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公开(公告)号：CN116334164A
公开(公告)日：2023-06-27
申请号：CN202310164062.5
申请日：2023-02-24
Applicant: 云南农业大学
Abstract: 本发明涉及一种使用表达雪胆三萜合成酶HcOSC6基因的工程菌制备雪胆素的方法，属于基因工程技术领域，本发明以pYES2‑HcOSC6重组质粒为模板，使用三对引物：SEQ ID.1～2、SEQ ID.3～4、SEQ ID.5～6，进行PCR扩增，得到突变的pYES2‑HcOSC6重组质粒，然后经过DpnI酶切反应后，将突变质粒pYES2‑L250A、pYES2‑Y336A、pYES2‑I551A转化大肠杆菌E.coli DH5α感受态细胞，经过Amp抗性筛选阳性克隆；突变成功的菌体平板划线，挑菌，摇菌，重提质粒，转化到GIL77酿酒酵母感受态细胞，构建工程菌GIL77/pYES2‑HcOSC6。本发明可快速的表达出雪胆素，为雪胆素的生产和提高产量提供了一种新的思路。
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公开(公告)号：CN115161208A
公开(公告)日：2022-10-11
申请号：CN202210045159.X
申请日：2022-01-15
Applicant: 云南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种编码短链脱氢酶的基因能催化葫芦二烯醇生成葫芦素中间体cucurbita‑5‑24‑dien‑3‑one，该酶在葫芦二烯醇的C3位进行脱氢反应形成酮基，形成多数葫芦素的骨架，这极大地推动了对葫芦素生物合成分子机理的认知，也将为葫芦素的全合成奠定基础。目前来源于雪胆、南瓜、西瓜、甜瓜、西葫芦、笋瓜等16种葫芦科植物的短链脱氢酶已经被成功克隆验证功能，并使用来源于雪胆的HcSDR1基因，采用酵母同源重组组装构建酿酒酵母底盘细胞生产目标化合物cucurbita‑5‑24‑dien‑3‑one。
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公开(公告)号：CN111518817B
公开(公告)日：2022-08-23
申请号：CN202010408950.3
申请日：2020-05-14
Applicant: 云南农业大学
Abstract: 本发明公开了雪胆三萜合成酶HcOSC6基因及其工程菌和在制备葫芦二烯醇中的应用。该雪胆三萜合成酶HcOSC6基因具有如SEQ ID No.1所示的核苷酸序列，该工程菌能够表达该雪胆三萜合成酶HcOSC6。在以D‑葡萄糖和D‑半乳糖为碳源的培养基中，本发明的转基因工程菌能够在细胞内表达雪胆三萜合成酶HcOSC6，在雪胆三萜合成酶HcOSC6的催化下，酵母内源的底物2,3‑氧化鲨烯会发生环化反应，生成葫芦二烯醇，葫芦二烯醇产量约为5.5mg/L，不仅提供了生产葫芦二烯醇的重要途径，而且为雪胆素等葫芦素的生物合成提供了丰富原材料。
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公开(公告)号：CN113249355A
公开(公告)日：2021-08-13
申请号：CN202110699995.5
申请日：2018-09-19
Applicant: 云南农业大学
Abstract: 本发明涉及齐墩果酸葡糖醛酸转移酶及其编码基因和应用，属于植物基因工程和生物技术领域。本发明齐墩果酸葡糖醛酸转移酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。核苷酸序列如SEQ ID NO.8所示。本发明齐墩果酸葡糖醛酸转移酶能够特异性地以尿苷二磷酸葡糖醛酸为糖基供体，催化齐墩果酸C‑3位的糖基化反应，从而生成齐墩果酸3‑O‑β‑葡糖醛酸。该转移酶是在齐墩果烷型皂苷合成过程中上游步骤的酶，这对于解析齐墩果烷型皂苷的合成途径，具有重要意义。
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公开(公告)号：CN113249354A
公开(公告)日：2021-08-13
申请号：CN202110699994.0
申请日：2018-09-19
Applicant: 云南农业大学
Abstract: 本发明涉及齐墩果酸葡糖醛酸转移酶及其编码基因和应用，属于植物基因工程和生物技术领域。本发明齐墩果酸葡糖醛酸转移酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。核苷酸序列如SEQ ID NO.8所示。本发明齐墩果酸葡糖醛酸转移酶能够特异性地以尿苷二磷酸葡糖醛酸为糖基供体，催化齐墩果酸C‑3位的糖基化反应，从而生成齐墩果酸3‑O‑β‑葡糖醛酸。该转移酶是在齐墩果烷型皂苷合成过程中上游步骤的酶，这对于解析齐墩果烷型皂苷的合成途径，具有重要意义。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN112316059A
公开(公告)日：2021-02-05
申请号：CN202011284848.3
申请日：2020-11-17
Applicant: 云南农业大学
IPC: A61K36/8984 , A61P11/04 , A61P11/10 , A61P11/14
Abstract: 本发明公开了一种以石斛花三七花茎叶为主要成分的清咽利嗓制剂及其制备工艺。按如下质量百分比的原料制成：铁皮石斛花30‑40%、三七花茎叶20‑30%、薄荷3‑10%、枇杷叶5‑15%、桑叶3‑10%、桔梗5‑10%、金银花5‑15%。其制备工艺是以食用乙醇浸提后，经过滤、浓缩和喷雾干燥得到提取物粉末，采用压片、制粒、制丸、勾兑、封装工艺加工后，即可得到石斛花三七花茎叶清咽利嗓含片、颗粒、丸、饮料等制剂，本发明得到的石斛花三七花茎叶清咽利嗓制剂组分配比科学，使用便捷，具有清咽、利嗓、消肿、化痰、止咳等功效，效果良好。
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公开(公告)号：CN109197464B
公开(公告)日：2020-08-11
申请号：CN201811286692.5
申请日：2018-10-31
Applicant: 云南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种可提高玛咖品质和产量的栽培方法，其具体步骤如下：(1)种植地选择；(2)种子育苗；(3)移栽定植；(4)查缺补苗；(5)田间管理；(6)留种。本发明通过种子包衣，可以防治玛咖种子在生长过程中遭受的虫害(蚜虫、地老虎等)；菌肥的使用改善了土壤的微生物体系，可降低土壤板结，固化，并且增强土壤肥力,能为植物生长提供充足的氮肥，菌肥中的菌株可以分泌生长素(IAA)和茉莉酸甲酯(MeJA)，IAA促进了玛咖的生长发育,MeJA可诱导植物的化学防御，减少病虫害,本发明下的玛咖，品质和产量都大大提高，菌肥栽培下的玛咖比普通栽培下的玛咖酰胺和玛咖烯的含量都提高，并且单株鲜重和根部直径也比普通栽培的大。
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公开(公告)号：CN111411099A
公开(公告)日：2020-07-14
申请号：CN202010408966.4
申请日：2020-05-14
Applicant: 云南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种雪胆乙酰基转移酶及其编码基因和在制备雪胆甲素中的应用，该雪胆乙酰基转移酶具有如SEQ ID No.1所示的氨基酸序列。本发明首次在雪胆中鉴定获得了雪胆甲素合成途径中的关键酶，即，雪胆乙酰基转移酶；该雪胆乙酰基转移酶能够雪胆乙素C-25位的羟基转化为乙酰基，从而获得雪胆甲素；基于此，本发明构建了含有雪胆乙酰基转移酶编码基因的重组载体，并进一步构建了基因工程菌，利用转基因工程菌在体外表达雪胆乙酰基转移酶，经进一步对底物雪胆乙素进行催化，直接获得雪胆甲素，无需再通过种植雪胆属植物后提取雪胆甲素；为大量、快速地制备雪胆甲素提供了重要途径。
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