区段新基因的分离等。