公开(公告)号：CN103266122A

公开(公告)日：2013-08-28

申请号：CN201310209089.8

申请日：2013-05-31

Applicant: 云南农业大学

Inventor： 魏红江 ,  申友锋 ,  赵红业 ,  李鸿辉 ,  卿玉波 ,  潘伟荣 ,  富国文

IPC: C12N15/63 ,  C12N5/10

Abstract: 本发明涉及一种利用TALEN技术的高效定点转基因方法，属于分子生物学领域；利用TALEN技术在生物体基因组中的特定位置设计出具有特异性序列TALEN靶点、构建TALEN质粒，同时，构建外源基因质粒；再将TALEN质粒和外源基因共同转染受体细胞，然后，在受体细胞基因组待整合的位置上切开一个口；外源基因就会在受体细胞基因组的切口处将外源基因序列自动插入。本发明实现了外源基因在基因组上定点整合，本方法操作简单，可控性高，实用性强。

公开(公告)号：CN119177256A

公开(公告)日：2024-12-24

申请号：CN202311457371.8

申请日：2023-11-03

Applicant: 云南农业大学

Inventor： 魏红江 ,  角德灵 ,  赵恒 ,  王娇祥 ,  徐凯祥 ,  赵红业 ,  郭建雄 ,  魏太云

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/113 ,  C12N15/12 ,  C12N5/10 ,  C12N9/22 ,  C12N15/877 ,  C12N15/90 ,  C12R1/91

Abstract: 本发明涉及一种八基因编辑异种器官移植供体猪的构建方法，属动物生物技术领域。在野生型猪胎儿成纤维细胞系中，利用CRISPR/Cas9基因编辑技术敲除GGTA1、β4GalNT2、CMAH基因，转入hCD39、hCD46、hCD55、hCD59、hTBM人源化基因，结合体细胞克隆技术，构建GTKO/β4GalNT2KO/CMAHKO/hCD39/hCD46/hCD55/hCD59/hTBM八基因编辑克隆猪，进一步通过基因型、mRNA、蛋白表达鉴定及功能分析，获得八基因编辑异种器官移植供体猪。本发明解决了多基因编辑异种器官移植供体猪生产难度大、效率低、供体猪成活率低的技术难题，最大限度地解决了异种器官移植过程中面临的免疫排斥反应及补体失调共性问题，为更有针对性地开发适合不同组织器官异种移植供体猪奠定了基础，对推动异种器官移植临床转化具有重要的价值。

公开(公告)号：CN113249456B

公开(公告)日：2023-05-23

申请号：CN202110557343.8

申请日：2021-05-21

Applicant: 云南农业大学

Inventor： 魏红江 ,  赵红业 ,  赵恒 ,  角德灵 ,  范柠粼

IPC: C12Q1/6869 ,  C12Q1/06

Abstract: 本发明涉及一种快速筛选基因编辑猪阳性细胞系的方法，属动物转基因技术领域。本发明针对已知的不同基因编辑类型的猪阳性成纤维细胞系，进行PCR、酶切及测序鉴定，基于细胞PCR条带灰度值，筛选获得细胞基因型鉴定所需的最低细胞量；将目的基因表达载体转染至猪成纤维细胞并进行单细胞培养筛选，当单克隆细胞系形成时，抠取后于培养板扩大培养并按上述最低细胞量计数进行基因型鉴定，经鉴定后立即进行体细胞核移植，取出胎儿分离培养及鉴定后获得大量转基因猪阳性成纤维细胞系。本发明克服了基因编辑猪阳性细胞系筛选周期长、效率低、成功率低的问题，对促进转基因猪的生产具有重要的意义。

公开(公告)号：CN110373390A

公开(公告)日：2019-10-25

申请号：CN201910497791.6

申请日：2019-06-10

Applicant: 云南农业大学

Inventor： 魏红江 ,  赵红业 ,  赵恒 ,  角德灵 ,  徐凯祥

IPC: C12N5/10 ,  C12N15/877 ,  A01K67/027

Abstract: 本发明涉及一种异种器官移植基础供体猪的构建方法，属动物生物技术领域。在胎儿成纤维细胞的基础上，利用CRISPR/Cas9基因编辑技术敲除GGTA1、CMAH、B4GalNT2三个基因，并定点插入hCD55、hCD59、hCD46三个人源化修饰基因，结合体细胞核移植技术构建GTKO/CMAHKO/B4GalNT2KO/hCD55/hCD59/hCD46多基因修饰的异种移植供体基础猪。本发明在一定程度上解决了异种器官移植中存在的抗原抗体免疫排斥反应及补体调节的共性问题，为在基础供体猪的基础上研究开发适合心脏、肾脏、肝脏等器官及胰岛、皮肤等组织特异性的异种器官移植供体猪的构建奠定了基础，对构建多基因修饰的异种移植供体猪具有重要的应用价值和应用前景。

公开(公告)号：CN106106195B

公开(公告)日：2017-07-28

申请号：CN201610665810.8

申请日：2016-08-15

Applicant: 云南农业大学 ,  魏红江

Inventor： 魏红江 ,  角德灵 ,  赵红业 ,  王跃宁 ,  芮绍辉 ,  何瑞清 ,  钟文庆 ,  余波

IPC: A01K1/00

Abstract: 本发明属于畜牧养殖技术领域，具体地说，涉及一种装配式可移动标准化饲养羊舍。所述的装配式可移动标准化饲养羊舍主要包括地形调整平台、羊舍底板、羊舍墙体、羊舍屋顶、羊舍内部设施，其组装式标准化摸块由工厂统一加工而成，本发明中整个羊舍房处于悬粪且稳定牢固，建设不受任何地形结构、地貌特征等因素的限制，适用范围较广，不会改变土地的使用性质，可以二次循环使用，装配较简单、方便，可根据不同的需要随时进行组装和拆卸，生态环保，建设周期短、成本低，能够充分地发挥中国西南山区、半山区的山羊等生物资源优势，特别适用于中国西南贫困山区、半山区等地区的养殖户发展山羊养殖业，是使贫困地区农养殖户实现脱贫致富的有效途径。

公开(公告)号：CN106755112A

公开(公告)日：2017-05-31

申请号：CN201611224097.X

申请日：2016-12-27

Applicant: 云南农业大学

Inventor： 魏红江 ,  王文 ,  卿玉波 ,  赵红业 ,  角德灵

IPC: C12N15/877 ,  A01K67/027

CPC classification number: C12N15/877 ,  A01K67/0273 ,  A01K2227/10 ,  A01K2227/102 ,  A01K2227/103 ,  C12N15/8772 ,  C12N15/8773

Abstract: 本发明涉及一种利用体细胞克隆技术培育地方优良家畜品种的方法。利用体细胞克隆技术培育家畜优良品种，通过从家畜群体中筛选出经济性状优良的个体，建立成纤维细胞系，利用体细胞核移植技术对上述筛选出的个体进行克隆，待克隆出生的个体达到适配年龄后，进行组合杂交，再对每一杂交组合的F1代个体的经济性状进行鉴定，对达不到选育标准的F1代个体父母，查明是父代还是母代遗传引起的性状，然后对相应的父母个体进行淘汰，对留下的后代个体中可以稳定遗传的父母再进行组群，选育出优良家畜品种。通过对本发明的实施，能批量地获得具有极其优良经济性状的家畜个体，实现家畜特有品种资源的可持续开发利用，提高家畜的育种效率和选育的成功率。

公开(公告)号：CN117987465A

公开(公告)日：2024-05-07

申请号：CN202410034211.0

申请日：2024-01-10

Applicant: 云南农业大学

Inventor： 魏红江 ,  赵恒 ,  赵红业 ,  王娇祥 ,  角德灵 ,  郭建雄 ,  魏太云 ,  徐凯祥

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/113 ,  C12N15/12 ,  C12N5/10 ,  C12N9/22 ,  C12N15/877 ,  C12N15/90 ,  C12R1/91

Abstract: 本发明涉及一种十基因编辑异种器官移植供体猪的构建方法，属动物生物技术领域。在野生型猪胎儿成纤维细胞系中，敲除GGTA1、β4GalNT2、CMAH基因，转入hCD39、hCD46、hCD47、hCD55、hCD59、hTBM、hEPCR人源化基因，构建GTKO/β4GalNT2KO/CMAHKO/hCD39/hCD46/hCD47/hCD55/hCD59/hTBM/hEPCR十基因编辑克隆猪，进一步对克隆猪基因型鉴定、mRNA和蛋白表达分析，获得十基因编辑异种器官移植供体猪。本发明通过对猪抗原基因敲除并转入人源化基因进行组合修饰，解决了异种器官移植过程中面临的超急性免疫排斥反应、抗原‑抗体介导的免疫排斥反应、受体免疫细胞活化及凝血障碍等问题，克服了现有克隆猪生产率低、存活率低及基因编辑成功率低等障碍，对促进猪‑非人灵长类异种器官移植临床前研究和猪‑人异种器官移植临床化应用具有重要的应用价值。

公开(公告)号：CN114015722B

公开(公告)日：2023-11-10

申请号：CN202111301287.8

申请日：2021-11-04

Applicant: 云南农业大学

Inventor： 魏红江 ,  陈清烽 ,  赵恒 ,  角德灵 ,  赵红业

IPC: C12N15/85 ,  C12N5/10 ,  C12N15/12 ,  C12N5/077 ,  A01K67/027

Abstract: 本发明涉及一种构建重症免疫缺陷和肝损伤双重猪模型的方法及应用，属动物生物技术领域。该方法采用CRISPR/Cas9技术敲除猪胎儿成纤维细胞中RAG2、IL2RG和FAH基因，利用体细胞核移植技术构建RAG2‑/‑/IL2RG‑/Y/FAH‑/‑三基因编辑克隆猪，经表型分析鉴定获得重症免疫缺陷及肝损伤双重猪模型。本发明克服了现有模型构建技术中生产周期长、效率低、损伤不可逆、缺乏免疫缺陷和肝损伤同时应用人源化程度不理想等问题，可通过连续克隆技术实现批量构建重症免疫缺陷和肝损伤双重猪模型，在肿瘤生物学、细胞移植及人源化动物模型等相关领域具有巨大的优势和潜在的市场应用前景。

公开(公告)号：CN114015722A

公开(公告)日：2022-02-08

申请号：CN202111301287.8

申请日：2021-11-04

Applicant: 云南农业大学

Inventor： 魏红江 ,  陈清烽 ,  赵恒 ,  角德灵 ,  赵红业

IPC: C12N15/85 ,  C12N5/10 ,  C12N15/12 ,  C12N5/077 ,  A01K67/027

Abstract: 本发明涉及一种构建重症免疫缺陷和肝损伤双重猪模型的方法及应用，属动物生物技术领域。该方法采用CRISPR/Cas9技术敲除猪胎儿成纤维细胞中RAG2、IL2RG和FAH基因，利用体细胞核移植技术构建RAG2‑/‑/IL2RG‑/Y/FAH‑/‑三基因编辑克隆猪，经表型分析鉴定获得重症免疫缺陷及肝损伤双重猪模型。本发明克服了现有模型构建技术中生产周期长、效率低、损伤不可逆、缺乏免疫缺陷和肝损伤同时应用人源化程度不理想等问题，可通过连续克隆技术实现批量构建重症免疫缺陷和肝损伤双重猪模型，在肿瘤生物学、细胞移植及人源化动物模型等相关领域具有巨大的优势和潜在的市场应用前景。

公开(公告)号：CN106106195A

公开(公告)日：2016-11-16

申请号：CN201610665810.8

申请日：2016-08-15

Applicant: 云南农业大学 ,  魏红江

Inventor： 魏红江 ,  角德灵 ,  赵红业 ,  王跃宁 ,  芮绍辉 ,  何瑞清 ,  钟文庆 ,  余波

IPC: A01K1/00

CPC classification number: A01K1/00

Abstract: 本发明属于畜牧养殖技术领域，具体地说，涉及一种装配式可移动标准化饲养羊舍。所述的装配式可移动标准化饲养羊舍主要包括地形调整平台、羊舍底板、羊舍墙体、羊舍屋顶、羊舍内部设施，其组装式标准化摸块由工厂统一加工而成，本发明中整个羊舍房处于悬粪且稳定牢固，建设不受任何地形结构、地貌特征等因素的限制，适用范围较广，不会改变土地的使用性质，可以二次循环使用，装配较简单、方便，可根据不同的需要随时进行组装和拆卸，生态环保，建设周期短、成本低，能够充分地发挥中国西南山区、半山区的山羊等生物资源优势，特别适用于中国西南贫困山区、半山区等地区的养殖户发展山羊养殖业，是使贫困地区农养殖户实现脱贫致富的有效途径。