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公开(公告)号:CN103266122A
公开(公告)日:2013-08-28
申请号:CN201310209089.8
申请日:2013-05-31
Applicant: 云南农业大学
Abstract: 本发明涉及一种利用TALEN技术的高效定点转基因方法,属于分子生物学领域;利用TALEN技术在生物体基因组中的特定位置设计出具有特异性序列TALEN靶点、构建TALEN质粒,同时,构建外源基因质粒;再将TALEN质粒和外源基因共同转染受体细胞,然后,在受体细胞基因组待整合的位置上切开一个口;外源基因就会在受体细胞基因组的切口处将外源基因序列自动插入。本发明实现了外源基因在基因组上定点整合,本方法操作简单,可控性高,实用性强。
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公开(公告)号:CN116640803B
公开(公告)日:2024-09-13
申请号:CN202310428544.7
申请日:2023-04-20
Applicant: 云南农业大学
IPC: C12N15/877 , C12N5/077 , A01K67/0273
Abstract: 本发明涉及一种通过秋水仙素诱导多倍体猪的方法。本发明针对二倍体猪成纤维细胞系,利用不同浓度的秋水仙素诱导,通过检测不同浓度诱导后的细胞倍性变化,筛选最佳的秋水仙素浓度,进一步诱导生产多倍体猪细胞系,以此为体细胞核移植的核供体构建猪多倍体克隆胚,再进行胚胎移植生产四倍体猪。本发明首次将秋水仙素成功应用于猪多倍体的诱导中,对促进多倍体猪的生产及育种应用研究具有重要的意义。
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公开(公告)号:CN117987465A
公开(公告)日:2024-05-07
申请号:CN202410034211.0
申请日:2024-01-10
Applicant: 云南农业大学
IPC: C12N15/85 , C12N15/113 , C12N15/12 , C12N5/10 , C12N9/22 , C12N15/877 , C12N15/90 , C12R1/91
Abstract: 本发明涉及一种十基因编辑异种器官移植供体猪的构建方法,属动物生物技术领域。在野生型猪胎儿成纤维细胞系中,敲除GGTA1、β4GalNT2、CMAH基因,转入hCD39、hCD46、hCD47、hCD55、hCD59、hTBM、hEPCR人源化基因,构建GTKO/β4GalNT2KO/CMAHKO/hCD39/hCD46/hCD47/hCD55/hCD59/hTBM/hEPCR十基因编辑克隆猪,进一步对克隆猪基因型鉴定、mRNA和蛋白表达分析,获得十基因编辑异种器官移植供体猪。本发明通过对猪抗原基因敲除并转入人源化基因进行组合修饰,解决了异种器官移植过程中面临的超急性免疫排斥反应、抗原‑抗体介导的免疫排斥反应、受体免疫细胞活化及凝血障碍等问题,克服了现有克隆猪生产率低、存活率低及基因编辑成功率低等障碍,对促进猪‑非人灵长类异种器官移植临床前研究和猪‑人异种器官移植临床化应用具有重要的应用价值。
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公开(公告)号:CN114015722B
公开(公告)日:2023-11-10
申请号:CN202111301287.8
申请日:2021-11-04
Applicant: 云南农业大学
IPC: C12N15/85 , C12N5/10 , C12N15/12 , C12N5/077 , A01K67/027
Abstract: 本发明涉及一种构建重症免疫缺陷和肝损伤双重猪模型的方法及应用,属动物生物技术领域。该方法采用CRISPR/Cas9技术敲除猪胎儿成纤维细胞中RAG2、IL2RG和FAH基因,利用体细胞核移植技术构建RAG2‑/‑/IL2RG‑/Y/FAH‑/‑三基因编辑克隆猪,经表型分析鉴定获得重症免疫缺陷及肝损伤双重猪模型。本发明克服了现有模型构建技术中生产周期长、效率低、损伤不可逆、缺乏免疫缺陷和肝损伤同时应用人源化程度不理想等问题,可通过连续克隆技术实现批量构建重症免疫缺陷和肝损伤双重猪模型,在肿瘤生物学、细胞移植及人源化动物模型等相关领域具有巨大的优势和潜在的市场应用前景。
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公开(公告)号:CN114015722A
公开(公告)日:2022-02-08
申请号:CN202111301287.8
申请日:2021-11-04
Applicant: 云南农业大学
IPC: C12N15/85 , C12N5/10 , C12N15/12 , C12N5/077 , A01K67/027
Abstract: 本发明涉及一种构建重症免疫缺陷和肝损伤双重猪模型的方法及应用,属动物生物技术领域。该方法采用CRISPR/Cas9技术敲除猪胎儿成纤维细胞中RAG2、IL2RG和FAH基因,利用体细胞核移植技术构建RAG2‑/‑/IL2RG‑/Y/FAH‑/‑三基因编辑克隆猪,经表型分析鉴定获得重症免疫缺陷及肝损伤双重猪模型。本发明克服了现有模型构建技术中生产周期长、效率低、损伤不可逆、缺乏免疫缺陷和肝损伤同时应用人源化程度不理想等问题,可通过连续克隆技术实现批量构建重症免疫缺陷和肝损伤双重猪模型,在肿瘤生物学、细胞移植及人源化动物模型等相关领域具有巨大的优势和潜在的市场应用前景。
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公开(公告)号:CN113907013A
公开(公告)日:2022-01-11
申请号:CN202111024050.X
申请日:2021-09-02
Applicant: 云南农业大学 , 苏州市冯氏实验动物设备有限公司
Abstract: 本发明涉及一种实验小型猪饲养栏,属于实验小型猪养殖技术领域。包括支撑架、漏粪板、粪盘、隔栏;所述的支撑架底部卡接有漏粪板,漏粪板上均匀间隔设有漏粪孔,支撑架上滑动安装有位于漏粪板下方的粪盘,支撑架四周固定安装有围栏,支撑架前侧中部和后侧中部对应安装有竖直的滑杆,隔栏前后两端分别设有与滑杆相匹配的滑槽。本发明所述的饲养栏中部设置拆卸及安装方便的隔栏,根据饲养规模,拆除或安装隔栏,适用性缩小或扩大猪只饲养空间,能最大限度地节约饲养空间和降低饲养成本,同时,通过设置漏粪板及粪盘,快速排出饲养栏内猪只排泄物,保证饲养环境整洁,使小型猪能够健康生长,加快洁净级和SPF级实验小型猪的培育和推广利用。
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公开(公告)号:CN113907012A
公开(公告)日:2022-01-11
申请号:CN202111024021.3
申请日:2021-09-02
Applicant: 云南农业大学 , 苏州市冯氏实验动物设备有限公司
Abstract: 本发明涉及一种实验小型猪饲养笼,属于实验小型猪养殖技术领域。包括支撑架、漏粪板、粪盘、围栏、可拆卸侧栏;所述的支撑架底部卡接有漏粪板,漏粪板上设有漏粪孔,支撑架上滑动安装有位于漏粪板下方的粪盘,支撑架前后两侧面固定安装有围栏,支撑架左右两侧面上滑动安装有可拆卸侧栏。通过可拆卸侧栏,根据饲养需要,抽出或插入并列放置的两个饲养笼相邻侧面上的可拆卸侧栏,将两个或者多个饲养笼内部连通起来,适用性缩小或扩大猪只饲养空间,能最大限度地节约饲养空间和降低饲养成本,同时,通过设置漏粪板及粪盘,快速排出饲养栏内猪只排泄物,保证饲养环境整洁,使小型猪能够健康生长,加快洁净级和SPF级实验小型猪的培育和推广利用。
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公开(公告)号:CN106106195A
公开(公告)日:2016-11-16
申请号:CN201610665810.8
申请日:2016-08-15
IPC: A01K1/00
CPC classification number: A01K1/00
Abstract: 本发明属于畜牧养殖技术领域,具体地说,涉及一种装配式可移动标准化饲养羊舍。所述的装配式可移动标准化饲养羊舍主要包括地形调整平台、羊舍底板、羊舍墙体、羊舍屋顶、羊舍内部设施,其组装式标准化摸块由工厂统一加工而成,本发明中整个羊舍房处于悬粪且稳定牢固,建设不受任何地形结构、地貌特征等因素的限制,适用范围较广,不会改变土地的使用性质,可以二次循环使用,装配较简单、方便,可根据不同的需要随时进行组装和拆卸,生态环保,建设周期短、成本低,能够充分地发挥中国西南山区、半山区的山羊等生物资源优势,特别适用于中国西南贫困山区、半山区等地区的养殖户发展山羊养殖业,是使贫困地区农养殖户实现脱贫致富的有效途径。
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公开(公告)号:CN119120568A
公开(公告)日:2024-12-13
申请号:CN202311459475.2
申请日:2023-11-03
Applicant: 云南农业大学
IPC: C12N15/85 , C12N15/113 , C12N15/12 , C12N5/10 , C12N9/22 , C12N15/877 , C12N15/90 , C12R1/91
Abstract: 本发明涉及一种四基因编辑异种器官移植供体猪的构建方法,属动物生物技术领域。在野生型猪胎儿成纤维细胞系中,利用CRISPR/Cas9基因编辑技术敲除GGTA1基因,并转入hCD39、hCD55、hTBM三个人源化基因,结合体细胞核移植技术构建GTKO/hCD39/hCD55/hTBM四基因编辑克隆猪,进一步通过基因型鉴定和蛋白功能表型分析,批量获得四基因编辑异种器官移植供体猪。本发明在一定程度上解决了猪‑人异种器官移植过程中存在的抗原抗体介导的免疫排斥反应共性问题,为进一步研究开发适合心脏、肾脏、肝脏、皮肤等器官/组织异种移植供体猪奠定了基础,对开展猪‑非人灵长类异种器官移植临床前研究和猪‑人异种器官移植临床化应用具有重要的前景。
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公开(公告)号:CN118956960A
公开(公告)日:2024-11-15
申请号:CN202411426219.8
申请日:2024-10-14
Applicant: 云南农业大学
IPC: C12N15/85 , A01K67/0275 , C12N5/077 , C12N15/12
Abstract: 本发明涉及一种通过诱导性表达K‑Ras基因构建小型猪肿瘤模型的方法,通过Tet‑On诱导表达系统与转座子技术结合,构建Tet‑On转座子表达载体PB‑CAG‑Teton3g‑T2A‑mcherry‑TRE3GS‑MCS‑Puro。获得K‑Ras基因编辑阳性细胞细胞系,构建K‑Ras基因编辑克隆胚,并移植至代孕母猪输卵管内,生产K‑Ras基因编辑克隆猪个体,通过饲喂四环素诱导K‑Ras表达,促进克隆猪肿瘤的发生,获得小型猪肿瘤模型。本发明克服了现有模型构建周期长、效率低、表型不明显、基因表达可控性差等技术问题,实现批量K‑Ras基因诱导性表达小型猪肿瘤模型的生产,在肿瘤生物学研究领域具有重要的应用价值和前景。
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